Способ дифференциальной диагностики туберкулезного менингита

(51) М. Кл. А 6 В 10/О аявкиисоединен нем Государственный комитет 23) Приоритетпублцковано 30.05,77. Бюллетеньата опубликования описания 04.07.77 Совета Министров ССС оо делам изобретений. А. Малашхия дзе еф щ 1) Заявител 4) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИ ТУБЕРКУЛЕЗНОГО МЕНИНГИТА20 Изобретение оти касается диагнингита.Известен способ дифференциальной диагностики туберкулезного менингита, включающий культивирование лимфоццтов спинномозговой жидкости в присутствии агента, вызывающего бласттрансформацию, фиксацщо, окрашивание и подсчет бластных форм лимфоцитов в культуре 111,Однако известный способ не обеспечивает точной диагностики стертых форм туберкулезного менингита от других форм серозных менингитов нетуберкулезного происхождения.Целью изобретения является уточнение этиологии заболевания.Эта цель достигается тем, что лимфоциты культивируют со специфическим ацтигеномтуберкулином в течение 3 - 6 сут и по наличию в культуре 10 - 200/о бластных форм лпмфоцитов выявляют заболевание.Способ осуществляют следующим образом.У больных менингоэнцефалитом делают люмбальную пункцию, для максимального сохранения иммунологических свойств и функциц лимфоидных клеток вытекающую каплями цереброспцнальцую жидкость через пункционную иглу с соблюдением асецтическцх условий направляют непосредственно в заранее приготовленные стерильные пробирки цз нейтрального стекла с питательной средой 199.Затем добавляют антцгец для стимуляцииц для подбора концентрации клеток - лей коццтов в игтательцой среде. Концентрациюклеток Оцрсдсг 5 ют в каждом с,учас Обычцыъ подсчетом количества лейкоцитов в цереброспцнальной жидкости. Концентрация лейкоцитов составляет от 100 до 1000 клеток в 10 1 мм. В каждую пробирку добавляют 2 мллцквора. Для стимуляции лцмфоццтов используют антпгены туберкулцца в концентрацияхх, подобранных опытным путем (в дозе 6 мкг/мл, концентрация 30 - 150 мкг/мл вызы вает чаще разрушение клеток лцквора, редкоугнетение блгсттрансформаццц), ц сухой фитогемаггмотцнин (ФГА Юе 11 соп 1 е), который разводят по инструкции непосредственно перед каждым опытом ц добавляют в культцвируемые клетки по 200 мкг/мл. Лцмфоцдные клетки цереброспцнальной жидкости культивируют в термостате прц температуре 35 - 37 С в течение 3 - 6 сут. По окончании культивирования (срок его может быть раз личным) на третьи сутки культуры лцмфоцдцых клеток, стимулированные ФГА, ц на шестые сутки культуры, стимулированные туберкулццом, цецтрцфугцруют со скоростью достаточцой для того, чтобы осадить клетки, ЗО обычно 500 об/мцц.3Из клстоного Осадка готовят:азкц на предметных стеклах, фиксируют метанолом ц Окрац 1 Вают по Романовскому - Гцмза.1 1 реп 1 р 11 тах цОдс 1 цт 11 вают трацсфор.,1 проваццыс 1 стгл на 100 - 300 лимфоцдцых клс 1 Ок ц Выра 1 жа 10 т в процентах.Проведенные иммуцологпческце исследован:1 я цереброспицальной жидкости у 30 больных с серозцым менингцпом и мецццгоэпцефалитом (пз них 1 б туберкулезного характера, 14 цстуберкулезцого происхождения вирусной и невыясненной этиологии) показали, что пз обследованных 1 б больцых туберкулезным менингитом при стимуляции культур ФГА бласттрансформация лцмфоцитов наблюдалась у 15 больных, Интенсивность реакции бласттрансформаццц колебалась от 30 до 50 цо и только в одном случае имело место угнетение трансформации лпмфоцитов. Под влиянием туберкулина у 11 больных количество трансформированных лпмфоцитов составляло 10 - 20%, у трех больных наблюдалось угнетение реакции бласттрансформации и у двух больных клетки в культуре были разрушены.У всех 14 больных с ссрозцым менингитом нетуберкулезцого происхождения при стиму 559696;1 яциц ФГА наблюдалась 1)еакцпя бласттранс.формации, интенсивность которой также, каку больных с туберкулезным менингитом,ко,сба 1 лась от 30 до 50%, в то время как под 5 цлпицпсм т)беркулпца процент трансформированных лцмфоцитов це превышал 5.Предлагаемый способ позволяет более точно дифференцировать туберкулезный менингит от других форм серозцых менингитов не туберкулезного происхождения.Формула изобретенияСпособ дифференциальной диагностики туберкулезного менингита, включающий культи вирование лимфоцитов спинномозговой жидкости в присутствии агента, вызывающего бласттрансформацию, фиксацию, окрашивацие и подсчет бластных форм лимфоцитов в культуре, отличающийся тем, что, с це лью уточнения этиологии заболевания, лимфоцпты культивируют со специфическим антигеном - туберкулином в течение 3 - б сут и по наличию в культуре 10 - 20% бластных форм лимфоцитов выявляют заболевание.25 Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:1. 1.апсе 1, 1973, 1, 319.Составитель С. Малютина Техред И. Карандашова Редактор Ю. Комаров Корректор Л. Орлова Типографии, пр. Сапунова, 2 Заказ 1394/2 Изд. М 503 Тираж 693 Подписное 11 г 1 ИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, )К, Раушскав наб., д. 4,5