Способ определения пироксидазной активности биологических объектов
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
где Д Р/мин - прирост оптическойплотности за 1 мин,К - калибровочный коэффициент (т.е. количество мкмоль НХОФ в4 мл пробы, соответствующее оптическойплотности 1),и - разведение перед внесением пробы в реакционную смесь,ч - объем вносимой пробы,млВ конкретном случае пП/мин = 0,26,5К = 0,35, и = 10, 1 = 0,2. Тогда А =/мин мг влажной массы хрена.П р и м е р 2. Анализ пероксидазной активности очищенного препаратапероксидазы хрена (КЕ = 2,7),Раствор фермента в воде разбавляют до концентрации 0,25 - 4 мкг/мли анализ осуществляют по примеру 1.Исходная концентрация фермента 250,5 мг/мл, разбавление 250, объемвносимой пробы фермента 0,2 мл.100/ мин = 0,195. Тогда А = 85 мкмоль//мин мл = 170 мкмоль/мин мг.В предыдущих примерах активностьопределялась в кинетическом режиме,т;е. прямым измерением прироста оптической плотности за 1 мин, Еслисоответствующие приборы отсутствуют,в серийных опытах активность пероксидазы можно измерять в режиме определения абсолютной величины оптическойплотности растворов (против контроля)предварительно инкубируя пробы вфиксированное время (5 - 30 мин) прикомнатной температуре по формуле,мкмоль/мин мл:ДР и к 71 45где С - время инкубации, мин.Остальные параметры аналогичны примеру 1.П р и м е р 3. Анализ следов гемоглобина ло его пероксидальной активностиНепосредственно перед опытом смешивают 0,2 мл 1 М ацетатного буфера, . рН 5,3, 0,2 мл 5 мМ гваякола, 0,2 мл5 мМ п-аминодиэтиланилина, 0,2 мл разведенной исследуемой пробы (4- 40 мкг гемоглобина). Объем проб доводят до 2,8 мл водой и реакцию начи Таблица 1 Концентрация п-аминоПриростоптической плотКонцентрация гваякола, мМ диэтиланилина, мМ ности за1 мин 0,050,50,250,050,50,751,0 0,05 0,05 0,25 0,5 0,5 0,75 1,0 0,082 0,226 0,251 0,137 0,251 0,308 0,300 Как видно из табл.1, максимальный положительный эффект предлагаемого способа достигается при концентрации хромогенов 0,25-0,75 мМ, При концентрации больше 0,75 мМ чувствителъность анализа не растет, однако увеличивается оптическая плотность контроля. Чувствительность анализа увеличивается в 5,6 раза,Сравнение чувствительности определения пероксидазы хрена по предлагаемому и известному методам (хромоген - гваякол) дано в табл.2,Условия: 50 мМ фосфатный буфер,рН 7,0. Концентрация хромогенов0,25 мМ. перекиси водорода О, 1 мМ,фотоэлектроколориметр ФЭК КФКМПо1 см. Температура 20 С. Пероксидазахрена ("Реанол", КЕ = 0,6)кают прибавлением 0,2 мл 20 мМ Н О После инкубации проб при комнатной температуре реакцию останавливают прибавлением 1 мл 0,125 М БаНРО 4 и пробы фотометрируют при 670 нм (ФЭК КФКМП, 1 см) или 650 нм (СФ, 1 см) против контроля (без гемоглобина). Расчет ведут по калибровочному графику, построенному по раствору гемоглобина с известным содержанием этого гемового белка.