Способ получения n-вос-аминокислот

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ 332077 Союз Соеетсиих Социалистических РеспублииЗависимое от авт. свидетельстваКл141961623-4) с 101,02 явлено 02.У,197 рисоединением заявкиПриоритет Комитет по деламобретений и открытийри Совете МинистровСССР Опубликовано 14.111.1972. Бюллетень1 Дата опубликования описания 18.111.1972 ДК 547,466.07 (088.8) Авторыизобретения ева, С. К. Гирин, В, С. Гроселов, Н. А. Брусетщов и иментальной зндокринологкадемии медицинских наук здев, М, Н. РяЮ. П. Швачкин и и химии гормСССРЗаявптел 1 нов СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ Х" -ВОС-АМИНОКИСЛО у выделения дных Х -за- циклогсксилинтеза инсуособенности х посител 51 х. Изобретение отно ром атографически щищенных аминокиммониевых солей ина и других по ри получении их сптся к спосо чистых своб слот из их (ЦГА) для липептпдов, а полимерн является у выхода целе ощениео про прерывного получения нх циклогекснламмоИзвестен способ выделения свободных Х"- защищенных аминокислот из их солей путем взаимодействия дициклогексиламмонпевых солей Х"-Вос-аминокислот с разбавленной серной кислотой и последующей экстракции аминокислот органическими растворителями, Однако полного выделения Х -Вос-аминокислот при этом не происходит; получаемые Х производные часто содержат продукты разложения (например, в случае Х -Вос-производных частично разлагаются кислотолабильные третбутилоксикарбонильные группы, что загрязняет препарат аминокислотами с незащищенными аминогруппами). Перекристаллизации иногда снижают выходы целевых продуктов до 50% и часто не позволяют получить хроматографически чистый препарат, Для устранения перечисленных недостатков следует не допускать превращения аминокислот в их дициклогексиламмониевые (ДЦГА) соли в процессе синтеза. Однако эффективная очистка и получение кристаллических препаратов, в виде которых вещества хорошо сохраняются, приводят к необходимости превращать нскоторыс Х.защпщенныс аминокислоты в пх ДЦГА-соли.5 Целью изобретения прпроцесса и повышение вог ду кта.Предлагаемый способ получения Х" -Восаминокислот заключается в том, что растворы цпклогекснламмонневых и дицнклогексиламмониевых солей Х -Вос-амннокислот (Х Вос.-ТЬг, Х"-Вос-Х -Тоз.-Агу, Х Вос.- Ст 1 и, Х" -Вос.-РЫ, Х -Вос.-Ъа 1, Х" -Вос-у- О-Вк 1-1.-Ыц, Х" -Вос-О-Вк 1-1.-5 ег, Х"-Вос-Х Вос.-гауз, Х" -Вос-О-Вг 1-1.-Туг, Х-Вос.-Стц, Х" -Вос-Х" -ХО-.-Агд, Х" -Вос-Я-Вг 1-1.-Суз, Х -Вос.-Н 1 з, Х"-Вос-Х" -Рпр.-НЬ, Х".Вос.-Азп, Х" -Вос-реп, Х"-Вос.-А 1 а) в метиловом или этиловом спирте подвергают взаимодействию с сульфированнымп сополимерами полистирола с дивинилбензолом (КУ, Дауэкс, амберлит И) в Н+-форме, взятыми в 1,1 - 30-кратном избытке, предпочтительнее 2 - 3, и процесс проводят прп 1 - 40 С, лучше 20 - 25 С и рН среды 2 - 5, предпочтительнее 2,5 - 3.При необходимости неХ -Вос-аминокислот изниевых и дициклогексиламмониевых солей процесс целесообразнее проводить на сорбционных колонках с прямотоком взаимодействующих фаз и рециркуляцией катионита в каждой колонке либо в одной многосекционной колонне с псевдоожижепным слоем катионита при противотоке взаимодействующих фаз.Предложенный способ проще известных, так как при его применении экстракция и перекристаллизация не требуются. По предлагаемому способу получают хроматографически чистые продукты. Выходы 98 - 100%. К"-Вос-аминокислоты, получаемые при этом в виде сиропа, могут быть успешно использованы в синтезе фрагментов инсулина.П р и м е р 1. Выделение свободного М" -Вос.