Способ моделирования эпилептического статуса

(54) СПОСОБ МОДЕ ТИЧ ЕСКОГО СТАТУ (57) Изобретение от риментальной меди няться при модели ского статуса, Це вышение воспрои кратных генерализо ческих судорог. Эта билатерального вве ЛИРОВАНИЯ Э САосится к област цины и может ровании эпил ь изобретеии зводимости и ванных клоник цель достигаетс дения в хвостат иэкспе приме ептиче я - по МНОГОо-техн и я путем4 С) О ю Изобретение оттальной.медициневано для изучениямеханизмовэпилептического статуса,еерофилактики и куптания новых фарма к эксперименбыть испольэоизиологических стности эпилепки методов его я, а также испыеских препараноситсяможет патоф ии, вча азработ ировани кологич то Способ осущес зом. Крысам ежедн брюшинно вводятвляют следующим абра ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ 2/1492, Бюл. М 4кий медицинский институт им.ндра, Л,С.Годлевский, А.М,Маза, Амит.Бандиопадхай и Панма(Ю)5(088.8)осуге О,С. КЬбИпц 3, й. ачеп6, р,249-262. Целью изобретения является повышение воспроизводимости способа и многократных генерализованных клонико-тонических судовно однократно внутри икротоксин в дозе 1,0 1709380 А 1 крыс, подвергнутых пикротоксиновому киндлингу (17-25 внутрибрюшинных введений пикротоксина в дозе 1,0 - 1,3 мг/кг) скополамина в количестве 5-10 мкг с последующим (через 3-5 мин) внутрибрюшинным введением пикротоксина в дозе 1,0-1,3 мг/кг. Повторные введения пикротоксина приводят к возникновению у животных судорожных проявлений возрастающей интенсивности до развития однокоатных генерализованных клонико-тонических припадков. Микроиньекция в хвостатые ядра крыс скополамина за 3-5 мин до очередной инъекции пиротоксина приводит к развитию у крыс клонико-тонических судорожных припадков с падением на бок, которые повторяются по 10-15 раэ (в среднем 13,8+1,2 раза). Один иэ припадков заканчивается развитием тонической экстензии задних конечностей и гибелью животных, летальность в условиях описываемого способа составляет 100 ф,1,3 мг/кг в течение 17 - 25 дней до получения у 100 О животных генерализованных клонико-тонических припадков, Затем под гексеналовым наркозом (100 мг/кг) животных фиксируют в стереотаксическом аппарате и по координатам атласа (АР = 0,2, 1 =3,0, Н = -4,5) билатерально имплантируют направляющие канюли в хвостовые ядра, Для регистрации электрической активности структур, головного мозга вживляют монополярные константановые электроды в гиппокамп (АР - -2,8, 1 - 1,5, Н = 3,5), хвостатое ядро, сенсомоторную кору, Индифферентный электрод крепят в носовых костях. Через 10-15 дней после операций в условиях свободного поведения животных через прово 170938010 Через 24 ч после 19-го введения пикро дящие канюли при помощи микроиньектора вводят 5-10 мкг скополамина в 0,5 - 1,0 мкл 0,9 А-ного раствора ЫаС 1 В каждое хвостатое ядао, Через 3-5 мин после микроиньекции внутрибрюшинно вводят пикротоксин в дозе 1,0-1,3 мг/кг. Электроды присоединяют к раэьемам электроэнцефалографа. Через 15-25 мин после введения набладают развитие повторных клонико-тоническихприпадков, которые развиваются по 10-15рзз и заканчиваются летально у 100 животн ых. П р и м е р, Крысе-самке линии Вистар массой 250 г производят внутрибрюшинное введение пикратаксина В дозе 1,3 мг/кг. Наблюдение в течение 60 мин не выявляет у животного поведенческих и ЭЭГ-изменений. В дальнейшем подобные введения пикротоксина производят ежедневно однократно внутрибрюшинно, После 4-й иньекции препарата у крысы отмечается появление миаклонических вздрагиваний галОВы и отдельных мышц туловища, После 7-й инъекции миокланические вздрагивания переходят в повторные клонические судороги всего туловища и/или передних коне .