Способ определения ретинола ацетата пальмитата в мазях

(54)(57)АЦЕТАТА (хроматогррования о ПОСОБ ОПРЕДЕПАЛЬИИТАТА) Вфии на окисианическимиего спектрафиолетовойч а ю щ ию повышения и последующия в ульт чу ательл и токси и точности ределени пд с 11 ев 1- Ы., ес 1 а),СОЮЗ СО 8 ЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК ОСУДАРСТВЕННЬЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТЮ ПИСАНИЕ ИЗ ТОРСИОЬГФ СВИДЕТЕЛЬСТ(56) ТЬе апа 1 уэ 1 з о 1 теузса 1 э (Ечегя М. апй БппСЬ.1.опс 1 опэ 1955 ю р.277. маэь в циклогексане,проводят ацетонитрило ЛЕНИЯ РЕТИНОЛАМАЗЯХ путемалюминия, элюи растворителями офотометрироваобласти спектй с я тем,селективностирастворяют.элюирование3 или 2 2 ГО 1032 В(нспр/528 " 28 /испр/ст ности ис пытуемогорастворапри Л328 нм;оптичесВ 2 В ст 52 В( ислр/ст/ ст кие плотности раствора стандартного образца при Л328 нм; содержание ретинола вв 1 мл растворастандартного об 1 1151Изобретение относится к анализуорганических химических соединенийи может быть использовано для определения ретинола ацетата (пульмитата)в мазях, в состав которых входят ингредиенты, также поглощающие в Уф 5области спектра (фурацилин, левомицетин, ланолин безводный).Цель изобретения - повышение селективности и точности определения.П р и м е р. Исследовали мазь состава:Фурацилина, г 0,1Левомицетина, г 2Ретинола ацетата(пальмитата), ИЕ 1000000Ланолина безводного, г До 100Около 1,25 г (точная масса) препарата взбалтывают с 10-15 мл циклогек 20сана до полного растворения мазевойосновы и количественно переносят вмерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают. 1 мпполученного раствора переносят в колонку с окисью алюминия для хроматографии. После погружения раствора всорбент элюируют ретинол ацетонитрилом до получения 25 мл элюата. Слойацетонитрила над окисью алюминия должен быть не менее 0,5-1 см. Хроматографирование ведут под вакуумом, обеспечивающим .скорость истечения элюата,50-70 капель в минуту.Измеряют оптическую плотность полученного элюата на спектрофотометрепри длинах волн 316, 328 и 340 нм вкювете с толщиной слоя 10 мм.В качестве раствора сравнения применяют раствор, полученный в контроль ном опыте, при проведении которогоиспользуют мазь, содержащую все сопутствующие ингредиенты (кроме ретинола) и взятую в такой же навеске.Параллельно проводят хроматографи рование и все последующие операцйи,используя 1 мл раствора стандартного образца ретинола, содержащий1 О ИЕ в 1 мл элюата.В качестве раствора сравнения 50применяют ацетонитрил,Вычисляют оптическую плотностьраствора стандартного образца РЗ 2 В(испр 1с поправкой на светопоглощение сопутствующих соединений по следующему уравнению: В:552/2 Р - 2 - 2, (( 32/испр/32 Вст 31 Ьст Ност/ 881 1где РВ 2 В ст, т РВ 1 ь ст и Р ес сттические плотности раствора стандартного образца при Л 316, 328 и 340 нм.Если Р (/ст/ не отличаетсяот Р , более чем на + 57., то припоследующем расчете содержания ретинола в мази используют значениеР 32 ВстИсходя из величин оптической плотности, полученных при исследованиииспытуемого образца, рассчитываютоптическую плотность испытуемогораствора с поправкой на сопутствующие соединения Р ( по уравнению (1).Если РВ 2 В(испр/ не отличается отРВ 2 В более чем на 153, то при расче те содержания ретинола в мази используют значение Р 2 В, если же отличаетСЯТО ИСПОЛЪЭУЮт ЗиаЧЕНИЕ ПВ 2 В(с/.Содержание ретинола в ИЕ рассчитнвают по формуле: 1Где РВ 2 Вили Р у 2 ( р) опт ические плотразца вИЕ;50 - разведение, мл;а - масса препарата, г,Результаты количественного опре деления витамина А в мази, содержащей фурацилина 0,1 г, левомицетинаОбразец Оптическая плотность Найдено в 1 млциклогексана Навеска мази, г Содержание виМетроло- гические таминаА в1 мл характе- ристики ПйтВ Пэн ЗИ(испр 1 циклогексана, МЕ 1 1,25 О 250,.20 0,366 0,435 0,362 0,500 247,00 98,73 8=3,438=1,54 2 1,2585 251,70 0,430 0,495 0,420 0,493 243,57 96,77 3 1 э 2500 250 э 00 Оф 370 Ов 440 Оф 365 Оэ 510 250 э 20 1 ООэ 08 Ях 1 =428м 1 р ф 41,2525 250,50 0,363 0,430 0,360 0,482 238, 15 95,07 А= +4,38 1,2510 250,20 0,530 0,565 0,465 0,493 243,77 9,43 ф При содержании витамина А 10 МЕ в 1 мл элюата 0=0,505 (среднее пя 226(испр)ти определений). Составитель Н.ГуляеваРедактор Р.Цицика Техред С,Мигунова Корректор А. Зимокосов Заказ 2313/33 Тираж 897 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП "Патент", г.Ужгород, ул.Проектная, 4ж -1 3 11518 2,0 витамина А 1000000 МЕ, ланолина безводного до 100,0 представлены в таблице.Для хроматографии используют ацетонитрил х,ч. по ТУ 6-09-4326-76 или ч по ТУ 6-09-3534-82 (при использовании ацетонитрила ч проверяют его оптическую плотность относительно воды на спектрофотометре при длинах воля 316, 328 и 340 нм; оптическая плотность не должна превышать 0,02). Используют также. циклогексан х.ч. (ТУ 6-09-10-592-76).Раствор стандартного образца ретинола ацетата пальмитата) в масле 100000 ИЕ в 1 мл (фактическое содержание ретинола в препарате устанавливают по Гф Х, ст. 579) растворяют в циклогексане таким образом, чтобы получить раствор, содержащий 250 МЕ ретинола в 1 мл, Раствор пригоден в 81 4течение 30 дн. при хранении в защищенном от света месте при температуре не выше 10 С,Окись алюминия для хроматографии (ТУ 6-09-3916-75) нагревают 4 ч при 400 охлаждают в эксикаторе, с хлористым кальцием безводным, добавляют 107 воды, встряхивают в банке с .притертой пробкой в течение 10 мин и оставляют на 10 ч.Приготовление колонки с окисью алюминия: в колонку с внутреняим диаметром 10 мм, снабженную стеклянным краном, помещают тампон иэ стеклянной ваты, всыпают 8 г окиси алюминия, поверх сорбента помещают тампон изстеклянной ваты, затем смачивают окись алюминия ацетонитрилом и вводят в колонку еще 2-3 мл ацетонитрила; первые 2 мл фильтрата отбрасывают.