Допустимые граничные значения концентраций хромогенов приведены в табл,1. Условия: 50 мМ фосфатный буфер, рН 7,0. Концентрация пероксидазы хрена ("Реанол", КЕ = 0,6)0,5 мкг/мл, перекиси водорода 0,1 мМ ФЭК КФКМП; 670 нм, 1 см.5 1636773 6Та бли ца 2 Формула изобретения Способ определения пероксидазнойактивности биологических объектовпутем добавления к исследуемой пробе буферного раствора, перекиси водорода и хромогена и инкубации с измерением прироста оптической плот ности во времени, о т л и ч а.ющ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности способа, вкачестве хромогена используют смесьгваякола и и-аминодизтиланилина приконцентрации каждого компонента0,25-0,75 ммоль. Конечнаяконцентрацияпероксидазы,мкг/мл Д 057 Д / ми (Гваякол- и-аминодиэтиланилин) 4 1440/мин 1 (гваякол)00,250,50,7512 0,005 0,124 0,251 0,372 0,492 0,834 0 0,022 0,045 0,066 0,087 0,198 Составитель Н.Гуляева Редактор Л.Гратилло Техред С.Мигунова Корректор М.Самборская, 3 Тираж 410 осударственного комитета по113035, Москва, Ж-З ЗаказВНИИПИ дписное и открытиям при ГКНТ ССС б д. 4/5 обретени Раушская Производственно-издательский комбинат "Патент", г,ужгород, ул. Гагарина, 101Ф
СмотретьЗаявка
4363857, 13.01.1988
ЛЬВОВСКОЕ ОТДЕЛЕНИЕ ИНСТИТУТА БИОХИМИИ ИМ. А. В. ПАЛЛАДИНА
ГОНЧАР МИХАИЛ ВАСИЛЬЕВИЧ, СИБИРНЫЙ АНДРЕЙ АНДРЕЕВИЧ
МПК / Метки
МПК: G01N 33/52
Метки: активности, биологических, объектов, пироксидазной
Опубликовано: 23.03.1991
Код ссылки
<a href="https://patents.su/3-1636773-sposob-opredeleniya-piroksidaznojj-aktivnosti-biologicheskikh-obektov.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения пироксидазной активности биологических объектов</a>
Элемент для определения концентрации ионов водорода (величины рн)
Номер патента: 113370
Опубликовано: 01.01.1958
Авторы: Никольский, Рязанцев
МПК: G01N 27/36
Метки: величины, водорода, ионов, концентрации, рн, элемент
...,1, К)Г,Гг Сг).Й )Тгз- ЛЕНИЕ утЕЧЕК ОтЕПЬ ГЕЛНКО (;), г;ЕГ уТЕЧЕ:;,Е, П Згг) ", гИЕ., П,г,)ИЕНИ 51 Ггг,гЬВс 21 пгЕС;ОГО Э,гстгенЧ 1);, СОИ) ) ггт Е:1 г тг Ег ;, гт . У В ЗЫВЯ 0 ЦЕ., П Рп КтЧССКОС РЯЗЗНГПЕ МЕИДГ НЕ П)5)К:НИЕ: Г Гс.ЬВЗ Нт- СКОГО ЭГЕ ЕЕГс) и ОГО Э.Д.С. с 1 СООТ)ЕТСТЗГИ С .гт.;: тг".;О"гв ОГ уте с; тока мои:по Выразить;Ь УУ, - У)г." - Е,:г: 1 - - - - , =Е -- , -Г1 р(сйг.-ПОГС.ЯЗ,5:5 В УВЯЗНЕПИЕ (Ч) ЗнасЕНПЕ: .Ю ВЗ;)ИРи,;, ПОЛУЧЯЕМ УРсВгСИЕ, ХЯОЯ:ЕРИЗУЮ.;ЦЕЕ ПО, РЕШНОСТЬ О УТ "1; К ТОНЯ В Г 1.ЬВЯПИЧССКОМ ЭЛЕМЕПГЕ Сс) СГек,г 5 ННтМ ЭЛЕКТПОДОЛУ;1)., КT.ЛоН гсЯК ВИдЕ 0 ИЗ т 1)ЯВНЕПИЯ т 1) тглсг устра,ЕП 5 ИОГгЗгзг.гзсгс ОГ утечек тока в гальваническом лементе со стекл 5 еН. злтродом необходимо соблюдение следуогцих...
