Способ определения реакции больного аллергическим заболеванием на неспецифические раздражители

(50 4 А 61 В 10/00 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН КЦИИЛЕВАНИТЕЛИ к медиципреднак ции евание ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТ К А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(71) Детская городская больница Уг. Ленинграда(56) Ие 18 епз Н.Д, ес а 1 С 11 п 1 са 1а 11 егеу, 1982, 12, 6, р, 577-586,(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕ БОЛЬНОГО АЛЛЕРГИЧЕСКИМ ЗАБ НА НЕСПЕЦИФИЧЕСКИЕ РАЗДРАЖИ (57) Изобретение относится не, точнее к аллергологии, эначено для определения ре больного аллергическим заб на неспецифические раздражители. Цель изобретения - повьппение точности определения путем измерения интенсивности люминесценции лимфоцитов под влиянием мембранного зонда 3-метоксибензантрона после инкубации лимфоцитов с растворами ацетилхолина (АХ), гистамина (ГА) и физраствора (ФР). Сопоставляют число лимфоцитов, имеющих интенсивность люминесценции 0,50-1,90 от средней интенсивности люминесценции лимфоцитов в ФР, в пробах, инкубированных с АХ, ГА и ФР, и при увеличении числа лимфоцитов в пробах с АХ и ГА по сравнению с ФР на 107 и более диагностиру- сют повьппенную чувствительность больного к АХ или ГА. 1 табл.1380732 телям,Количество обследованных Подтверждение реакции на неспецифический раздра- житель БольныеаллергиБольные аллергическими задоровыеети болеваниями,ванамнезе коточескимизаболеварых есть указания ца обострение при заболеваниях при действии неспецифических раз- дражителей ниями отрицающиереакции нцеспецифические раздражители 48 26 Известныйспособ 32 (66,77) 23 (47,9 Ь) 0 6 (237,) 0 Способ-прототип Предлагаемыйспособ 46 (95,87) 0 0 Изобретение относится к медицине,а именно к аллергологии,Цель изобретения - повышение точности определения,Способ осуществляют следующимобразом.Утром натощак у больцого из вены отбирают 3 мл крови в гепарицизироцанную пробирку, Из крови вьделя Оют цимфоциты на градиенте плотностификолл-верографиц 1,077. Лимфоцитыпромывают 2 раза физраствором и2 раза раствором Хецкса путем центрифугировация при 1500 об(миц в течецие 15 миц. После последнего центрифугировация лимфоциты разбавляютсредой 199 до концентрации 1 10 кле 6ток в 1 мл, По 0,2 мл взвеси лимфоцитов разносят в три центрифужцые 20пробирки. В первую пробирку добавляют 0,05 мл физраствора (ФР), вовторую пробирку - 0,05 мл 0,0017.-ного раствора ацетилхолица (АХ) нафизрастворе, в третью пробирку 250,05 мл 0,00017-ного раствора гистамина (ГА) на физрастворе, Инкубируют все три пробирки в термостатепри 37 С в течение 30 мин, Послеокончания срока ицкубации добавляют 30во все пробирки по 2 мкл 1 И раствора 3-метоксибензантроца и измеряютинтенсивность свечения лимфоцитовво все.х пробах с помощью проточногоцитофлуориметра, Возбуждение люминесценции проводят лучами с 1 = 400460 цм, регистрируют люминесценциюце менее 10000 клеток в областиспектра 490-650 цм, Подсчитываютсреднеарифметическую интенсивностьлюминесценции лимфоцитов в пробе,ицкубированной с ФР, В пробах, инкубированцых с ФР, АХ и ГА, считаютколичество лимфоцитов, имеющих интенсивность люминесценции 0,501,90 от средней интенсивности люминесценции лимфоцитов, инкубированныхс ФР, При увеличении числа лимфоцитов с такой интенсивностью свеченияв пробах с АХ и(или ГА по сравнениюс пробой с ФР на 107. и более диагностируют повышенную чувствительностьбольного к неспецифическим раздражиСравнительная точность определения реакции больных аллергическими заболеваниями на неспецифические раздражители с помощью известных и предлагаемого способов представлена в таблице,1380732 Составитель М,ПознякТехред И.Попович Корректор М.Демчик Редактор А,Огар Заказ 1133/Ь Тираж 655 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб д, 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул, Проектная, 4 Из таблицы видно, что точность определения реакции больных аллергическими заболеваниями на неспецифические раздражители предлагаемым способом повышается в 1,5-2 раза по сравнению с известными способами,Формула изобретения 1 ОСпособ определения реакции больного аллергическим заболеванием на неспецифическне раздражители путем выделения из крови форменного элемента, инкубации его в отдельных пробах физиологическим раствором и веществами, влияющими на функции форменного элемента., с последующим введением в пробы люминесцентного красителя и определения интенсивности люминесценции, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью повыщения точности определения, в качестве форменного элемента используютлимфоциты, инкубируют их в пробах сацетилхолином (АХ) и гистамином (ГЛ),в качестве люминесцентного красителя используют З-метоксибензантрон,определяют число лимфоцнтов с интенсивностью люминесценции 0,5-1,9 отсредней интенсивности люминесценциив пробе с физраствором и при увеличении числа лимфоцитов в пробах сАХ или ГА по сравнению с контролемна 107 и более диагностируют реакциюбольного на неспецифические раздражители,