Питательная среда для выделения бактероидов

(71) Научно-исследовательский институт по производству питательных среи Институт хирургии им. Н.В.Вишневского(54) ПКТАГЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЬЩЕЛЕНИЯБАКТЕРОИДОВ(57) Изобретение относиткой микробиологии. Цель ся к медицинсизобретениягосудм теенный комитат сссРпо делАм изОБРетениЙ и ОткРытю повышение чувствительности среды.Питательная среда включает следукнциеингредиенты, г/л: питательный бульон20,9-22,1; глюкоза 0,475-1,275 ф, эритрит 0,0057-0,017., тиамин-бромид0,0019-0,0085; магний серно-кислый0,285-0,765; калий хлористый 0,0380,34, аммоний хлористый 0,665-1,275;агар-агар 9,5-11,475; гентамицин0,0001-0,00015; лизированная кровь 50150; вода ди стиллнро в анн ая до 1 л.Повышение чувствительности среды достигается подбором питательной основыи дополнительным введением в ее состав стимуляторов роста бактероидови ее селективности. Среда может бытьприготовлена в сухом виде. 1 табл.Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть ис"пользовано при бактериологическойдиагностике заболеваний, вызванныхбактероидами,Цель изобретения - повышениечувствительности среды.П р и м е р 1. Для приготовлениясреды минимального состава в колбу 10с 950 мл дистиллированной воды вносят,г: питательный бульон 20,9, глюкозу0,475, эритрит 0,0057, тиамин-бромид0,0019, магний серно-кислый 0,285,калий хлористый 0,038, аммоний хлористый 0,665, агар-агар 9.5. Все тщательно перемешивают и на огне, не допускания подгорания, доводят до кипения, кипятят 1-2 мин. Среду разливаоют во Фчаконы, стерилизуют при 120 С 20в течение 15 мин, рН готовой средыдолжен быть в пределах 7,0 0,2;Перед употреблением среду регенерируют на кипящей водяной бане 10мин, Затем в охлажденную до 45-50 С 25среду добавляют 50 г лизированнойкрови и 0,0001 г гентамицина, взбалтыьают и разливают в чашки Петри.После застывания агарового студняпроизводят посев исследуемого мате1риала.П р и м е р 2. Для приготовлениясреды оптимального состава в колбус 900 мп дистиллированной воды вносят, г: питательный бульон 21,6,глюкоза 0,9, эритрит 0,011, тиаминбромид 0,0045, магний серно-кислый0,54, калий хлористый 0,081, аммонийхпористый 1,125, агар-агар 10,8. Всетщательно перемешивают и на огне, не 40допуская пригорания, доводят до кипения, кипятят 1-2 мин. Среду разливают во флаконы, стерилизуют при120 С в течение 15 мин. рН готовойсреды должен быть в пределах 7,0+0,2,45Перед употреблением среду регенерируют на кипящей водяной бане 1 О мин.Затем в охлажденную до 45-50 С средудобавляют 100 г лизированной крови и0,0001 г гентамицина, взбалтывают 50и разливают в чашки Петри. Послезасть;вания агарового студня производят посев исследуемого материала. П р и м е р 3. Для приготовления среды максимального состава в колбу с 850 мл дистиллированной воды вносят, г: питательный бульон 22,1, глюкоза 1,275, эритрит 0,017, тиаминбромид 0,0085, магний серно-кислый 0,765, калий хлористый 0,34, аммоний хлористый 1,275, агар-агар 11,475. Все тщательно перемешивают и на огне, не допуская пригорания, доводят до кипения, кипятят 1-2 мин. Среду разливают во Флаконы, стерилизуют прио120 С в течение 1.5 мин. рН готовой среды должен быть в пределах 7,0;0,2, Перед употреблением среду регенерируют на кипящей водяной бане 10 мин. Затем в охлажденную до 45-50 С среду добавляют 150 г лизированной крови и 0,00015 г гентамицина, взбалтывают и разливают в чашки Петри. После застывания агарового студня производят посев исследуемого материала.Посев исследуемого материала на среду в чашки Петри производят петлей или шпателем, равномерно раслреде ляя его по всей поверхности среды.о Посевы инкубируют при 37 С в течение 48-72 ч в условиях анаэростата, заполненного трехкомпонентной газовой смесью путем трехкратного вакуумзаместительного промывания.Результаты испытаний питательной среды в экспериментах с чистыми куЛьтурами различных видов бактероидов показывают высокую чувствительность среды по сравнению с контрльными (см. таблицу)Скорость роста на опытной и контрольной средах варьирует от 48 ч инкубации - для быстрорастущих культур, до 72 ч - для культур наиболее требовательных по своим питательнымпотребностям.Из данных таблицы видно, что чувствительность предлагаемой среды находится на уровне среды Шедлера Фирма "1.Ьсо", но значительно выше среды Петракова.Формула изобретенияПитательная среда для выделения бактероидов, содержащая питательную основу, источник углерода, стимулятор роста, агар-агар, лизированную кровь и дистиллированную воду, о т л и ч а ю щ а я с я тем, что, с целью повышения чувствительности среды, она дополнительно содержит маг" ний серно-кислый, калий хлористый, аммоний хлористый, гентамицин, в качестве питательной основы она содер50,0-150,0 9,5-11,475 20,9- 2,1 0,0057-1,275 0,0057-0,017 0,0019-0,0085 1 О Индиви-Питатель Ско"ростьроста,ч Разведение куль" тур Штамм ные средуальноеобозначение 10 10 1 В. Ехау 1 а 32 139 89 В. очаЪое 43 РивоЪасйегилиппесгорЬот 2523 18 О Э 173 93 7 72б. шо 1 аяХпо 8 епсна 34 40/74 ьЬасГегсщпаспе 48 8 Рерихов гер го соссц з 8 В. тЬейа 1.оймасг 1058 5 155 48 Э - экспериментальная предлагаемая)среда; К - кантроная (Шедлер агар фирмы ЫЬсо). Примечание Составитель А,ЗавадскРедактор М.Недолуженко Техред М.Дидык рректор И.Муска Заказ 6/2 Тираж 52 одписно ВНИИПИ Государственного комитета СССГ по делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул.- Проектная жит питательный бульон, в качестве источника углерода - глюкозув качестве стимулятора роста - эритрит и тиомин-бромид при следующем коли- . чественном соотношении компонентов, г/лфПит ат ельныйбульонГлюкозаЗритритТиамин-бромид Магний сернокислыйКалий хлорнстыйАммоний хлористыйГентамицинЛизиро в анн аякровьАгар-агарВода дистиллированная