Способ моделирования психомоторных пароксизмов

(21) (22) (46) ий и ти длевскилысин 1 п Кезеагсй а 1, В318. Изобретеименно к едицине, психиатотносится опатологи удо рож ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТПРИ ГКНТ СССР ПИСАНИЕ ИЗОБР Н АВТОРСКОМУ С 4412762/28-1415.04.8807,05,90, Бюл У(56) 1.огЬпап Е.Ю. ег.1983, ч,218, р,299(54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ПСИХОМОТОРНЫХ ПАРОКСИЗМОВ(57) Изобретение относится к медицирии,Цель изобретения - повыаениевоспроизводимости способа,Способ осуществляется следующимобразом,Крысе линии Вистар производят17-25 ежедневных однократных внутрибркипинных введений пикротоксина вдозе 1,0-1,3 мг/кг, Первые 3-4 вве"дения пикротоксина не вызывают у животного никаких поведенческих реакций, В дальнейшем отмечается появление и прогрессирующее нарастание выраженности судорожных проявлений ототдельных миоклонических вздрагиваний до генерализованных клонйко-тони-,ческих припадков с падением на бок,вегетативными расстройствами (мочеиспускание, саливация) и постприступнойдепрессией. После 17-25 введенийпикротоксина генерализованные срожные припадки, Появление судо не, а именно к невропатологии и психиатрии. Цель - повьппение воспроизводимости способа, С этой целью животному в течение 17-25 дней ежедневно внутрибрнкпинно вводят пикротоксинв дозе ,0-1,3 мг/кг. Затем билатерально в зону вентряльной тегментальной области вводят 20-30 нг мусцчмола и через 5-10 мин после этого внутрибркаинно вводят 1,0-1,3 мг/кг пикротоксина. Применение способа позво-ляет повысить воспроизводимость модели психомоторных пароксизмов на.537по сравнению с прототипом,ных реакций указанной интенсивностислужит критерием прекращения введений пикротоксина, На следующий деньпосле последней инъекции эпилептогена животному дают гексеналовый наркоз (100 мг/кг), после чего фиксируют в стереотоксическом аппарате,Скальпелем производят разрез мягкихтканей головы. По координатам стереотоксического атласа определяют переднюю и латеральную координатывентральной тегментальной области,При помощи бора в найденной точке.сверлят трепанационное отверстие,в которое на глубину 8,0 мм опускают проводящую канюлю с внутреннимдиаметром О,б мм, Канюлю фиксируют ккостям черепа при помощи зубнойпластмассы, После того, как пластмасса застыла, аналогичным образомпроизводят билятеральную имплантацию проводящей канюли, Для регистрации электрической активности структур головного мозга производят имплан 15 б 2953тацию монополярных константановых,электродов в гнппокамп, хвостатоеядро, сенсомоторную кору, ИццифЬерентный электрод Фиксируют в но"совых костях, Фиксация электродов ккостям черепа также осуществляетсяпри помощи зубной пластмассы, Через10"15 дней после операций (1015 дней - стандартный послеоперационный период) крысе в условиях свободного поведения в проводящую канюлю вводят инъекционную канюлю свнутренним диаметром 0,4 мм, присоединенную к микроинъектору в который предварительно набран мусцимол,разведаннь 1 й в 0,97-ном раствореИаС 1, Мусцимол вводят в количестве20-30 нг в обьеме 1-.3 мкл растворителя; введение осуществляют в течение 2 мин, после чего еще в течение2 мин инъекционная канюля остаетсяв зоне введения для предотвращениявытекания раствора, Аналогичным образом произвоцят введение мусцимола 25билатерально, Через 5-10 мин послеокончания введения мусцимола крысепроизводят внутрибрюшинную инъекциюпикротоксина в дозе 1,0-1,3 мг/кг.Для регистрации электрической активности структур головного мозга животного сажают в индивидуальную экранированную камеру и присоединяют кэлектроэнцейалографу, На 10-15-й минуте после введения консульсанта уживотных наблюдают развитие психомоторных эпилептических припадков. П р и м е р 1, Крыса-самцу линии Бистар массой 250 г производят внутрибрюшинное введение пикротоксина в дозе 1,3 мг/кг, Наблюдение в течение бО мин не выявляет у животного никаких судорожных реакций. В дальнейшем подобные введения пикротоксина производят однократно ежедневно. После 4-го введения эпилептогена у крысы через 15 мин после инъекции отмечаются судорожные вздрагивания головы и передних конечностей. После 12-го50 введения пикротоксина у крысычерез 20 мин после инъекции появляются повторные клонические судороги всего туловища и передних конечностей которые через 3 мин после955 их возникновения переходят в генерализованный клонико-тонический припадок с падением на бок, постприступной депрессией и вегетативными расстройствами. Генерализованные судорожные припадки отмечаются в дальнейшем после каждого введения пикротоксина. На следующий день после 17-й инъекции пикротоксина, крысу под гексеналовым наркозом 100 мг/кг) фиксируют в стереотаксическом аппарате, после чего производят билатеральную имплантацию канюль в зону вентральной тегментальной области по координатам стереотаксического атласа: ЛР=-4,8;1=1,0; Н=8,0. Для регистрации электрической активности структур головного мозга производят также имплантацию монополярных электродов в сенсомоторную кору, хвостатое ядро (ЛР-0,3; Х = 1,5; Н = 1,5) и дорсальный гиппокамп (ЛР = -4,8; 1 = 3,5, Н = 3,5). Через 1 О дней после операции животному при помощи микроинъектора. через канюли вводят мусцимол в дозе 30 нг в объеме 3 мкп, Введение мусцимола не вызывает у животного никаких поведенческих изменений, Через 5 мин после микроинъекции мусцимола животному производят внутрибрюшинное введение пикротоксина в дозе 1,3 мг/ /кг, Через 7 мин после введения эпилептогена у животного отмечаются слабые судорожные вздрагивания головы.