Способ количественного определения 3-метокси-4 оксибензилиденгидразида изоникотиновой кислоты

Союз Советских Социалистических РеспубликОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИ ИТИЛЬСТВУ 1 в 864074(22) Заявлено 181279 (21) 2858271/23-04с присоединением заявки Мо(23) Приоритет 1,51) М. Кл,С 01 й 21/64,Государственный комитет СССР но делам изобретений и открытийДата опубликования описания 15,0981(54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ 3-МЕТОКСИ-ОКСИБЕНЗИЛИДЕНГИДРАЗИДА ИЗОНИКОТИНОВОЙКИСЛОТЫ Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способамколичественного определения 3-метокси-оксибензилиденгидразида изоникотиновой кислоты (фтивазида).Известен способ определения 3-метокси-оксибензилиденгидразидаизоникотиновой кислоты, заключающийся в обработке анализируемой пробыэтиловым спиртом при кипячении раствора с обработкой горячего раствора сульфатом меди и роданидом аммония с получением желто-ьеленого осадка с последующим весовым определением 3-метокси-оксибензилиденгидразина . 15изоникотиновой кислоты 1.Недостаток способа в низк чувствительность 10 мкг/мл,Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигае мому результату является способ количественного определения 3-метокси - -4-оксибенэилиденгидразида изоникотиновой кислоты, заключающийся в спектрофотометрировании анализируемой 25 пробы 2 .Недостатки данного способа - низкая чувствительность (1,3 мкг/мл) и избирательность (определению мешают почти все органические соединения, ,30 которые поглощают в ультрафиолетовойобласти).о, Целью изобретения является повыше"ние чувствительности и избирательности определения,.Поставленная цель достигаетсятем, что согласно способу количественного определения З-метокси-.-оксибензилиденгидразида изоникотиновой кислоты, последовательно обрабатывают анализируемую пробу диметилформамидом, нитратом цинка,гидроксидом аммония с последующимизмерением флюоресценции,полученногопри этом раствора,Отличительным признаком способаявляется последовательная обработкаанализируемой пробы диметилформамидом., нитратом цинка, гидроксидомаммония и последующее измерениефлюоресценции полученного при этомраствора.П р и м е р 1. Определение фтивазида в таблетках по 0,5 г.0,03-0,04 г (точная навеска) мелкоизмельченных таблеток переносятв мерную колбу на 100 мл, прибавляют70-80 мл диметилформамида и энергич-)но встряхивают 3-5 мин. Затем доливают диметилформамидом до метки(раствор А). 1 мл раствора А переносят в мерную колбу на 100 мл, доводят диметилформамидом до метки. К 9 мл данного раствора .прибавляют .1 мл 1"ного раствора нитрата цинка в диметилформамиде, одну каплю 3 н. раствора гидроксида аммония, перемешивают и флюориметрируют по отношению к стандартному раствору с содержанием 1, 2, 3 или .4 мкг/мл фтиваэида. Для чего к 9 мл стандартного раствора фтивазида в диметилформами де прибавляют 1 мл 1-ного раствора нитрата цинка, 1 каплю 3 н. раствора гидроксида аммония, перемешивают и флюориметрируют по отношению к исследуемым образцам.Результаты флюометрического определения фтивазида в таблетках по 0,5 г представлены в табл, 1. П р и м е р 2, Определение фти вазида в крови илифмоче.К 1 мл плазмы крови или мочи прибавляют 5 мл иэоамилового спирта, встряхивают в течение 5 мин, центрифугируют при 3000 об/мин 3 мин и органический слой сливают в выпарительную чашку. Экстрагирование повто ряют. Изоамиловый спирт выпаривают на водяной бане. К остатку добавляют 9 мл диметилформамида, 1 мл 1- ного раствора нитрата цинка в диме тилформамиде, 1 каплю концентрированного раствора гидроксида аммония, флюориметрируют против стандарта с содержанием 0,5, 1,0 или 4 мкг/мл фтивазида в диметилформамиде.65 Зависимость между интенсивностью флюоресценции и концентрацией фтивазида показана в табл. 2.)2 2,0 17 18 18 ,3 3,0 25 25 26 Чувствительность известного способа 1,3 мкг/мл, предлагаемого "0,01 мкг/ю. Спектр возбуждения флюоресценции полученного при этом раствора лежит в области 260-380 нм смаксимумом 328 нм, а спектр излучения флуоресценции - 360-560 нм смаксимумом 498 нм.Сопутствующие ингредиенты, находящиеся в таблетках, не мешают прямому определению фтивазида. Линейнаязависимость между интенсивностьюфйооресценции и концентрацией фтивазида лежит 0,01-4 мкг/мл (табл.2).В.биологических жидкостях (кровь,моча) 100 фтиваэида открывается с 0,1 мкг/мл.Использование предлагаемого изобретения позволяет без отделения от сопутствующих ингредиентов проводитьопределение фтивазида в лекарственаных препаратах, а также в биологических жидкостях, что выгодно отличает его от ранее известного Способ количественного определения 3-метокси-оксибензилиденгидразида изоникотиновой кислоты, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения чувствисельности к избирательности определения, анализируемую пробу последовательно обрабатывают диметилформамидом, нитратом цинка, гидрооксидом аммония с последующим измерением флюоресценции полу ченного при этом раствора.864074 Составитель Л.СоломенцеваТехред М, Голинка Корректор У.Пономаренко Редактор М,Келемеш Заказ 7763/61 Тираж 910 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, .4 Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Пособие по качественному анализу фармацевтических препаратов в двухкомпонентных лекарственных смесях. М., "Медицина", 1973, с, 172.2, Бруюко Л.И., Гриценко С.В. .,Руководство по количественному анализу лекарственных препаратов. М 1978, с. 113 прототип).