Способ моделирования внелегочных туберкулезно-аллергических заболеваний

(19) ИИ 23 28 СУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРО ДЕЛДМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ ОБРЕТЕНИ ВТОРСНОМ(56) Песчанская Иное моделированиеражений глаза.за, 1973, У 12, с(54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ВНЕЛЕГНЫХ ТУБЕРКУЛЕЗНО-АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЭЛЕВАНИИ У 31научно-исследовафтиэиопульмонолоС.К.Бояркина,Салмагамбетов,.Мякотина и Н.М.По 57) Изобретени ентальной пато овышения воспр тномумикобак модели подопытному жив сенсибилиэации убитыми ми туберкулеза вводят акультуры,предваритель ой ультразвуком интенс Вт/см , амплитудой кол 5 м частотой 43-45 ост с терия той ж ботан 40-50 2, 5-3 чение тиген о обра. -вностьюбанийГц в те Н. Экспериментальтуберкулеэных по- Проблемы туберкуле 65-70. км,0 ми ОПИСАН СВИДЕТЕЛЬСТВУ относится к эксперигии и терапии. Дляэводимости и стабиль1 133236Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной патологии и терапии.Цель изобретения - повышение воспроизводимости и стабильности модели.5В качестве разрешающего фактора используют антиген, приготовленный из убитых автоклавированием микобактерий туберкулеза, обработанных ультразвуком в течение 5-10 мин при интенсивности 40 - 50 Вт/см , частоте243 - 45 кГц, амплитуде колебаний 2,5 - 3,5 мкм в непрерывном режиме.П р и м е р 1. Воспроизведение туберкулезно-аллергического пораженияглаз.Готовят взвесь убитой автоклавированием культуры микобактерий туберку 2 п леэа иэ расчета 1 мг культуры на 1 мл физиологического раствора.10 мл этой взвеси, наливают в пробирку диаметром 15 мм,которую помещают в стеклянный стакан емкостью 500 мл, 25 наполненный холодной водопроводной водой. Проводят озвучивание взвеси убитых микобактерий туберкулеза в течение 5 мин интенсивностью 50 Вт/см, амплитудой колебаний 3,5 мкм, на частоте 45 кГц в непрерывном режиме. При нагревании водопроводной воды в стакане с пробиркой в процессе озвучивания производят ее замену.Всю процедуру приготовления антигена проводят с соблюдением правил асептики во избежание инфицирования взвеси. Подопытного кролика породы шиншилла серой масти массой 3 кг через 2 мес после сенсибилиза 40 ции убитыми микобактериями туберкулеза фиксируют к станку в положении на животе. С целью обезболивания вводят 3,0 мл 17-ного раствора промедола. В правый глаз закапывают 1 Х 45 ный Раствор дикаина с добавлением 0,1 Х-ного раствора адреналина.Ретробульбарно в область правого глаза вводят 3,0 мл 0,257,-ного раствора ноковаина.Оперируемый глаз обкладывают стерильными салфетками, которые фиксиБО руют эа края век. В шприц набирают приготовленный антиген, обработанныйультразвуком и эмульгированный вфизиологическом растворе, в количестве 1 мл, Верхнее веко поднимают ве 55коподъемником, глазное яблоко фиксируют пинцетом за верхнюю прямую мьппцу. Тонкой иглой, насаженной на 2 2шприц, прокалывают роговую оболочку правого глаза в верхней ее части, у лимба.Медленно без усилий вводят в переднюю камеру глаза антиген в количестве 0,1 мг 0,1 мл взвеси убитых и обработанных ультразвуком микобактерий туберкулеза). Иглу извлекают,глаз промывают .47-ным раствором борной кислоты.Через 5 дн в тканях правого глаза развился воспалительный процесс с экссудацией и отеком. Через 3 мес после введения разрушающей дозы анти- гена отмечалось помутнение прозрачных сред глаза с полной потерей зрения, В последующие периоды наблюдалось хроническое течение процесса. Через б мес после. введения разрешающей дозы антигена кролик выведен из опыта. При гистологических исследованиях обнаружены: инфильтрация роговицы клеточными элементами, скопление в ткани радужной оболочки лимфоидных клеток ввиде небольших узелков без выраженных грануляционно-некротических изменений, скопление в передней камере глаза жидкого экссудата с большим количеством эротроцитов,отек тканей радужной оболочки, разволокнение стромы роговицы.Таким образом, у животного удалось получить туберкулезно-аллергическое поражение глаза в чистом виде без каких-либо признаков специфического туберкулезного воспаления.П р и м е р 2. Воспроизведение ту- беркулезно-аллергического поражениясиновиальной оболочки коленного сустава.