Способ определения стимулирующего действия фармпрепаратов на кислородсвязывающую функцию крови

СОКИ СОВЕТСКИХаЭИМОюбникРЕСПУБЛИК 51)5 С 0 ЕТЕНИЯ енный рацей В.Костю, 1988УЛИРУЮОСУДАРСТВЕНКЫИ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ ОПИСАНИЕ ИЗО Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ 1(5) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТИМ Изобретение относится к медицине,в частности к Фармакологии, и можетбыть использовано для отбора и оценки воздействия Фармакологических препаратов на кислородотранспортнуюФункцию крови.Цель изобретения - повышение экономичности способа и точности определения.Указанная цель достигается тем,что в качестве пробы крови применяютотмытые эритроциты человека, взвешен" .ные в изотоническом 0,2 И Фосфатномбуферном растворе с рН 6,0-6,5 в концентрации 410 ф в 1 л, причем отмы"тые эритроциты получают из донорской крови со сроком храненияболее.:21 дня, а оксигенатор в контуре цир-,кулирующей пробы крови выполняютмембранным,Описываемый способ осуществляется следующим образом.,80.17 9295 Д 1 ЩЕГО ДЕЙСТВИЯ ФАРИПРЕПАРАТОВ НА КИСЛОРОДСВЯЗЫВАЮЩУЮ ФУНКЦИЮ КРОВИ (57) Цель изобретения - повышение . экономичности и точности способа. Способ заключается в помещении доно ской крови в замкнутый контур, соде жащий насос, мембранный оксигенатор и оксигемометр измерения в крови оксигемоглобина до и после введения Форморепарата, причем возможно ис" пользовать донорскую кровь со сроком хране ния более 21 дня. Из флакона с донорской кровью более 21 дня хранения получают отмытые эритроциты по стандартной методике. Далее эритроцитарную массу помещают в раствор изотонического 0,2 И Фос-. Фатного буФера с рН 6,0-6,5 в кон" центрации 4 10 в 1 л, Полученную взвесь эритроцитов разделяют на две или более равных порций, например по 100 мл, Одну из порций вводят в замкнутый контур циркуляции, в котором содержатся насос, оксигенатор и оксигемометр. После заполнения цир. куляторного контура пробой крови, ;(взвесь эритроцитов в растворе) йз" меряют имеющийся уровень парциальйо"го давления кислорода и оксигемогло "бина. После этого, регулируя ско" рость вращения насоса, начинают. рециркуляцию пробы крови в контуре и одновременно начинают производить пг дачу кислорода в камеру,оксигенато39295 3 17 ра, отделенную от крови полупроница-емой мембраной. За счет регуляциискорости циркуляции пробы крови в контуре и объема подачи кислорода устанавливают последовательно нарастающие уровни парциального давления кислорода и определяют соответствующие им величины оксигемоглобина, строя таким образом зависимость между эти" ми параметрами (кривая диссоциации оксигемоглобина) После этого кон" тур промывают Физиологическим раствором и вновь заполняют второй порцией подготовленной пробь 1 крови, в которую добавляют исследуемый фармакологический препарат в нужной дозировке. Далее повторяют процедуру получения зависимости между парциаль" ным давлением кислорода и содержанием оксигемоглобина, После этого сопоставляют зависимости, получен" ные для обеих порций пробы крови, т.е . исходной и с наличием исследу" емого Фармакологического препарата, По разнице полученных зависимостей судят о действии данного Фармакологического препарата.на кислородсвязывающую Функцию крови, .Аналогичным образом может осуществляться подбор доз .препаратов.П р и и е р 1. Отмытые эритроци" ты из донорской крови 22 дней хранения взвешены в изотоническом 0,2 М Фосфатном буФерном растворе с рН 6,2 в концентрации 410 в 1 л. Весь обьем взвеси эритроцитов был. разделен на 5 проб по 100 мл, Циркуляторный замкнутый контур состоял из насоса типа АТ(перфузионный роликовый насос), гемооксиметра фирмы "НИХОН КОДЕН" Япония и мембранного малопотоцного оксигенатора МАГ(экспериментальный образец) с полупроницаемой мембраной Карбоксил-АС,После заполнения контура первой порцией эритроцитарной взвеси производили последовательные измерения содержания оксигемоглобина при наращи. вании уровня парциального давления кислорода до 300 мм рт.