Способ количественного определения налидиксовой кислоты

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 1) С 01 И 21/64,ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН Ь д ЕПЬСТВУ К АВТОРСКОМУГОСУДАРСТ 8 ЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(56) 2Мощковский М.Д. Лекарствен-ные средства. ч. 11, М., "Медицина"1977, с. 241-242,2. КццйС Н,К.Ь., Ваг 1 ом Е.С, ТЬ 1 пЬауег СЬгошаСо 8 гарЬ 1 с МеСЬоц аког СЬеЯцапССаСче Апа 1 чвв оГ Иа 1161 х 1 сАсй 1 п Кцшап Р 1 авш. - "СЬгошаСог,В 1 ошей, Арр 1", 1981, ч, 223 р 1 1 рр. 165-172.3. Сц 1 впацй 1., Реггу И., Зессга М., Вегпагй М., Ваввагц 1. ВеСегш 1 паСоп оГ Иа 161 х 1 с Ас 16 апй 1 СвТчо Ма)ог МеСаЬо 1 з.Сев 1 п Нцшап Р 1 агша апй Нг 1 пе Ьу Вечегвей-ржаве-Ь 18 ЬрегГогшапсе Ысц 16 СЬгошаСоягарЬу,СЬгошаСо 8 г , 1970, ч,181, 1 3-4,р, 394-406,4, Зубенко В,Г., Щерба И.А, Уфспектрофотоме.типический метод анализаналидиксовой кислоты. - ффармацевтический журнал", 1975, 1 3, с, 28.5, ГаФари А.В., Туркевич М.М.и Рудый Р.В. Определение налидиксовой кислоты в жидкостях и тканяхорганизма и лекарственных Формах.(54)(57) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ НАЛИДИКСОВОИ КИСЛО 1 Ы, включающий приготовление анализируемойпробы, взаимодействие ее с химическим реагентом и измерение спектра,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что,с целью снижения предела обнаруженияналидиксовой кислоты, анализируемуюпробу подвергают взаимодействию состандартным раствором хлорида тербияпри рН среды 6,5-7,0 с последующимизмерением интенсивности полос спект-.ра сенсибилиэированной люминесценции тербия, по которой определяютконцентрацию налидиксовой кислоты.Изобретение относится к аналитической химии а именно к способам количественного люминесцентного определения налидиксовой кислоты - 1-зтил-метил-он,8-нафтиридин- -3-карбоновой кислоты.В СССР препарат импортируется иэ Венгрии и Югославии под названиями "Невиграмон" и "Неграм" соответственно, и широко используется как антибактерКльное средство в частности, при инфекциях мочевых путей (циститы, пизлиты), а также для профилактики инфекций при оперцих на почках 11.Известно несколько способов количественного определения налидиксовой кислоты в лекарственных формах и биологических жидкостях: хроматография в тонком слое на пластинах с силикагелем и люминесцентная индикация2 1, жидкостная хроматография под высоким давлением на колонках с обращенными фазами (33. Известен также стектрофотометри"ческий способ определения налидиксовой кислоты в чистых препаратах 4 .Недостатки указанных способовсложное аппаратурное оформление,длительность выполнения и невысокаячувствительность определения.Наиболее близким к предлагаемомуявляется способ количественногоопределения налидиксовой кислоты вжидкостях, тканях организма и лекарственных формам, включающий приготовление анализируемой пробы, взаимодействие ее с химическим реагентом и измерение спектра 5 3,Так, в частности, в ряде биологических объектов проводят осаждениебелков вольфрамтом натрия в присутствии НЯО, зкстракцию нлидиксовойкислоты метанолом и спектрофотометрическое определение ее по собственной полосе поглощения с Лс,д= 255либо 327 нм.Недостатки указанного способаневысокая чувствительность определения, необходимость работы в ультрафиолетовой области спектра, гдевозможно наложение спектров многихорганических веществ,Цель изобретения - снижение предела обнаружения нлидиксовой кислоты.