-ТЬг из дициклогексиламмониевой соли И"- Х -Вос-.-ТЬг.5,0 г дициклогексиламмониевой соли ИВос-.-ТЬг растворяют в 250 мл метилового спирта и прибавляют 10,0 г ионообменной смолы КУ(Н+-форма, сшивка 8 - 10%, обменная емкость 4,9 - 5,1 мг экв/г) или 10,0 г Дауэкс(Н+-форма, сшивка 4/О, 100 - 200 меш). Затем суспензию перемешивают 2 час при 20 - 25 С; в конце процесса рН 2,5 - 3. Далее смесь фильтруют, смолу промывают на фильтре (ЗК 10 мл) метиловым спиртом. Объединенные фильтраты упарпвают при 40 С в вакууме и высушивают в вакуум-эксикаторе над хлористым кальцием до постоянного веса. Выход 2,74 г (100%). Масло закристаллизовывается при хранении, т. пл.77 - 80 С, ап - 25 (с=0,98/о, метиловый спирт). Хроматография в тонком слое силикагеля в системе хлороформ: метиловый спирт: уксусная кислота (85; 10: 5) К 0,4. По литературным данным т. пл, 76 - 80 С, ап 6 - 2,52 (с=0,98, метиловый спирт).П р и м е р 2. Выделение свободного М"-Вос-Тоз-;Агд из циклогексиламмониевой солиа оИ -Вос-М -Тоз-.-Агд.30,0 г циклогексиламмониевой соли К -ВоссИ -Тоз-.-Агд растворяют в 150 мл метилового спирта и прибавляют 45,0 г ионообменной смолы амберлит 1 К(Н+-форма, сшивка 8%, обменная емкость 4,0 мг экв/г). Затем суспензию перемешивают 40 мин при 20 - 25 С; в конце процесса рН 3 - 4. Далее суспензию фильтруют и смолу промывают (ЗХЗО мл) метиловым спиртом. Объединенные фильтраты упаривают при 40 С в вакууме и высушивают в вакуум-эксикаторе над пяти- окисью фосфора в присутствии парафина до постоянного веса. Выход 23,8 г (98,3%), т. пл.63 С, ап - 2,5 (с, ДМФА). Хроматография в тонком слое силикагеля в системе бутиловый спирт: уксусная кислота: вода (4: 1: 1) К 1 0,87; в метиловом спирте К 1 0,76. По литературным данным т. пл. 99 - 100 С, адР - 3,3 (с, ДМФА), 60 65 Вос-.-Ъа 1 растворяют в 50 мл метилового спирта, прибавляют 2,0 г ионообменной смо. лы КУ(Н+-форма, сшивка 8 - 10%, обменная емкость 4,9 - 5,1 мг экв/г) или 2,0 г Дауэкс(Н+-форма, сшивка 4%, 100 - 200 меш). Суспензию промывают 2 час при П р и м е р 3. Выделение свободного М Вос.-610 из дициклогексиламмониевой соли МВ о с-.-61 п.А. 30,0 г дициклогексиламмонисвой соли5 яИ -Вос-.-Ыц растворяют в 300 мл метиловогоспирта и прибавляют 28,0 г ионообменнойсмолы Дауэкс"ьг (Н+-форма, сшивка 4/о,100 - 200 меш). Затем суспензию перемешивают 1 час при 20 - 25 С; в конце процесса" рНЗ.Далее смесь фильтруют и смолу промываютна фильтре (Зр,30 мл) метиловым спиртом.Объединенные фильтраты упаривают при40 С в вакууме и высушивают в вакуум-эксикаторе над пятиокисью фосфора до постоянного веса. Выход 17,0 г (980/о),Б. 1,89 г дициклогексиламмониевой солиЬГ-Вос-.-61 ц растворяют в 20 мл метилового20 спирта и прибавляют 3,8 г ионообменной смолы КУ(Н+-форма, сшивка 8 - 10%, обменная емкость 4,9 - 5,1 мг экв/г). Суспензиюперемешивают 2,5 час при 20 - 25 С; в концепроцесса рН 3. Смесь фильтруют, смолу про 25 мывают на фильтре (ЗХ 10 мл) метиловымспиртом. Объединенные фильтраты упаривают при 40 С в вакууме и гысушпвают в вакуум-эксикаторе над пятиокисью фосфора допостоянного веса. Выход 1,09 г (100%), Хро 30 матография в тонком слое силикагеля в системе метиловый спирт: бензол (1: 4) К 0,45;в мстиловом спирте К 1 0,8, По литературнымданным т. пл. 114 - 118 С, апР - 3 (с==1,93, этиловый спирт),З 5 П р имер 4. Выделение свободного М -Вос.-Р 1 те из дициклогексиламмопиевой соли КВос-.-Р 11 е,2,0 г дициклогексиламмониевой соли М"- Вос-.