(22r)-2, 3 -дигидрокси-20-(3 -изопропилизоксазолин-5 ил)-5 -прегнан-6-он, проявляющий фиторостостимулирующую активность и способ его получения

(5)5 ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОО ИЗОБРЕТЕНИЯМ ИРИ ГКНТ СССР Р-. 7 - ,1 ,-.а, Д ИТЕТ .КРЫТИЯМ,Яфф1: ПИСА ОБР К АВТОРСКО ВИДЕТЕЛ ЬСТВ Оа ю яет фи и мож стве и улируюльзован получеростост быть ис особу е е фиторостостим ды, среди которы няется эпибрасс 1(71) Институт биоорганической химии АН(56) Жирмунская Н, МЗубкова Н, ФОвсянникова Т, В, и др, Методические рекомендации по проведению лабораторногоскрининга синтетйческих регуляторовростарастений. Черкассы, 1985, с, 28.Кпд)т В. Е, - Апп, Арр, Во, 1969, чо,63, р. 211,Прозоровский В. Б. Фармакология итоксикология, 1978, с. 497. Изобретение относится к новым химическим соединениям, в частности (22 Я)-2 а,За -гидрокси-(3 -изопропилизоксазолин-ил)-5 а прегнан-сну формулыО и который проявл то .щую активность ет в сельском хозяи, с ния.Известны природны ляторы - брассиностерои наиболее широко приме нолид(54) (22 Я)-2 а,За-ДИГИДРОКСИ-(3 -ИЗОПРОПИЛИЗОКСАЗОЛИН-ИЛ)-5 а -ПРЕГНАН -6-ОН, ПРОЯВЛЯЮЩИИ ФИТОРО- СТОСТИМУЛИРУЮЩУЮ АКТИВНОСТЬ, И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ(бУ) использование: в сельском хоз-ве для регуляции роста растений, Сущность изобретения: продукт-(22 Я)-2 а,За-дигидрокси-(3 -изопропилизоксазолин-ил)5 а-прегнан-б-он, БФ Сг 7 Н 4 зй 04; выход 98, т.пл, 110 - 111 С; Реагент 1 е, пиридинийгидробромид; реагент 2: 0504.Условия реакции: в среде диметилформамида. НО;, НОфО, 4Цель изобретения - получение фиторо-Ф стостимулятора, обладающего более высо-; 01 кой активностью в отношении проростков (Я фасоли и пшеницы по сравнению с известными препаратами, и способ его получения.Поставленная цель достигается тем, что получают (22 Я)2 а, За, -дигидрокси-(3- изопропилизоксазолин-ил)-5 а-прегнан-он формул ыиз (22 Я)-20-(3-изопропилизокса зол ин-ил)-3 а 5-циклоа -прегнан-она путем изомеризации циклокетона в присутствии пиридинийгидробромида в 2-ен-производное смоль) Оз 04 и раствор 0,5 г(0,0036 моль) й-метилморфолина в 2 мл воды. Перемешиваютпри комнатной температуре 5 ч. К реакционной смеси добавляют насыщенный раствор5 МагСОз, Осадок отфильтровывают, фильтратупаривают. Экстрагируют хлороформом.Органический слой промывают 0,5-нойНС 1 и раствором МаС 1, Упаривают,Получают 0,95 г (98 6) (22 В)-2 а,За -ди 10 гидрокси.(3 изопропилизоксазолин-ил)-5 а-прегнан-она (1). Т.пл. 110.-111 С.ИК-спектр (ю, см ): 3430, 1715, 1040,ПМР-спектр (СОСзР, м,д.): 0,70 с. (ЗН,18-Ме); 0,76 с. (ЗН, 19-Ме); 0,87 д, (ЗН, 2115 Ме)г 1,17 д. (6 Н, 26 и 27-Ме); 2,68 м. (ЗН, Сгзи С Н); 3,78 м. (1 Н, С Н); 4,08 м. (1 Н, С Н);4,64 м, (1 Н, СггН).Масс-спектр (тй): 445 (М), 430 (МСНз), 402, 358, 334, 315.20 П р и м е р 2. Испытание биологическойактивности.Исследования проводят в лабораторных условиях на растениях фасоли и пшеницы, эталоном служит эпибрассинолид.25 Для определения фиторостостимулирующей активности используют тест на проростках фасоли,Обработку проводят тогда, когда 2-емеждоузлие (между первой парой листьев и30 первым тройчатым листом) находится в самом начале роста и не превышает 1 - 2 см.Учет проводят через 2 нед после обработки препаратами.Результаты исследований представле 35 ны втабл.1,Тест на проростках пшеницы предназначен для обнаружения ретардантов для однодольных и одновременно даетвозможность выявить стимуляторы роста0 надземной массы и корней.