Способ определения концентрации акрилонитрила

1Изобретение относится к медицине,а именно к проФпатологии,Цель изобретения - повьппение чувствительности и точности способа.Способ осуществляют следующим образом,Готовят раствор, содержащий препар ат люциЬеразы (содержание люциАераэы 1,55-4,5 мкг/мп), альдегид икислород, Определяемый ингибитор,растворенный в зтаноле, вносят в реакционную смесь (конечная концентрация этанола в реакционной смеси0,58-0,65%) . При добавлении к этомураствору восстановленного Ьлавинмононуклеотида (ФМНН ) регистрируют вспышку света и измеряют максимальную интенсивность свечения 3 .Измеряя максимальную интенсивностьсвечения 3 для заведомо известныхконцентраций определяемого вещества,строят калибровочную кривую, по осиаЬцисс которой откладывают концентрации акрилонитрила, а по оси ординат -нДалее, измеряя 3, и сравнивая еес калибровочной кривой, определяютконцентрацию акрилонитрила в воздухе,П р и м е р. Для определения концентрации акрилонитрила строят калибровочную кривую. Для этого готовят. раствор, содержащий 50 мкл0,00057.-ного миристинового альдегида, 20 мкл препарата люцийеразы(1,4 мкг), 5 мкл этанола и 200 мкл0,1 М Аосйатного буФера, рН /О,Свечение начинается при добавлении кэтому раствору 500 мкл ФМНН (6 хх 10 п М).3 в реакционыой смеси без вещества 100 отн.ед, Ошибка измерения2-3%, Растворенный в этаноле акрилонитрил вносят в реакционную смесьперед добавлением ФМНН.При внесении в реакционную смесь10;20;30;50;80 и 100 мг/л акрилонитрила 3 равно 84,4; 64,9; 558; 41,5;22,1; 13 отн,ед. соответственно. Поэтим данным строят калибровочную кривую, При анализе неизвестных количеств акрилонитрила вещество концентрируют из воздуха путем его барботи -рования через 5 мп этанола со скоростью 35 мэ/ч, в течение 5, 15,45 мин. ) при добавлении 5 мкл этихрастворов акрилонитрила 66,4; 34,2;24, отн.ед. При сравнении измеренных величин с калибровочной кривой70658 40 45 50 55 10 15 20 25 30 получают соответственно 19;60;78 мг/л, что соответствует 17,6;3,07, 0,74 мг/м акрилонитрила,В табл, 1 приведены примеры реализации способа при разном содержании люцифераэы в реакционной смеси,Иэ табл. 1 видно, что при уменьшении содержания люциЬеразы, увеличивается чувствительность способа,Однако, при уменьшении количества люциАеразы ниже 1,2 мкг, уменьшаетсяточность анализа, поэтому оптимальным для способа является интервал1,2-3,5 мкг люцийеразы (1,554,5 мкг/мл),В таЬл,2 приведены примеры реализации способа при разном содержанииэтанола в реакционной смеси, Чувствительность способа практически не изменяется при варьировании количестваэтанола в реакционной смеси от 4,5до 5 мкл. Однако, при добавлении этанола меньше 4,5 мкл, увеличиваетсяошибка измерения, К тому же этанол вколичестве больше 5 мкл изменяет величину максимальной интенсивностисвечения, при этом уменьшается чувствительность анализа. Поэтому оптимальными для способа являются 4,55 мкл этанола 0,58-0,657,Высокая точность определения акрилонитрила обеспечивается его растворением в этаноле,Точность измерения в предлагаемомспособе + 2-37, а в известном спосо -бе +26,27, т,е, точность измеренийувеличивается почти в 1 О раз,Формул а изобретения Способ определения концентрации акрилонитрила путем добавления пробы с акрилонитрилом в реакционную смесь, содержащую альдегид, восстановленппй :"лавинмононуклеотид и люциФеразу, с последующим измерением максимальной интенсивности свечения, величина которой обратно-пропорциональна концентрации акрилонитрила, о т л и ч ающий ся тем, что, с целью повьппения чувствительности и точности способа, содержание люциФеразы составляет 1,55-4,5 мкг/ьы, олредез 1 яемое вещество концентрируют барботированием через этанол, а в реакционную смесь дополнительно водят в конечной концентрации 0,58-0,65%.3 12 7658 4Таблица 1 Чувствительность и точность анализа акрилонитрила в зависимости ат концентрации люциферазы, Концентрация этанола Фиксирована -0,657 Количе 0,7 0,9+2,4 221 2,7 317,4 411,1 9,0 2,2 14 18 Таблиц а 2 Чувствительность и точность анализа акрилонитрила в зависимости от количества этанола. Концентрация люциеразы 1,Я мкг/мп. КонцентКоличестОшибка,во зтанолав пробе,мкл я этаола, Е 0,5 0