На 11-й минуте судорожные вздрагивания исчезают. У животного появляютсявыраженные поисковые движения морды,Крыса совершает периодические пробежки по клетке, перемежающиеся кратковременными остановками, во времякоторых она как бы прислушивается кчему-то, На 20-й минуте после введения пикротоксина крыса забивается вугол, перебирает передними лапами,.пищит (немотивированная защита, вокализация), При предъявлении световых(вспьппка света ), звуковых (хлопок постолу ), болевых (защипывание хвоста)раздражителей крыса не реагирует наних, В ЭЭГ указанным поведенческимизменениям соответствует появлениекомплексов спайк-волновых разрядовчастотой 4 кол/с, наиболее выраженных в гиппокампе, Продолжительностьотдельных пароксизмов составляет30-60 с, частота их возникновения0,5-1 в ми. Общая продолжительностьповеденческих и ЭЭГ изменений составляет 50 мин. Наблюдение в течение90 мин после окончания психомоторныхпроявлений не выявляет у животногосудорожных реакций,5 15629Таким образом у животного воспроизведена модель психомоторного пароксизма,Л р и м е р 2, Крысе-самке линииВистар массой 220 г производят внут 5рибрюшинное введение пикротоксина вдозе 1,0 мг/кг, Наблюдение в течениебО мин не выявляет у животного судорожных реакций, В дальнейшем подобные введения пикротоксина производят ежедневно однократно, После12-го введения пикротоксина через15 мин после инъекции у крысы отмечается появление слабых миоклонических вздрагиваний головы и передних конечностей, На 17-й минуте после 18-го введения пикротоксина .у .животного отмечаются повторные клонические судороги всего туловища и передних конечностей, которые в течение 5 мин переходят в генерализованный судорожный припадок с падением набок, постприступной депрессией и вегетативными расстройствами. В дальнейшем судорожные припадки отмечаются в ответ на каждое введение пикротоксина, На следующий день после последней (25-й ) инъекции конвульсанта,животное под гексеналовым наркозом1 ОО мг/кгфиксируется в стереотаксическом аппарате. По координатам стереотаксического атласа, крысе произ-водят билатеральную имплантацию ка-июль в зону вентральной тегментальнойобласти (АР=-4.,8 1 = 1,0; Н = 8,0).Для регистрации электрической активности структур головного мозга производят имплантацию монополярныхконстантановых электродов в сенсомоторную кору, гиппокамп (АР = -4,8;1 = 3,5; Н / 3,5 ), хвостатое ядро(АР = -0,3; 1 = 1,5; Н = 1,5). Индифферентный электрод крепят в носовыхкостях, 45Через 10 дней после операцииживотному при помощи микроинъекторапроизводят билатеральное введениев канюли мусцимола в дозе 20 нг вобъеме 1 мкл. Введение мусцимола невызывает у крысы никаких поведенческих изменений, Через 5 мин после микроинъекции мусцимола производят внутрибрюшинное введение пикротоксина вдозе 1,0 мг/кг, Через 10 мин после 53 6введения пикротоксина у животногоотмечаются незначительные судорожныевздрагивания голоры, продолжающиесяв течение, 5 мин, На 15-й мшуте послеинъекции эпилептогена у крысы отмеЪчаются выраженные поисковые движенияморды; животное как-бы принюхиваетсяк чему-то, Крыса совершает периодические пробежки по камере, перемежающиеся кратковременными остановками,которые сопровождаются поисковыми движениями морды; забивается в угол камеры, перебирает передними лапает, пищит, Животное не реагирует на предьявление световых (вспышка света),звуковых (хлопок по столу), болевых(защипывание хвоста) раздражителей,Указанным поведенческим изменениям вЭЭГ соответствует появление спайкволновых комплексов частотой 5 кол/с,.наиболее выраженных в гиппокампе, Продолжительность пароксизмов психомоторных реакций составляет 10 - 40 с, частота их возникновения 0,5-0,7 в мин.Общая продолжительность указанныхповеденческих и ЭЭГ изменений составляет 40 мин от момента возникновения, Наблюдение в течение 90 мин после скончания психомоторньх нарушений .не выявляет у животного судорожныхреакций,Таким образом, у животного воспроизведена модель эпилепсии в видепсихомоторного пароксизма,Применение способа позволяет повысить воспроизводимость модели психомоторных пароксизмов на 537 посравнению с известным способом,Формула изобретенияСпособ моделирования психомоторных пароксизмов путем введения животному химических веществ, о т л и ч а ющ и Й с я тем, что, с целью повышения воспроизводимости, жИвотному в течение 17-25 дней ежедневно внутрибрюшинно вводят пикротоксин в дозе 1,0-1,3 мг/кг, затем билатерально в зону вентральной тегментапьной области вводят 20-30 нг мусцимола и через 5-10 мин после этого внутрибрюшинно вводят пикротоксин в дозе 1,0-1,3 мг/кг.3