-Рйе растворяют в 150 мл метиловогоспирта и прибавляют 3,0 г ионообменной смолы КУ(Н+-форма, сшивка 8 - 10/ обменная емкость 4,9 - 5,1 мг экв/г) или 3,0 гДауэкс(Н+-форма, сшивка 4 О/о, 100 -45 200 меш). Суспензию перемешивают 2 час при20 - 25 С; в конце процесса рН 2,5 - 3. Смесьфильтруют и смолу промывают (ЗК 10 мл)метиловым спиртом. Объединенные фильтратыупаривают при 40 С в вакууме и высушиваютв вакуум-эксикаторе над хлористым кальциемдо постоянного веса, Выход 1,18 г (100%).Хроматография в тонком слое силикагеля всистеме хлороформ: метиловый спирт: уксусная кислота (85: 10: 5) К 0,71. По литератур 55ным данным т, пл. 79 - 80 С.П р и м е р 5. Выделение свободного Х"- Вос-.-Ъа 1 из дициклогексиламмониевой солиК -Вос-.-Ча 1.1,0 г дициклогексиламмониевой соли К332077 Предмет изобретения Составитель Л. Иоффе Тскред 3. Тараненко Редактор 3. Горбунова Коррсктор Л. Царькова Заказ 932/16 Изд.402 Тираж 448 Подписное ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Типография, пр, Сапунова, 2 520 - 25 С; в конце процесса рН 2,5 - 3. Смесь фильтруют, смолу промывают (Зк,10 мл) метиловым спиртом. Объединенные фильтраты упаривают при 40 С в вакууме и высушиваюг в вакуум-эксикаторе над хлористым кальцием до постоянного веса. Выход 0,54 г (99). Хроматография в тонком слое силикагеля в системе хлороформ: метиловый спирт: уксусная кислота (85: 10: 5) К 0,74, По литературным данным т, пл. 77 - 79 С.П р и м е р 6. Выделение свободного Х"-Вос.-О-Вг 1-1.-61 ц из дициклогексиламмониевой соли И" -Вос-О-Вг 1-1.-61 ц.2,0 г дициклогексиламмониевой соли К"- Вос-у-О-Вг.-61 и растворяют в 30 мл метилового спирта, прибавляют 4,0 г ионообменной смолы КУ(Н+-форма, сшивка 8 - 10/о, обменная емкость 4,9 - 5,1 мг экв/г) или 4,0 г Дауэксю (Н+-форма, сшивка 4, 100 - 200 меш). Суспензию перемешивают 1,5 час при 20 - 25 С; в конце процесса рН 3 - 4. Смесь фильтруют, смолу промывают на фильтре (ЗК 10 мл) метиловым спиртом, Объединенные фильтраты упаривают при 40 С в вакууме и высушивают в вакуум-эксикаторе над хлористым кальцием до постоянного веса. Выход 1,3 г (100 оо). Хроматография в топком слое силикагеля в системе хлороформ: метиловый спирт: бепзол (2: 1: 1) й 1 0,88,П р и м е р 7, Выделение свободного 11"-ВосО-Вг 1-1.-Бег из дициклогексиламмониевой соли И" -Вос-О-В г 1-1.-Бег.1,0 г дициклогексиламмониевой соли И"- Вос-О-Вг 1-1.-Бег растворяют в 25 ил мстплового спирта и прибавляют 2,0 г ионообменнон смолы КУ(Н+-форма, сшивка 8 - 10, объемная емкость 4,9 - 5,1 мг экв/г) или 2,0 г Дауэксж (Н+-форма, сшивка 4, 100 - 5 200 меира). Суспензию перемешивают 2 часпрп 20 - 25 С; в конце процесса рН 2,5 - 3, Смесь фильтруют, смолу промывают на фильтре (ЗХ 10 лсл) метиловым спиртом. Объединеные фильтраты упаривают при 40 С в ва вакууме и высушивают в вакуум-эксикаторенад хлористым кальцием до постоянного веса.Выход 0,62 г (1007 о). Хроматография в тонком слое силикагеля в системе н-бутиловый спирт: уксусная кислота: вода (20: 10: 10) 15 К 1 0,78. 20 1. Способ получения М -Вос-аминокислотиз их циклогексиламмоциевых плп дицпклогексиламмонпевых солей, отличающийся тем, что, с целью упрощения процесса и повышения выхода целевого продукта, спиртовой 25 раствор циклогексиламмониевых или дпциклогекспламмопиевых солей соответствующих производных аминокислот подвергают взаимодействию с сульфированными сополимерамп полистирола с дивинплбензолом в Н+-фор ме, взятыми в 1,1 - 30-кратном избытке, ипроцесс проводят при температуре 1 - 40 С и рН среды 2 - 5.2. Способ по п, 1, отличаюирйся тем, чтопроцесс проводят в присутствии дву-, трех кратного избытка попообмепной смолы прптемпературе 20 - 25 С, рН 2 - 3.