Способ извлечения иммуноглобулинов из биологических жидкостей

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТ ИЧЕСНИХРЕСПУБЛИН 9 г гг 9 А 33/50//А 61 К. 47/00 ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН У 40А.Ф. Елинек,Сергиенкоий ордена Ленинаицинский инстит ффинная хрома 1980, с; 289.Молоденков М.Н.,дицина", 1978,ю ственнцй комитет сссРлАм изОБРетениЙ и ОтнРь 1 тий АВТОРСКОМУ СВИД(56) 1, Туркова Я.тография. М "Мир"2. Лопухин Ю,М.,Гемосорбция. М., "Мс. 31-34, 139-141,(54)(57) СПОСОБ ИЗВЛЕЧЕНИЯ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ ИЗ БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЕЙ путем их пропускания через. сорбенты, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повьппения избирательности и эффективности сорбции иммуноглобулинов, в качестве сорбента используют макропористый сополимер стирота и дивинилбензола, содержащий группы несимметричных диметилэтилен-бисаммониевых оснований следующей структуры;ФИзобретение относится к медицине, а именно, к сорбционным процессам извлечения токсичных компонентов (иммуноглобулинов) из крови и других биологических жидкостей. 5Использование способа основано на томр что в крови бОльных с аутоиммунными заболеваниями повьппается концентрация иммуноглобулинов, ссо" бенно иммуноглобулинов класса 4 . 1 ОИзвестен способ извлечения иммуно глобулинов из сыворотки крови чело- веха с помощью иммобилизованного на сефарозе ЧВ белка А из ЯьарЬу 1 оСОССчэ аОГЕПЗ И, 15Недостатками указанного способа являются сложность получения сорбента, невозможность извлечения с его помощью различчых иммуноглобулинов (сорбируется только 3 Г 6, но не 3 и 20 3 Г,1), а также неудовлетворительные характеристики сорбента при проведении гемосорбции (низкая механическая прочность, неустойчивость к действию микроорганизмов, сложность 25 стерилизации).Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому положительному эффекту является способ извлечения иммуноглобу- зО линов из биологических жидкостей путем их пропускания через сорбентактивированный уголь Г 2Недостатками известного способа являются низкая избирательность35 сорбции иммуноглобулинов (около 17, от общего количества адсорбированного белка) и малая емкость углей в отношении иммуноглобулинов.Цель изобретения - повышение избирательности и эффективности сорбции иммуноглобулинов.Поставленная цель достигается согласно способу извлечения иммуноглобулинов из биологических жидкостей путем их проускания через сорбент, причем в качестве сорбента используют макропористый сополимер стирола и дивинилбензола, содержа-. щий группы несимметричных диветилэтилен-бис-аммониевых оснований следующей структуры:Сущность изобретения заключаетсяв использовании указанного вьппе специфического сорбента, отличительными характеристиками которого является макропористость и наличиегрупп несимметричных диметилэтипенбис-аммониевых оснований. Полученный сорбент обладает пригодными длягемосорбции свойствами и в то жевремя эффективно и иэбирательно сорбирует иммуноглобулины,П р и м е р 1, 1 г макропористого сополимера стирала и дивинилбензола (в расчете на сухой вес,),содержание дивинилбенэола 157, сгруппами несимметричных диметилэтилен-бис-аммониевых оснований заливают 5 мл сыворотки донорскойокрови, выдерживают при 36 С и перемешивании в течение 2 ч. Затем сорбент отделяют, промывают Физиологическим раствором и проводят элюирование сорбированных белков с последующим иммунохимическим анализом.Емкость сорбента по белкам (на 1 г)составляет, мг/г: общий белок 8,2,иммуноглобулин (1 1,92, иммуноглобулин М 0,08, иммуноглобулин А 0,64.Доля иммуноглобулинов от всего сорбированного белка составляет 327.П р и м е р 2. 1,8 г макропористого сополимера стирола и дивинилбензола (содержание дивинилбенэола15 мас.7) с группами несимметричныхдиметилэтилен-бис-амиониевьгл оснований загружают в колонку объемом5 мл и перфузируют через нее лимфучеловека со скоростью 0,5 мл/мин втечение 20 мин. Затем сорбент промывают физиологическим раствором ипроводят элюирование сорбированныхбелков с последующим анализом, Емкость сорбента составляет: по общему белку 5,9 мг/г по иммуноглобулину Й 1,64 мг/г, Доля иммуноглобулина Я от всего сорбированногобелка составляет 287.П р и м е р 3. 1,8 г макропористого сополимера стирола и дивинилбензола (содержание дининилбензола 15 мас.Ж) с группами несимметричных диметилэтилен-бис-аммониевых основайий загружают в колонку объемом 5 мл и перфузируют через нее нативную человеческую кровь со скоростью 0,3 мл/мин в течение 30 мин, Затем сорбент промывают Физиологическим раствором и проводят элюирование сорбированных белков с последующим анализом. Емеость сорбента составляет:121619 Емкость, мг/г, по белкам Доля иммуноглобулинов, 7 отвсего сорбированного белка Сорбент общему иммуноглобулинам А с / м Известный активныйуголь "ИГИ") 6,2 0,04 0,01 0,8 Предложенныйпо примеру 1 8,2 1,92 0,08 0,64 32 Составитель В. Муронец Редактор К. Волощук Техред Т.Маточка Корректор М. ЛеонтюкЗаказ 7974/35 Тираж 822 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 3 1 по общему белку 10,1 мг/г, по иммуноглобулину Я 2,08 мг/г, по иммуно глобулину М 0,08 мг/г, по иммучоглобулину А. 0,72 мг/г. Доля иммуноглобулинов от всего сорбированного белка составляет 287.Сравнение результатов, полученнйх по известному и предлагаемому способам, дано в таблице.Таким образом, использование предлагаемого способа извлечения иммуно- глобулинов из биологических жидкостей по сравнению с известным обеспечивает уменьшение общего количества извлекаемых из биологических жидкостей белков в результате большей избирательности сорбции иммуноглобулинов, возможность достижения .необходимой степени очистки биологических жидкостей от иммуноглобулинов при использовании небольших ко О лонок вследствие увеличения емкостисорбента; возможность извлечения иммуноглобулинов всех классов.