Поставленная цель достигается тем,что согласно способу количественногоопределения налидиксовой кислоты,включающему приготовление анализируемой пробы, взаимодействие ее с химическим реагентом и измерение интенсивности спектра, анализируемую пробу подвергают взаимодействию со стандартным раствором хлорида тербия прирН среды 6,5 - 7,0 с последующимизмерением интенсивности полос спектра сенсибилиэированной люминесценции тербия, по которой определЯютконцентрацию налидиксовой кислоты.Сенсибилизация люминесценции тербия в его соединении с налидиксо вой кислотой, обусловленная поглощением света органической частью молекулы и передачей энергии возбужденного состояния ионам тербия, приводит к понижению предела обнаружения 10 налидиксовой кислоты на порядок величины по сравнению с прототипомпри одновременном сохранении зкспрессности и простоты определенияСпособ осуществляют следующим 15 образомК анализируемому раствору добавляют стандартный раствор хлорида тербия, создают в растворе нейтральнуюсреду (рН 6,5-7,0) с помощью уротропина, регистрируют интенсивностьлюминесценции при Ь= 546 нм.Содержание нлидиксовой кислоты впробе определяют по калибровочномуграфику либо по Методу добавок.При определении налидиксовой кислоты в биологических жидкостях и тканях организма выделение налидиксовойкислоты осуществляется методом, описанным в ).5 3.П р и м е р, Количественное опре- ЗО деление нлидиксовой кислоты в лекарственныхформах ("Невиграмон"),Точную навеску препарата "Неви-грмон" растворяют в мерной колбев 0,1 н,БаОН, нагревая н водяной 35 бане.Для получения стандартного раствора хлорида тербия (1 мг/мл) точную нвеску оксида тербия растворяютв соляной кислоте, выпаривают до 40 получения остатка влажных солей иразбавляют дистиллированной водой.В пробирку помещают 0,1 мл исследуемого раствора с содержаниемналидиксовой кислоты 0,1-0,01 мну/мп,приливают 0,2 мл стандартного раствора. хлорид тербия, содержащего1 мг/мл тьс 1 з, 0,6 мл 40-ного раствора уротропин, и доводят объемдо 10 мл водой.Спектры люминесценции регистрируют с помощью спектрографа ИСП или другого спектрофлуориметра приЛ = 546 нм. Люминесценцию возбуждают излучением ртутной лампыСВДА со светофильтром УФС.55 Растворы комплексов устойчивы вовремени и способны сохранять люминесцентные свойств в течение нескольких часов, Содержание налидиксовой кислоты определяют по клибро вочному графику. Определение возможно проводить и по методу добавок.По величине пиков люминесценции растворов пробы и пробы .с добавкамирассчитывают содержание налидиксовой кислоты в пробе.1038841 При малых содержаниях налидикбовой кислоты необходимо регистрировать,интенсивность люминесценции холостогоопыта и вычитать ее из интенсивности люминесценции пробы.Предел обнаружения налидиксовой 5кислоты равен 0,01 мкг/мл,Точность и достоверность способабыли проверены в лабораторных услоОпределение напидиксовой кислоты в препаратеВведено, Найдено, Я 1мкг мкги 0,0012 0,04+0,0015 0,002 0,10+0,0025 0,012 0,50+0,015 0,01 б 0,900,020 3,7 2,5 3,0 2,2 Составитель Н.ВоровРедактор А. Мотыль Техред В,далекоэей Корректор И. Ватрушкина Зяказ 6221/50 Тираж 873 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП фПатентфу г, ужгород, ул. Проектная, 4т 0,04 0,10 0,50 0,90 0,.041О,+О0,490,88 виях путем статической обработки результатов анализа. препарата "Невиграмон" (см. таблицу). Предлагаемый способ позвсщяет по сравнению с прртотипом понизить предел обнаружения налидиксоэой кислоты на порядок величины, составляя 0,01 мкг/мл.