Питательная среда для дифференциации энтеробактерий

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК а) 1 2982 114.С 1 ТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ ГОС ГО ЕСОВЗНФЯ(21) 3934968/28-14 (22) 12.07.85 (46) 23,03.87.Бюл. У 11 (71) Научно-исследовательскитут по производству питатель (72) В.С.Балаклеец, П.Ш.ГашиМ.М.Меджидов, Х,М.Алиева, Э.рова и Л,Г,Перепелица (53) 5768.0931 (088.8)(56) Прямухина Н,С Гивенти др. Использование элетивноренциальеой среды ВШС в диагдизентерии и других острыхинфекций. - ЖМЭИ, У 6, 1976, (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ЦИАЦИИ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ(57) Изобретение относится кцинской микробиологии и можеприменено при бактериологиче агностике дисбактериоза. Цел инстиных сремова,.Ома аль Н.И, -диффеностике кишечныхс.66-70 ДИФФЕРЕНмеди ыть ко ОПИСАНИН АВТОРСНОМ ретения - усиление дифференцирующихсвойств среды, Для этого питательнаясреда для дифференциации энтеробактерий содержит, г/л: в качестве питательной основы сухой триптичес.ийгидролизат белкоэнна 6,0-9,0, сухойэкстракт кормовых дрожжей 04-0,6,агар 15,6-23,4, в качестве поверхностно-активного вещества - алкилбензолсульфонат натрия 0,6-0,75, вкачестве индикатора - нейтральныйкрасный,0,025-0,036, натрий виннокислый кислый 0,9-1,1, лактозу10,0 - 12,0, натрий углекислый 0,5 -1,0, воду дистиллированную - остальное, Среду кипятят 2-3.мин, фильтруют, разливают в стерильные чашки Пет.ри, Затем чашки со средой подсушивают в термостате. Среда готова для ис.пользования, 1 табл.12982Изобретение относится к медицинс-.кой микробиологии н может быть использовано при бактериологическойдиагностике дисбактериоза.Цель изобретения - усиление ди 4 тференцирующих свойств среды,П р и и е р 1. 9 г сухого триптического гидролиэата белкозина, 0,6 гсухого экстракта кормовых дрожжей,0,75 г влкилбенэолсульфонат натрия,0,036 г нейтрапьного красного,23,4 г агар-вгара, 1,1 г натрия винно-кислого кислого и 2,0 г лактозырастворяют в 1 л дистиллированной воды в колбе. Добавлением 1,0 натрияуглекислого устанавливают рН 7,5 ф 0,1.Среду кипятят 2-3 мин, Фильтруюти разливают по 25 ил в стерильныечащки Петри и оставляют нв столе длязастывания среды при закрытых крышках. Затем чашки со средой и крышкираздельно подсушивают в термостатедо высыхания конденсациоиной влагинв крышках чашек, после чего последние закрывают крышками и дреда готова для использования. Цвет готовойсреды бледно-розовый,П р и м е р 2, Готовят среду всоответствии с примером 1, но в 1 лдистиллированной воды вносят 7,5 гсухого триптнческого гидролизвтабелкозина, 0,5 г сухого экстрактакормовых дрожжей, 0,65 г алкилбензолсульфоната натрия, 0,03 г нейтрального красного, 19,5 г агар-агара, 1,Ь г 35натрия винно-кислого кислого, 11,0 глвктозы и 0,8 г натрия углекислого. 45 гго. Смесь перемешивают в течение45 мин,Навеску вещества 40 г (она содержит оптимальное количество указанныхингредиентов) вносят в 1000 мл воды,кипятят 2-3 мин, Фильтруют, разливают по 25 мл в чашки Петри,Аналогично получают препараты ссодержанием минимальных и максимальных концентраций ингредиентов. Приэтом навеска составляет 3,4 и 4,8 гсоответственно на 1 л среды,Среду используют следующим образом.П р и м е р 5. Для приготовлениямикробных взвесей суточные культуры тест-штаммов выращенные на скоЭошенном питательном агаре при 37 С,смывают 0,97-ным изотоническим раствором хлористого натрия, доводятвзвеси до 10 ед. по оптическомустандарту мутности что соответству 9ет 10 микробных клеток в 1 мл,Затем серийными десятикратныьщразведениями доводят до содержанияО тыс. (1 О ), 1 тыс. (1 О ) и (1 О ),100 микробных клеток в 1 мл взвеси,Готовят также смесь культур путемосмешивания лактозоотрицательныхштаммов (шигелл, сальмонелл, протея)с лактоэоположйтельной кишечной палочкой из разведения 10 в соотношении 1:1, что соответствует 5 тыс,микробных клеток каждой культуры в1 мл.