Способ дифференциации пневмококка от зеленящего стрептококка

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛ ИСТИЧ ЕС КИРЕСПУБЛИК9) 1778 А ГОСУДАРСТВЕННО ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР АТЕ НТН ЕТЕН ИСАНИЕ И льзуетсяда для,ующего сосгидролизатпарат ЭКД ат гигиен люкоза ме"натрия0,75, агарй углекис 3,ВИОКОКя коим викает окки ди я микренциа"емоликков.ве средля них оптичес в толще медицинс о к спококков от еленящих) оссцз Н А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ПНКА ОТ ЗЕЛЕНЯЦ)ЕГО СТРЕПТОКОККА(57) Использование: медицинскробиология, диагностика, диффция пневмококков от других тических (зеленящих) стрептокСущность изобретения; в качес Изобретение относится кШ кой микробиологии, а именнсобу дифференциации пневмодругих М-гемолитических (зстрептококков.Известен способ дифференциации пневмококков от других зеленящих; стрептококков, при котором исследуемые штаммы засеваются на агар с 5 крови барана с одновременным подсевом стафилококка, образующего непол" ный гемолиз бараньих эритроцитов. После 20-24 часов инкубации при 37 С учитывается характер гемолиза вокруг стафилококка, в секторе роста пневмококка происходит усиление гемоли" за, в отличие от других с 6-гемолити,- ческих стрептококков, не изменяющих характер гемолиза.Однако, предложенный способ имеет ряд существенных недостатков: 5 С 12 1 1/00, С 12 Я 1/00 ды для дифференциации исп полужидкая питательная ср контроля стерильности сле тава, г/л: ферментативный казеина 15; витаминный пр 5; натрий хлористый 6,4 ф дицинская 5,0; тиогликоля 0,5; цистеин дигидрохлори порошкообразный 0,6, натр лый 0,5-0,95, Среда являе ческим препаратом и выпус де сухого порошка, Пневмо ференцируют по особенному стреловидному, однородной плотности характеру роста данной среды,- около 103 штаммов Бсгерос : рпецщопве не дают зоны усиления гемолиза в первые 24 часа;- необходииа свежая баранья кровь, что представляет определенные трудности для большинства практических лабораторий. Применение эритроцитов0 человека снижает эффективность ро 5-103;ф-, требует постоянного поддержания музейных штаммов гемолитического ста-филококка, на что дополнительно расходуются питательные среды, в том числе и дефицитная кровь. дЦель изобретения - упрощение и ускорение дифференциации пневмококков от других зеленящих стрептококков.ЭТо достигается тем, что посев исследуемых колоний производят на полужидкую питательную среду для контро.ля стерильности следующего соста,ва, г/л;Оерментативный гидролизат казеина 15Витаминный препаратЭКЛ 5Натрий хлористый б,4Глюкоза медицинская 5,0Тиогликолят натрия 0,5Цистеин дигидрохлорид 0,75Агар порошкообразный 0,6Натрий углекислый 0,5-0,95Данная среда является коммерческимпрепаратом и выпускается в виде сухого порошка Предприятием ЦентральногоНИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова под названием: "Среда питательная, для контроля стерильности, сухая",церез 18-24 ч посевы просматривают. Из всех видов зеленящих стрептококков только для БСг. рпеивопаехарактерны следующие особенности,"рост наблюдается в виде локального,гомогенного слабого помутнения среды,Форма которого напоминает стрелу, 25расположенную острием вверх, толщиной до 2 мм и длиной от 4 мм и более.Зона роста четко ограничена, равномерной оптической плотности. Несколько таких "стрел" могут соединяться уоснования в нижней части пробирки,образуя сплошную зону помутнения среды в виде облака, с четкой локализацией, такой же консистенции, как и у"стрел" и также без каких-либо Флуктуаций оптической плотности, Ростдругих видов Ы-гемолитических стрептококков в данной среде отличаетсялибо за счет роста в виде облака приотсутствии стреловидного роста, либоза счет наличия в зоне роста оптичес 40ки плотных включений (размерами отмельчайших, на грани видимости, докрупных - диаметром до 2-3 мм и бо- .лее).П р и м е р. Приготовленную согласно инструкции завода-изготовителякоммерческую среду разливают по про-биркам по 5-7 мл. Отобранные колонии,подозрительные на пневмококк, засевают петлей в толщу среды на глубину3/4 заполненного объема от верхнегокрая среды. После 18-24 часов инкуба"ции при 37 С посевы просматривают.оРост культуры в виде характерногостреловидного. помутнения среды однородной оптической плотности свидетельствует о росте пневмококка. Такиекультуры микроскопируют, испытывают на чувствительность к желчи и в реакции аглютинации со специФической сывороткой, Итаммы, способные образовывать в зоне роста различного диаметраоптически плотные структуры, а такжете, рост которых в данной среде проходит в виде облаковидного помутнениябез наличия стреловидных выростов исключают из дальнейших анализов.Автором было испытано 134 эталонных и свежевыделенных штаммов пневмококка, а также эталонных и свежевыделенных штаммов микроорганизмов следуюцих видов: Бгг.аг.хя, Бсг.яаппидя,Бг.ицгапя, Бг.апд 1 пояия в общем количестве 347 экземпляров. Посев про-,изводился параллельно на две пробирки. Ни в одном случае характер ростамикроорганизмов, не принадлежащих квиду Бг.рпеигюп 1 ае не соответствовалвышеописанному. В то же время из 134штаммов пневмококка лишь у семи (5"ь)рост в одной из двух пробирок не былхарактерен для данного вида, чтопроявилось отсутствием стреловидногороста,Таким образом, предлагаемый способдиФФеренциации пневмококка от золотистого стрептококка путем пересеваподозрительных колоний на среду дляконтроля стерильности существенно суживает поиск пневмококковых культур,обладает высокой чувствительностью,достаточно экономичен, не требуетдополнительных средств приборов иреактивов. В частности, по сравнениюс прототипом, данный способ более,чувствителен, исключает необходимостьподдержания музейных культургемолитического стаФилококка и наличие свежей бараньей крови. Приготовление питательной среды на основе комерческого препарата не требует больших затрат времени, а готовая и разлитая попробиркам среда способна длительноевремя (до двух месяцев) сохранятьсяв холодильнике при 4 С, Способ можетшироко использоваться в практическихлабораториях при этиологической расшиФровке заболеваний, обусловленныхпневмококками Ф о р и у л а изобретенияСпособ диФФеренциации пневмококка от зеленящего стрептококка путем посева исследуемого материала на элективную среду, инкубирования с последующей идентиФикацией культур по хаСоставительРедактор Л.Павлова ТехредЛ.КолотиловаКорректор Т;Палийи и е в и ее виет ватаев ивеаа тии тает еа ве вает евевеаа в и Заказ й 165 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 1130 Э 5, Иосква, Ж, Раушская наб., д. 4/5Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101 5 1778179 6Рактеру роста, о т л и ч а ю щ и й - посев осуществляют в толщу среды и с я тем, что, с целью упрощения и. при стреловидном оптически однородном ускорения способа, в качестве элек- помутнении среды культуру идентиицитивной среды используют среду пита- руют как пневмококк а при отсутствии5тельную для контроля стерильности, такого как эеленящии стрептококк.