Штамм 67367 используемый в качестве тест-культуры для определения тимидина в питательных средах

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИДЛИСтИЧЕСНРЕСПУБЛИН РЕТ и Б.НИишанькин"Дону госуцаоственвательский поотиво 88. 8) ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ, СССПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЦТИ ОПИСАНИЕ ИО К АВТОРСКОМУ СВ,б 73/67 Р;испольэуемый в качестве тесткультуры для определения тщщцина в1 питательных средах,; 673/67"Г(муэей живых культур Бсесовэного НИ противочумного института фйикробф используемый в качестве тесткультуры для определениятнмндина впитательных средах.1017726йолимиксина. Образует вибрионы. Нелиэогенен.Лизируется холерным д;агностическим бактериофагом эльтор. Агглютинируется до титра видовой холернойО-сывороткой и типовой "Огава" сывороткой.факультативный аэроб.Особенностью штамма является хромосомальная мутация, обусловливающаяего зависимость от экзогенных добавоктимидина .(0,1-10 мкг/мл среды).Определение тимидина осуществля"ют как в жидких средах пробирочнымметодом в ряду стандартных растворовтимидина в пределах 0,1-10 мкг/мл,так и в плотных средах чашечным методом в ряду стандартных растворовтимидина 0,5-50 мкг/мп.П р и м е р. Определение проводятв минимальной солевой среде М,ЮаНРО, (безводного) бг, КН 2 РО 4,(безводного) Зг, ЯаС 1 0,5 г АН,С 11 г, 20-ного раствора глюкозы 20 мл,0,1 М раствора МАЗО. 10 мл, 0.01 Мраствора ЯаС 12 10 мл, дистиллированной воды до 1000 мл, рН 7,6.Готовят два параллельных ряда пробирок с последовательными десятикратными разведениями исследуемой питательной среды. Разводят до.10 ЪИнимальной средой беэ добавления тимидина,Для построения стандартной кривойроста тест-штамма два параллельныхряда пробирок заполняют 4,5 мл синтетической средой (4,5 мл) с добавлением тимидина в концентрациях100, 10, 1, 0,1 и 0,01 мкг/мл. Затемв каждую пробирку как в опытном, таки в стандартном рядах вносят по0,5 мл суспензии культуры тест-штамма. Посевы выдерживают при 37 оС в течение 24 ч,после чего производят регистрацию интенсивности роста штаммапутем измерения мутности среды с помощью нефелометра,Индикаторную, культуру предварительно инкубируют в питательном бульоне Мартена рН 7,6 в течение 18 ч сдобавлением до 10 мкг/мл тимидинаи перед началом овределения дваждыотмывают .буферои от бульона с помощью центрифугирования. Концентрациюклеток доводят до 10 вкл/мл физиологического раствора.Использование штамма позволяет определять тимидин в концентрации 0,350 мкг/мл среды.Предложенный штамм может найти применение для рЕшения вопросов бутиминового мутагенеза, выявления причингибели клеток нри бестиминовом голодании, синхронизации деления бактерий и для других целей. Изобретение относится к области микробиологии и касается штамма Ч 1 Ьго сйо 1 егае е 1 г,ог 673/67", кото.рый может быть использован для микробиологического определения тимидина в различных жидких и плотных питательных средах при исследовании качества питательных сред для диагностики холеры еЦелью изобретения является создание штамма Ч 1 Ьг 1 о сЬо 1 егае е 11 ог 10 673/67 фь"; используемого в качестве тест-культуре для определения тими- дину в питатепьных средах.Штамм получен путем воздействия супермутангеном (нитрозоизанидином ) 15 на делизогенизированный вариант Ч.е 1 Сог 673/67 с последующей селек, цией на триметопрнме. Хранится в коллекции Всесоюзного музея живых культур патогенных микроорганизмов института "Микроб" под .номером 673/67 фь"-.Штамм Ч 1 Ьг 1 о ойо 1 егае еьгог 673/67 ф"характеризуется следующими свойств;ми.Культурально-морфологические признаки. Клетки суточной культуры штамма.представляют. собой слегка изогнутые грамотрицательные палочки с уме,ренно выраженным полиморфизмом вели- ЗО чиной 1,5-2,0 х 9,3 - 0,4 мкм.Агар Мартена с добавками 10 мг/мл тимидина (рН 7,6"7,8). Через 12-16 ч вырастают округлые плоские колонии с ровным краем, прозрачные в прохо ищем и слегка голубоватые в отраженном свете.Бульон Мартена и 1-.ная пептонная вода со щелочным значением рН. Клетки штамма дают равномерное помутнение 40 с нежной пленкой на поверхности. Глюкоэо-минеральные синтетическиесреды (среда Бхаскарана и Роули М"9)рН 7,8-8,0 с добавЛением 10 Мкг/мЛтимидина. Образуются полупрозрачныеколонйи с ровными гладкими краямиразмером 1,5-2,0 мм с несколько замедленным ростом (24 ч).Физиолого-биохимические признаки.,штамм обладает оксидазной активною .тью,.ферментирует. до кислоты без гаэ а;:глюкозу в среде Хью и Лейфсона в аэ- робных и анаэробных условиях.ДекарбоксилИруют лизин.и не обла- ,дают дигидроааэой аргинина. В средах 55Гисса ферментирует сахарозу, манноэу, . маннит. Арабинозу и лактозу не сбра-,живает; Обладает диагностической активностью. Образует индол и не образует сероводород. Продуцирует ацетил-.60метилкарбинол. Не гомолитичен. Растет на среде. с добавлением 50 мкг/млВНИИПН Заказ 3481/28 Тираж 523 Подписное Р филиал 11 ПП "Патент", г.ужгород,ул.Проектная,4