-а -7Иэ разведений 10 и 10 квлдойвзвеси монокультур, за исключениемстафилококка, который высевается иэразведения 10 (100 мпн. микробныхклеток в 1 мп), и смеси культур высевают по 0,1 мл на чашки с предпагаемой и известными средами,Средами сравнения служат; средаВШС и среда Левина.Учет результатов проводят черезо18-20 ч инкубации посевов при 37 С.Чувствительность, стабильностьисходных биологических свойств,и скорость роста испытуемых тест-штаммовна опытной и известных средах одного порядка: отмечается рост .тестштаммов (Б. Е 1 ехпегд У 8516, Б.воппе Б-форма, Б. Йуэепй. 1, Б.йур 1 и. Н 901 Е.со 11 3912/41) при посеве10 микробных клеток (10 ).Дифференцирующие свойства; припосеве смеси культур на опытной среде отмечается четкая дифференциация П р и м е р 3, Готовят среду аналогично примеру 1, но в 1 л дистилли- щрованной воды вносят .6,0 г сухоготриптического гидролизата белкоэина,0,4 г сухого экстракта кормовых дрожжей, 0,6 г алкилбенэолсульфоната натрия, 0,025 г нейгрального красного, 4515,6 г агар-агара, 0,9 г натрия винно-кислого кислого, 10 г лактоэы и0,5 г натрия углекислого,П р и м е р 4. Среду можно готовить в сухом виде,В шаровую мельницу емкостью в 1 кгзагружают 75 г сухого триптическогогидролиэата белкозина, 5 г сухогоэкстракта кормовых дрожжей, 6,5 г алкилбенэолсульфоната натрия, 0,3 гнейтрального красного, 195 г агарагара, 10 г натрия винно-кислого,1 О г лактоэы, 3 г натрия углекисло,5 Диффереициациотсутствует14 2 Х 5 142 ЭО реда Пе Составитель Г,СмирновТехред А.Кравчук Корректор И.Эрдейи Редакт Рогулич аказ 86 00 Подписноевенного комитета СССРетений и открытийЖ, Раушская наб., д,4/5 ТиражНИИПИ Госудапо делам из13035, Москв Производственно-пол ое предприятие, г од, ул.Проект патогенных энтеро бактерий (сальмонелл, шигелл), не ферментирующих лактозу бесцветных колоний от кишечнойпалочки, ферментирующей лактозу и окрашенных в малиновый цвет.Диффузного окрашивания среды, втом числе и в Месте скопления колоний кишечной папочки, не отмечается,что является положительным признаком качества среды, обеспечивающимвыделение и дальнейшее изучение культур,На среде сравнения ВШС отмечается диффузное пожелтение среды, на фоне которого патогенные микроорганизмы отличаются от непатогенных лишьпо степени прозрачности и диаметруколоний, но не по основному признаку, заложенному в среду - по окраске колоний, что значительно затрудняет выделение искомой культуры,Показатель ингибиции, определяе"мый при посеве стафилококка (10 млнмикробных клеток) и вульгарного протея (1000 микробных клеток) на опытной среде и среде ВШС, равнсрначен:на обеих средах стафилококк не растет и протей не роится,На.среде Левина, взятой в качестве контроля, отмечается сливной ростстафилококка и феномен роения протея,Результаты апробации дифференциально-диагностической среды (нейтральрот лактозный агар, 1,23 сериисредние данные) на 11 этапе (приисследовании испражнений) приведеныв табпице,Формула изобретения Питательная среда для дифференциации энтеробактерий содержащая 5 питательную основу, углевод, индикатор, поверхностно-активное вещество,агар, дистиллированную воду, о т л ич а ю щ а я с я теМ что, с цельюусиления дифференцирующих свойств,она дополнительно содержит натрийвинно-кислый кислый и натрий углекислый, сухой экстракт кормовых дрожжей,в качестве питательной основы она содержит сухой триптический гидролизат белкозина в качестве углевода -лактозу, в качестве индикатора -нейтральный красный, в качестве поверхностно-активного вещества - ал,килбензолсульфонат натрия при следующем соотношении компонентовг/л:.Сухой триптический гидролизатбелкозина 6,0-9,0Сухой экстракткормовых дрожжейАгарАлкилбензолсульфонатнатрия 0,6-0,75НейтральныйкрасныйНатрий виннокислый кислый 09 11Лактоэа 10,0-12,0Натрий углекислыиДистиллированная вода Остальное Диффереицирувщие Отсутствие роста, Хсвойства