ст. Затем циркуляция была прекращена, контур был промыт физиологическим раствором и вновь заполнен порцией эритроцитарной взвеси с добавлением исследуемого Фармакологического препарата, например унитиола в количестве 0,2 мг на 100 мл циркулирующей массы эритроцитарной взвеси. Далее производили действия, аналогичные предыдущим,по определению кривой диссоциации оксигемоглобина, Пробы были такжеповторены при дозах унитиола 0,4 ф0,61 0,8 ф 1;0 мг на 100 мл эритро"цитарной взвеси,В качестве примеров были выбранытакже седующие препараты: дибазол(как препарат повышающий резистент"ность организма), цитохром-С (при-,меняемый в качестве антигипоксанта).0-пеницилламин (тиолсодержащий антиоксидант),П р и м е р 2, Исследования про-.водили согласно предлагаемому спасо"бу и способу"прототипу. Оксигенациюкрови проводили при постоянном уровне парциального давления кислорода2 О 250 мм рт.ст.Диабазол вносили в исследуемуюпробу в количестве 0,2, 0,4,. 0,6,0,8 и 1 мг на 100 мл крови, Подобные концентрации достигаются при пар"д энтеральном; введении препарата па"циентам, Ни при одной из перечислен"ных концентраций препарата уровеньоксигемоглобина статистически-русто-верно не отличался от исходного (в6 пробе крови без добавления препара- .та), он колебался в пределах 96-98 ь(при данном способе) без какой-либозаметной тенденции.Цитохром-С добавляли из расчетаЗэ 0,1, 0,2, 0,3, 0,4 и 0,5 мг на 100 млпробы крови, Сходные концентрациипрепарата в крови имеют место привнутривенном его введении в процессе46общепринятой методики лечения. Уро"вень оксигемоглобина в.пробах кровипри указанных концентрациях цитохромав ходе оксигенации. не поднимался выше исходного на статисти"чески-достоверную величину, он ко-,.4 ф лебался в пределах 97-98 ь .(при способе-прототипе) и 61-633 (при дан"ном способе) .0-пеницилламин добавляли из расче-та 0,3, 0,6, 0,9, 1,2, 1,5 мг наф 100 мл пробы кровиКонцентрации такого порядка имеют место при лечении данным препаратом согласно схе"мам приема, приводимым в Фармако"логических справочниках. При спосо"М бе-прототипе не удалось выявить статистически-значимых тенденций ввзменениях уровня оксигемоглобина кровив процессе оксигенации. КоличествоСоставитель В.ИитюшинТехред А.Кравчук КорректоР Д.Обручар Редактор Л. ВолковаеЕ ю ю ФЮВ юВ ЮЗаказ 2000 Тираж ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж Рауаская наб,д 4/5. ававтаю юПроизводственно-издательский комбинат Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101 1739295 6оксигемоглобина в этом случае воз- родсвязывающую функцию крови, вклюрастало от 96 в исходной пробе кро" чающий введение пробы крови в замви (без препарата) ло 98 в пробе с . кнутый контур, содержащий насос, ьк-. концентрацией 0-пеницилламина 1,2 и сигенатор и оксигемометр, измерение снижалось до 973 в пробе с концент" в крови оксигемоглобина до и после рацией 1,5 мг/100 мл. При применениивведения фармпрепарата при заданном предлагаемого способа отмечалось воз- парциальном давлении кислорода, о т" растание количества оксигемоглобина л и ч а ю щ и й с я тем, что, с цеот ЪОФ в контрольной пробе до 78 в 1 лью повыщения экономичности способа, пробе с концентрацией Р-пеницилл- точности определения за счет физиолоамина 0,9 мг/100 мл и снижение до гичности и стандартизации условий, 723 в пробе с концентрацией препа- оксигенатор выполняют мембранным, а рата 1,5 мг/100 мл, в качестве пробы используют суспенф о р м у л а и з о б Р е т е н и я зию эритроцитов донорской крови соСпособ определения стимулирующего сроко хранения бдействия фармпрепаратов на кисло