“способ получения антибиотика антимоэбина

фцЕ 0 ЮЗН,в,ву Е 1 П 1;0ЮЙ ОПИСИЗОБРЕТЕН ИЯ 1 п 457228 Союз Советских Социалистических Республик(22) Заявлено 12,06.67 (21) 116347831-16 124 9/04 07 д 11/О 32) Приоритет -публиковано 15,01 осударственный комитет истров СССРизобретенийрытнй вета(53) 5,779.932088,8) юллетень Ме по делам а опубликования описания 13.03.75 2) Автор изобретения Иностранец ндаджам Джеерсаннидхи Тирумалаха1) Заявитель Иностранная фирмаХиндустан Антибиотикс Л(Индия) 54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИБИОТИКА АНТИМОЭБИНА Раствооле, изной кисетоне,такжеамиде,, бензииловомристомм углер римый в метаноле, опропаноле, пиридилоте, диметилформвлажном метиловов метиловом и этинерастворим в воде, не, уксусноэтиловом эфире, ацетоне, тоуглероде, диоксане, оде, хлорметане и я. От 21ость. 9 до 220 С., р - +10а в =+10е).ИК-спектра50 - 15,30 СОм - . 30 Температура плавлени Оптическая активн (С = 1,02% в метан (С = 1,03% в диметилфМаксимальная абс 33,20 - 31,90 (связанный и МН - деформация; 1 О,ле);рмамид орбция ХН); 1 78 695 Изобретение относится к производству антибиотиков.Предложен способ получения антибиотикаантимоэбина, ранее в патентной литературе неописанный, который заключается в том, что 5культуру Егпегсе 11 орз 1 з зуппегпа 11 со 1 а АТСС16540 или Серйа 1 озрог 1 цтп рппрппа АТСС16541 выращивают в аэробных условиях насреде, содержащей источники углерода, азотаи минеральные соли в течение 48 - 192 ч при 1020 - 37 С и начальном рН среды 4,0 - 75, затем мицелий и фильтрат культуральной жидкости экстрагируют органическим растворителем, выделяют целевой продукт из экстрактаи очищают известными способами. 15Антимоэбин является антипротозольным, антигельминтным антибиотиком. Антибиотикимеет очень низкую токсичность. Антибиотикантимоэбин имеет следующие свойства,Род. Нейтральный полипептид. 2Вид и цвет. Белый, кустообразные иголки,легкий, горький, без запаха,Растворимость. бутаноле, и-пропан не, ледяной уксус амиде, водяном ац этиловом кетоне, а ловом диэтилформ хлороформе, эфире эфире, уксуснобут луоле, четыреххло бензоле, сернисто этиленгликоле,Дальнеишие реакции. Отрицательные: раствор железа и хлора, проба Бенедикта, Ноли. ша, Сокогуши, а также реакции с нингидрином, биурет и антрон; положительные ксантопротеиновые реакции, после 1-часового щелочного гидр олиза, положительные биуретовые реакции, гидролиз с 6 п-соляной кислотой в закрытой трубе в течение 16 ч дает 11 положительных нингидриновых проб при двуразмерной фотографии хроматической бумаги. Путем применения одно- и двуразмерных фотографий хроматической бумаги определяются с помощью стандартных аминокислот следующие аминокислоты: пролин а-аминоизомасляную кислоту, фенилаланин, валин, лейцин, гидроксамовый пролин, лизин и глутаминовую кис лоту.Анализ, %: С 56,11; Н 7,56; К 13,56,Галогенные и серные реакции являются отрицательными.На фиг. 1 показан ИФ спектр антимоэбина в пц 1 о 1; на фиг. 2 - ИК спектр для двух различных пределов.П р и м ер 1. Изготовление антимоэбина.Вначале готовят среду, состоящую из, %:Соя 20 Глюкоза 2,0 Сернокислый аммоний 0,3 Хлористый натрий 0,25 Углекислый кальций 0,6,Все компоненты имеют рН 6,5 до 7. Затем стерилизуют раствор в количестве 50 л в течение 15 - 30 мин, после чего среду засевают культурой Егпег 1 се 11 оряз зуппегпа 11 со 1 а либо Е. роопепяяВыращивание ведут при перемешивании и аэрации при 28 С, наблюдая период сильной вегетации с помощью микроскопа. После 58 ч вегетации содержимое переносят в ферментатор на 100 л, содержащий среду следующего состава, /о,Соя 2,5Глюкоза 3,0Сернокислый аммоний 0,5 Хлористый натрий 0,25 Углекислый кальций 0,5 Вода Остальное.Все компоненты имеют рН от 6,5 до 6,8. Выращивание ведут при перемешивании и аэрации, Рост мицелия и образование антибиотика время от времени определяют гравиметрическим способом. После 96 - 120 ч рН основания доводят до 5 и производят фильтрацию, а затем собирают фильтрат и экстрагируют его с 1/3 объема н-бутанола, причем для перемешивания антибиотика и для переведения его из основания в растворитель применяют экстрактор. Подобным способом экстрагируют мицелий с 1,5 объемом бутанола на 1 кг мицелия, затем экстракцию повторяют, Во время второй экстракции применяют на 1 кг мицелия 1 л бутанола. После экстракции и перемешивания бутанол отфильтровывают и отделяют,а затем экстракт бутанола перемешивают сфильтратом основания.Экстракт бутанола применяют для удалениясолей и для их концентрации в вакууме около5 30 л. Раствор бутанола имеет вначале объемоколо 600 л.Большое количество осадка, состоящего изпервичного антибиотика отфильтровывают, азатем промывают с помощью ацетона и сушат.10 После этого к раствору бутанола прибавляют тройное количество ацетона и сохраняютэтот раствор при 10 С в течение 24 ч, а затемотфильтровывают светло-желтый осадок, промывают его ацетоном и сушат,15 Полученный описываемым способом антимоэбин промывают многократно водой вплотьдо,выделения желтоокрашенного вещества, азатем растворяют его в 45%-ном метаноле иподвергают мойке водой при 50 С. В резуль 20 тате этого получают значительное количествоантимоэбина. Затем добавляют активныйуголь и подвергают этот раствор фильтрованию в нагретом состоянии, выдерживают егов течение 3 - 4 ч при комнатной температуре25 и переносят в холодное помещение, в которомвыдерживают его в течение ночи при 5 С. Получают большое количество игольчатых кристаллов в пучках, которые отфильтровывают,моют дистиллированной водой и сушат. Ана 30 логично проводят вторую кристаллизацию. Предмет изобретения1, Способ получения антибиотика антимоЗ 5 эбина, отличающийся тем, что культуруЕтег 1 се 11 оряз зуппета 11 со 1 а АТСС 16540 или Серйо 1 озрог 1 цт р 1 трг 1 па АТСС 16541 выращивают в аэробных условиях на среде, содержащей источники углерода, азота и минераль ные соли, экстрагируют мицелий и фильтраткультуральной жидкости органическим растворителем, выделяют целевой продукт из экстракта и очищают известными способами.2. Способ по и. 1, отличающийся тем, 45 что выращивание осуществляют в течение48 - 192 ч при 20 - 37 С и начальном рН среды 4,0 - 7,5.457228 10 га Зо цо 70 юа юа 210 З 00 ЦЮО Цоо Фиг. 1 00 Юо, 80афъ 60ИД цо во го цооо ыоо жс г,500 гооо ию 50 1 юао цп го г 000 юо боо цоо п.оо ооо воо фиг. го Щ 3 цого 30 У 5 ЦО 50 бО ВОикм ЮП И В 0 Ьа И тОикм