Способ определения предлейкозных и лейкозных состояний организма

Союз Советских Социалистических РеспубликОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВ ЕТЕЛЬСТВУ1746286(61) Дополнительное к авт. свид-ву(22) Заявлено 01.02.78 (21) 2580075/28-13 (51)М. Кл,6 01 И 33/36 с присоединением заявки Но -(23) Приоритет Государственный комитет СССР но делам изобретений и открытий(71) Заявитель Иркутский государственный медицинский институт(5 Ч) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРЕДЛЕЙКОЗНЫХ И ЛЕЙКОЗНЫХ СОСТОЯНИЙ ОРГАНИЗМА 2 1Изобретение относится к медицине, а именно гематологии,и может быть использовано для паталогоанатомической диагностики гемобластоэов.Известен способ определения пред лейкозных и лейкозных состояний организма путем анализа кровеносных сосудов и клеточного состава кроветворных органов )1 .Однако такой способ недостаточно 10 точен.Целью изобретения является повышение точности способа.Поставленная цель достигается тем, что путем постадийного выявления 15 предлейкозных и лейкозных состояний при исследовании кровеносных сосудов определяют их плотность, количество почек роста и терминальных капилляров и при доказателях плотности от 20 7,3 до 7,9 ед. почек роста и терминальных капилляров от 0,2 до 0,5 ед. определяют 1 стадию предлейкозного состояния, при показателях плотности от 14 до 18 ед. и почек роста 25 и терминальных капилляров от 1,0 до 1,5 ед. определяют ф стадию предлейкоэного состояния, а при показателях плотностй от 18 до 20 ед. ипочек роста и терминальных капилляров 30 от 1,6 до 5,0 ед. определяют Щ стадию предлейкозного состояния, а лейкоэное состояние определяют при показателях плотности кровеносных сосудов от 24 до 30 ед., и почек ростаи терминальных капилляров от 6 до,7 ед.Способ определения предлейкозныхи лейкозных состояний оргайиэма осуществляют следующим образом,ЭкспериМентальный лейкоэ у животных индуцируют подкожным введениемраствора индола или одномоментнойперевивкой вируса "Маэуренко",1,5 Ъ-ный раствор индола вводят подкожно по 0,2 мл 2 раза в неделю напротяжении 2,5 мес. (максимальнаясуммарная доза индола составляетбб мг).Воспроизведение вирусного лейкозаосуществляют с помощью однократногоподкожного введения безклеточнойФракции гемогената органов больныхлейкозом животных. Животных забиваютметодом дислокации шейного отделапозвоночника на 1, 2, 3, 4, б .деньи далее с интервалами в две недели отначала опыта. Максимальные сроки наблюдения составляют 13 мес. Инъекцию сосудистого русла производятна целой тушке через аорту 20-ным раствором туши на 2-ном растворе желатина.Гйстологические препараты готовят по общепринятым методикам. Для изучения интраорганного кровеносного сосудистого русла на замораживающем микротоме делают срезы лимфатических узлов толщиной 100 мкм, докрашивают гематоксилин-эозином, просветляют и заключают в канадский бальзам. 30 Для изучения волокнистогокаркасапроизводят импрегнацию срезов лимфатических узлов толщиной 4 мкм аэотнокислым серебром, Плотность сосудис - того русла определяют по количествусосудов, находящихся в поле "счетно-го квадрата" - условная единица пло Щади; по результатам подсчетов в7-ми участках лимфатического узла. 2 ОКоличество почек роста и терминальныхкапилляров также определяют путемих подсчета в поле "счетного квадрата" в 7-ми участках узла, Кроме того, учитывают выраженность перифолликулярных сосудистых сплетений, сепень Фрагментации сосудистого русла коркового вещества узла, а также учитывают наличие интрафолликулярных сосудистых сплетений.При изучении импрегнированных сре эов лимфатических узлов учитывают визуально степень импрегнации волокнистого каркаса норкового и мозгового веществ, характер рисуйка ретикуляр"ной сети (густая, мелкопетлистая, 35 крупнопетлистая), характер различияили сходства этих рисунков, наличие или отсутствие интрафолликулярных ;сплетений ретикулярных волокон, а также оценивают ретикулярные волокна 4 О(тонкие, толстые, огрубевшие, короткие, длинные).Таким образом, предложенный способ обеспечивает воэможность осуществлять более точный диапазон при патологоанатомических и экспериментальных исследованиях.