Способ определения метастазов при раке прямой кишки
Номер патента: 1805396
Опубликовано: 30.03.1993
Авторы: Архангельская, Вайнер, Орешкина, Орловская
МПК: G01N 33/68
Метки: кишки, метастазов, прямой, раке
...протекал с осложнениями, Активность фермента с 361 ед/мл/мин/40 днейи/о снизилась. до 263 (65 дней и/о). Количе 35 ство послеоперационных койко-дней, - 68,общее количество койко-дней - 89, Через бмес на контрольном осмотре при амбулаторном обследовании выявлено нагноение.Общая активность СД составляла 221, Улуч 40 шение состояния через 1 год, активностьСОД ЗОО ед,/мил/мин, через 2 года 356ед,/мил/мин. В настоящее время находитсяпод наблюдением врача, Признаков рецидивов и метастазов нет.2. Больной Л., 1922 г, рождения, историяболезни М 11659/Р. Поступил в отделениеобщей онкологии 21 сентября 1986 г. с диагнозом рак прямой кишкист,кл, гр.Предоперационная ТГТ проведена с 5 по 950 октября курсовой дозой 20 Гр 12/11-86...
Устройство для отжима пробы целлюлозной массы высокой концентрации
Номер патента: 448260
Опубликовано: 30.10.1974
Автор: Песковой
МПК: D21C 9/18
Метки: высокой, концентрации, массы, отжима, пробы, целлюлозной
...корпуса.На чертеже показано предлагаемое устройство, вертикальный разрез,Оно содержит корпус 1 с перфорированным днищем 2, под которым находится лоток 3 для сбора жидкости и плата 4, имеющая выступ соштырями 5, В корпусе расположенпоршень б, к которому прикрепленыдва кронштейна 7 с роликами. Пор шень штоком 8 соединяется с силовым цилиндром 9. Под платой установлена пружина 10,Когда поршень б находится вкрайнем правом положении, на пер форированную часть днища подаетсяцеллюлозная масса. При перемещениипоршня налево пройсходит сжатиемассы, и отжатая жидкоси черезотверстия в днище 2 попадает в ло ток 5 для сбора жидкости и дальшеотводится к датчику. Два кронштейна 7 с роликами, двигаясь вместес поршнем б, нажимают на выступающую часть...
Способ создания непрерывного градиента концентрации раствора
Номер патента: 1035495
Опубликовано: 15.08.1983
Авторы: Ажицкий, Митичкин, Троицкий
МПК: G01N 27/26
Метки: градиента, концентрации, непрерывного, раствора, создания
...концентрации, включающему пред.верительное создание ступенчатогоградиента, последний создают в капил".ляре и вытеснением раствора из капилляра в приемник создают в нем непреывный г а кент концентрации. Непрерывное изменение концентра" ции создается под действием капиллярных сил и сил трения в жидкости в процессе ее вытеснения из капилляра.На фиг, 1 и 2 изображены Ь-образный и линейный градиенты концентрации, полученные предлагаемым способом.Изобретение поясняется на примерах создания непрерывного градиента кон" центрации боратного буфера в глицерине в диапазоне 0-50 боратного буфера.П р и м е р 1 Во фторопластовую капиллярную трубку длиной 35 м с внутренним диаметром 1,5 мм, объем которой (60 мм) равен объему электрофоретической...
Способ конструирования плазмидной днк, штамм -продуцент эндонуклеазы рестрикции и способ получения эндонуклеазы рестрикции
Номер патента: 1040791
Опубликовано: 07.02.1985
Авторы: Баев, Глатман, Кравец, Кузьмин, Мороз, Солонин, Таняшин
МПК: C12N 15/00
Метки: днк, конструирования, плазмидной, продуцент, рестрикции, штамм, эндонуклеазы
...Физической структурыплазмидную ДНК выделяют ускореннымметодом (К 1 е 1 п Р,1 ейа 1, 1980,Р 1 азтпЫ, 8, 88-93) .Рестрикционный анализ проводят спомощью эндонуклеаз Р-1, Вя 1 11,11, Отобранные. клоны проверяютна присутствие системы рестрикциимодификации Есо 87. Для этого сравнивают эффективность посева (э.п.)фага; 0 на клетках, содержащихрекомбинантные плазмиды, а такжештаммах С 5183 (гь. -где ) и ) С 5183( г т+ ) с плазмидой рЬ 13. Наличие в клетках модификации устанавливают при снижении э.п. методом(Т. Ага, А.Ао 1 с 1, 3.Васй. 5, 18,1962) . Полученные данные представлены в табл. 2,Как видно из табл. 2, штамм3 С 5183/С 113 на четыре порядка ограничивает размножение фага Ъ0по сравнению со штаммом 1 С 5183( ГО ), не несущем плазмидуу...