Семена пшеницы равномерно раскладывают в кюветы на влажную фильтровальную бумагу, покрытую писчей бумагой,накрывают стеклом и выдерживают в термо 5 стате 3 сут при 24 С, Одинаковые про росткипшеницы высаживают в отверстия крышекна сосуды с водойроводной водой объемом500 мл. Через 3 - 4 сут воду в сосудах заменяют питательным раствором с добавлени 0 ем препарата. 0(1 Я.4Стераидный изоксазолин (1,4 г, 0,0034 моль) и пиридинийгидробромид (1,5 г, 0,009 моль) растворяют в 20 мл диметилформамида. Реакционную смесь кипятят 2 ч, Затем добавляют воду и экстрагируют хлороформом, Органический слой промывают 5;- ным раствором Н С 1. Упаррастворитель, очищают хроматографсиликагеле. Получают 0,98 г (700) (2(3 -изопропилизоксазолин-ил)-5 а 1 5 2-ен-она (И).ПМР-спектр(СОС 1 з, д, м,д,): 0,71 с. (18 и 19-Ме); 0,86 д. (ЗН, 21-Ме); 1,15 д (6 Н, 26 и 27-Ме); 2,32 м, (1 Н, С Н); 2,66 м. (ЗН, Сг и С Н); 4,62 м. (1 Н, Сг Н); 5,33 м.; (1 Н, С Н);5,64 м. (1 Н, С Н).б) Получение целевого соединения (1).К раствору 0,9 г (0,0022 моль) кетона (И) в 50 мл ацетона добавляют 0,045 г (0,00011,ивают ией на 2 В)-20- прегный раствор без твор готовят на влением следу; КНгРО 40,33; ссуд высаживана вариант. Усвещение 4-6 ч, температура 55 последующим цис-гидроксилированиемдвойной связи четырехокисью осмия: 0Наблюдается устойчивость изоксазолинового кольца в реакциях формирования брассиностероидной функциональности колец Аи В, Отмечены высокие выходы указанных стадий и отсутствие каких-либо побочных продуктов, что обеспечивает эффективность этого метода синтеза. (228)-2 а,а 3-Дигидрокси-(3 -изопро пилиэоксаэолин-ил)-5 а -прегнан-он вызывает стимулирующее воздействие на длину 2-го междоузлия и общую длину растения фасоли и превосходит на 10-14% стимулирующее воздействие, вызываемое эпибрассинолидом. В тесте на проростках пшеницы исследуемое вещество оказывает стимулирующее воздействие на рост корней и наземной массы, превосходящее действие эпибрассинолида на 14 - 24 ф.П р и м е р 1. Синтез целевого соединения, а) Получение Ь -6-кето-производногог Контроль - питательн препарата. Питательный ра водопроводной воде с доб ющих солей, г/л: СаОЧОз)г 1 М 95 О 4 7 Нг 0,17, В каждый ют 10 проростков, 2 сосуда ловия выращивания: о тыс.люкс, световой день 161747455 КО О проявляющий фит ак гивность. остостиму ича ю щи йс я илизоксдзолингнан-он обраробромидом с ксилированием опропилизокса-она четырех 2. Способ тем, что (22 Я)- 5-илЗа,5-ц батывают и последую щи полученного зол ин-ил)-5 окисью осмия, отл зопроп а -пре нийгид гидро 0-(3 -.из -2-енпоп.1 20-(3 -и иклоириди м цис (22 Ю-прегн етен ия блиц а 2 а Составитель И,федосееваРедактор А.Огар Техред М.Моргентал Корректор П.Гереш аз 2471 Тираж Подписное 8 НИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ С 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 1 22 - 24 С. Измерения проводят через 20 днот начала опыта.Полученные результаты приведены втабл. 2,Острую токсичность соединения определяют по методу Прозоровского. Для опытов используют самок мышей. Исследуемоевещество вводят животным внутрижелудочно в виде водной эмульсии. Наблюдения заживотными проводят в течение 14 сут.Показатель 0, определенный по таблице Проэоровского:Обо = 720 (450 + 230)мг/кг при р0 05.Таким образом, (228)2 а,За - дигидрокси-(З изопропилизоксазолин-ил)-5 апрегнан-он проявляетфиторостостимулирующую активность, превосходящую на 12-24 активность эпибрассинолида,Формула изобр 1. (22 В)-2 а, За - дигидрокси-(З -изо пропилизоксазолин-ил)-5 а "прегнан-он формулы О - М