Кроме того, предложенный способ позволяет только по анализу морфологических данных и по состоянию интраорванной кровеносной сосудистой сети лимфатических узлов (даже одного) предполагать качественные и количественные изменения в других кроветворных органах, так как между55 циФровыми параметрами содержание клеточных элементов в органах кроветворения существуют: прямые и обратные достоверные корреляцииП р и м е р. Мышь линии СС 61 В 4, що самка, возраст 9 мес., забита 9/Хг,Предварительно мыши б/Ч 1-76 г -вводят вирус "Маэуренко" (0,2 мл .подкожно бесклеточной Фракции гомогената).65Установлено следующ Паховые лимфатические эенка не пальпируются,Анализ крови.ЛейкоцитоэРетикулярныеклетки, %Миелоциты, ЪЮные, ВСегментоядерныенейтрофилы, ВЗозинофилы, ВЛимфоциты, ЪКостный мозг.Гемоцитобласты, ВРетикулярныеклетки, ЪПромиелоциты, %Миелоциты зозинофильные, ВМиелоциты нейтрофильные, 3Юные нейтрофилы, %Палочкоядерныенейтрофилы, %Сегментоядерныенейтрофилы, %Зозинофилы, ЪПроэритробласты, 3Нормобласты, %Плазматическиеклетки, ВВ таблице приведен тав пахоВых (ПЛУ), бр и параортальных (ПАЛУ узлов и селезенки,15100 22,0 4,0 1,0 40,0 11,0 3,0 2,0 19,0 1,0 2,0 1015,0 4,0 15,0 2,0 1,0 27 Клеточный ПЛУсостав, % 0,1,31,6 41,4 45,4 43,8 Малые лимфоциты 19,76 12,7 23,9 8,4 Средниелимфоциты 47,43 45,6 24,4 39,7 0,2 0,1О, 08 - О, 2 О, 22 МоноцитыЛаброциты Незрелыенейтрофилы 0,7 0,1. 1,8 4,5 Зрелыенейтрофилы 0,23 0,1 3,3 2,8 Неэрель 1 еэоэинофилы Зрелыеэоэинофилы 0,15 0,1 0,8 0,3 Гемоцитобласты Ретикулярныеклетки Плазматические клетки ее. Мышь вялан.узлы и селе 1,0клеточный сосыжеечных (БЛУ) ) лимфатических БЛУ ПАЛУ Селезенка5 746286 Формула изобретения Составитель В.ГоловинРедактор С.Тараненко Техред О. Андрейко Корректор С.Шекмар Заказ 4096/14 Тираж 1019 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП "Патент"., г.ужгород, ул.Проектная,4 В лимфатических узлах хорошо выражена интраорганная кровеносная сеть (ПЛУ,0 БЛУ 16,1, ПАЛУ,0 сосудов на условную единицу площади).Перифолликулярные сосудистые сплетения выражены. Уплотнение сосудистой сети хорошо выражено в мозговом веществе.Сеть ретикулярных волокон имеет обычный рисунок: тонкие ретикулярные волокна в мозговом веществе образуют густую мелкопетлистую сеть, а в корковом веществе - крупнопетлистую.В фолликулах ретикулярные волокна редки и сетей не образуют.Определенные морфологические характеристики у этой мыши укладываются в картину Л стадии (реактивной) развития экспериментального лейкоза.Предложенный способ позволяет получить более точную и достоверную информацию о патокинезе патологического процесса и его стадиях в связи с тем, что сосудистая интраорганная сеть, ретикулярная ткань и связанный с ней ретикулярный остов всегда реагируют позднее на изменения гемоноэза и эти структуры не обладают большой мобильностью. Способ определения предлейкозныхи лейкозных состояний организма путем микроскопического исследования кровеносных сосудов и клеточного состава кроветворных органов,о т л и ч а ю щ И й с я тем, что,с целью повышения точности способа,путем постадийного выявления предлейкоэных и лейкоэных состоянийпри исследовании кровеносных сосудовопределяют их плотность, количествопочек роста и терминальных капилляров и при показателях плотности от7,3 до 7,9 ед. почек роста и терминальных капилляров от 0,2 до 0,5 ед,определяют 7 стадию предлейкозиогосостояния, при показателях плотностиот 16 до 18 ед. и почек роста и терминальных капилляров от 1,0 до1,5 ед, определяют 5 стадию предлейкозного состояния, а при показателяхплотности от 18 до 20 ед. и почекроста и терминальных капилляров от20 1,6 до 5,0 ед. определяют Щ стадиюпредлейкоэного состояния, а лейкозноесостояние определяют при показателяхплотности кровеносных сосудов от 24до 30 ед, и почек роста и терми 25 нальных капилляров от 6 до 7 ед.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1, Чакветадэе Л.В. Предлейкоэныеизменения в системе кроветворения в30 процессе развития спонтанного лейкоза у мышей. - "Современные пробле"мы лейкозоологии и трансфуэии". Тбилиси, 1971 с.303-305.