Готовят взвесь убитой автоклавированием культуры микобактерий туберкулеза иэ расчета 1 мг культуры на 1 мл физиологического раствора.10 мл этой взвеси наливают в пробирку диаметром 15 мм, которую помещают в стеклянный стакан емкостью 500 мл, наполненный холодной водопроводной водой. Проводят озвучивание взвеси убитых микобактерий туберкулеза в течение 10 минут интенсивностью 40 Вт/См , амплитудой колебаний 2,5 мкм, на чатоте 43 кГц в непрерывном режиме. При нагревании водопроводной воды в стакане с пробиркой в процессе озвучивания производят ее замену, Всю процедуру приготовления24гобласти коленного сустава. Острыевоспалительные изменения в области Таким образом, у кролика было получено туберкулезно-аллергическое поражение синовиальной оболочки коленного сустава в чистом виде беэ каких-либо признаков специфического туберкулезного воспаления,. формула изобретения Составитель М.ПознякТехред М.Дидык ; Корректор С.щекмар Редактор В,Петраш Заказ 3837/47 Тираж 433ВНИИПИ Государственного комитета по делам изобретений и открытий113035,Москва, Ж,Раушская наб., д 4/5 ПодписноеСССР Производственно"полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул . Проектная, 4 3 133236 антигена проводят с соблюдением правил асептики во избежание инфицирования взвеси. Подопытного кролика породы шиншилла серой масти массой 3,5 кг через 2 мес после сенсибили 3зации фиксируют к станку в положении на спине.Выстригают шерсть в области правого коленного сустава. С целью обезболивания операции вводят 10 )внутримышечно 3,5 мл 1 Х-ного раствора промедола.Кожу коленного сустава дважды обрабатывают 1/-ным раствором иодоната. Операционное поле обкладывают стерильными салфетками. 15 В шприц набирают приготовленную заранее взвесь антигена в физиологическом растворе в количестве 1 мл. Иглой,насаженнойна шприц, прокалывают кожу, в точке на 5 мм выше места 20 прикрепления связки надколенника к гребню большеберцовой кости по средней линии. Связку надколенника прокалывают с таким расчетом, чтобы нанчик иглы находился в толще кры Б ловидной складки синовиальной оболочки, но не проникал в полость сустава. Взвесь антигена в количестве 0,15 мг (О, 15 мл взвеси убитых мико-. бактерий туберкулеза, обработанных 30 ультразвуком) вводят в ткань синовиальной оболочки, При этом контролируют правильность положения острия иглы. При правильном положении иглы для инъекции требуется приложить некоторое усилие, при неправильном (проникновение в полость сустава) содержимое шприца вытекает свободно, а при снятии шприца с иглы через нее выделяется синовиальная жидкость. 40 ,По окончании введения антигена иглу извлекают резким движением, место инъекции смазывают иодом.Через 6 дн. после введения разрешающей дозы антигена в толщу синовиальной оболочки появилась болезнен-. ность, утолщение сустава в попереч- нике до 28 мм,местное повышение темапературы до 37,3 С и гиперемия в пораженного сустава стихли через 2 мес и процесс приобрел хроническое течение. До 1 г. после введения разрешающей дозы антигена увеличение4 размера сустава сохранялось, развились деформирующие изменения и контрактура пораженного сустава до 80. Через 1 г. после введения разрешаю-, щей дозы антигена кролик выведен иэ опыта. При гистологических исследованиях определяются признаки хронического аллергического синовита сГвыпотом,имеющим фибринозно-геморрагический характер, обнаруживаются лимфоидно-клеточные узелки и участки периваскулярной гистиолимфоцитарной инфильтрации. Обнаружено разрастание фиброэной ткани,а также разрушение хрящевой и костной тканей суставнык поверхностей с развитием деформирующего артроза. Способ моделирования внелегочных туберкулезно-аллергических заболеваний путем иммунизации специфическим антигеном из убитой культуры микобактерий туберкулеза, о т л ич аю щ и й с я тем,что, с целью повышения воспроизводимости и стабиль ности модели, животному после имму, низации местно в ткани, обладающие повышенной чувствительностью,вводят антиген тойже культуры,предварительно обработанной ультразвуком интенсивностью 40-50 Вт/см , амплитудоййколебаний 2,5-3,5 мкм, частотой 43-45 кГц в течение 5-10 мин.