настей. Через 19 мин после 17 й иньекцил пикротоксина у живатнага аазвивается генералиэаванный кланика-тонический припадок с падением на бак, постприступнол депрессиеЙ и вегетативными расстройствами, В последующем генералиэованные судорожные припадки наблюдаются у жиВатнага после каждого введения пикротаксина. В процессе осуществления киндлинга после каждого Введения плкротоксина у животного развивались однократные генералиэаванные клоника-тонические судороги,токсина крысу пад гексеналовым наркозом г 100 мг/кг) фиксируют В стереотаксическом аппарате и по координатам атласа (5) имплантируот проводящие канюли В хвостовые ядав по координатам АР = 0,2, 1 =. 3,0, Р = 4,5, Для регистрации электрической активнастл структур головного мозга в хвостатые ядра, а также в гиппокамп ГАР ="2,8, 1=1,5, Н -- 3,5) и сенсомотарную кору вживляют монопалярные константановые электроды. Индифферентный электрод фиксируют в носовых костях, Через 10 дней пЬсле операции крысе в условиях свободного поведенля Вводят при помощи микроиньектара В хвостовые ядра скополамин в дозе 5,0 мкг и ча.;ез 5 мин инутрибрюшенно Вводят пикрото ин в дозе 1,3 мг/кг. Электроды животнога присоединяют к разъему электрознцефалографа. Через 7 мин после иньекцли у крысы возникают судорожные 15 20 25 ъ 0 35 вздрагивания отдельных мышц туловища, которые переходят через 2 мин в повторные клонические судорога всего туловища и/или передних конечностей, Клонические судороги через 2 мин после возникновения переходят в генерализованные клонико-тонические припадки с падением на бок, постприступнай депрессией и вегетативными расстройствами. Бо время припадков в ЗЭГ регистрируются частые (7 - 10 в 1 с) пиковые разряды, синхронизированные во всех структурах, амплитуда которых максимально выражена в гиппокампе, где она составляет 600-700 мкВ, Судорожные припадки развиваются у животного повторно 15 раз с интервалами 3 - 5 мин. Длительность первого судорожного припадка составляла 50 с, 15-го - 120 с, В конце 15-го кланика-танического судорожного приступа у крысы раэвицается тоническая экстензля задних конечностей, остановка дыхания л гибель,Таким образам, у животного воспроизведена модель эпилептического статчса.в Виде многократных генерализованных судорожных припадков, заканчивающихся летальным исходом.Данный способ показывает важное значение, которое имеет в патогенезе эпилептического статуса состояние повышенной судорожной готовности с одной -стороны, как это имеет место при киндлинге, и нарушение тормозного контроля со стороны хвостатого ядра, в частности снижение в нем активности халинергическай нейромедиаторной системы, воспроизводимое локальной микроиньекцией скопаламина. Разработанная модель позволяет изучать новые эффективные методы профилактики и купиравания эпилептического статуса, что является актуальной проблемой клинической эпилептологии,Высокая Васпроизводимасть способа, простота и доступность его Осуществления способствуют его широкому распространению В лабораториях, изучающих механизмы деятельности мозга в условиях патологии и занимающихся разработкой тепарии нервнь 1 х болезней,Формула изобретения Способ моделирования эпилептического статуса путем введения фармакологических препаратов экспериментальному животному, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения воспроизводимости способа и многократных генерализованных клонико-тонических судорог, производят 17-25 ежедневных однократных внутрибрюшинных введений пикратоксина в дозеЗаказ 429 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб;, 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина, 101 1,0-1,3 мг/кг и затем однократно в хвостатые ядра билатерально вводят 5-10 мкг скополамина и через 3-5 мин внутрибрюшинновводят пикротоксин в дозе 1,0-.1,3 мг/кг,