Средство для окраски катионного белка на гистологическом препарате

, РЕСПУБЛИК е св 1/28 э ГОСУДАРСТВЕН ПО ДЕЛАМ ИЗОБ КОМИТЕТ ССС ТЕНИЙ И ОТКРЫТИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН ЦЕТЕЛЬСТВ В 1 0:0 М(71) Ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский институт экспериментальноймедицины АИНСССРи Всесоюзный научно-исследовательский ветеринарный институт птицеводства(53 ) 61 5 475 1 088. 8 )56) 1. Авторское свидетельство СССРИ 552538, кл. С, 01 й 1/30,28,04.772 Пигаревский В.Е, Лиэосомальнокатионный тест и перспективы егоприменения в патоморфологическойи лабораторной диагностической практике. - "Архив патологии", 1979,41, 5, 74 -80. 1 54) (57) СРЕДСТВО ДЛЯ ОКРАСКИ КАТИОННО 10 БЕЛКА НА ГИСТОЛОГИЧЕСКОИ ПРЕПАРАТЕ, содержащее спирт, пигмент зеленый прочный и буфер, о т л и ч а ю,щ е е с я тем, что, с целью повышения специфичности окраски оно дополнительно содержит эозин и Формальдегид, а в качестве спирта - этиловый . спирт и в качестве буфера - 0,12- 0,15 И боратный буфер при следующем соотношении компонентов, вес.3:Пигмент зеленыйпрочный 0Этиловый спирт 40Эоэин 0Формальдегид 10,12-0,15 ИБоратный буфер Остальноерия,П р и м е р 2. Состав красителя, г.Пигмент зеленыйпрочный 0,2Этанол 70,0Эозин О, 15Формальдегид 2,00,15 И боратный буфер 24,67.В 14 мл дистиллированной водырастворяют 750 мл борной кислоты,затем добавляют 6,25 мл 1 М МаОН,Приливают 5 мл 1 М НСВ, 73 мл 96 эти"лового спирта и 2 мл формальдегида.50 В полученной смеси растворяют сначала 20 мг пигмента зеленого прочногоа затем 100 мг эозина, Смесь тщательно перемешивают. 45 55 В препаратах, окрашенных предлага.мым красителем, гранулы нейтрофилов и эозинофилов, содержащих катионные белки, окрашиваются в темно-зеленый 10275Изобретение относится к медицине,а именно к цитохимическим исследованиям, и предназначено для лабораторного определения уровня содержаниякатионных белков в крови, как показателя неспецифической реэистентности организма.Известно средство для окраскикатионного белка 11,содержащее0,13 раствор примулинового желтого 10в 0,05 Иборатномбуфере при рН= 8,2.Однако известное средство не позволяет идентифицировать кагионныебелки в клетке при световой микроскопии, так как краситель относитсяк флюорохромам и при люминисценциивызывает свечение всех белков вклетке,Известно также средство 2 для окраски катионных белков на гистологическом препарате путем их обработкив красителе, содержащем 0,23 пигмент зеленый прочный, 50 метанол на0,05 М трис НСР буФере при рНй 8,18,2.25Недостатком является то, цто средство также не обладает высокой специфичностью к катионным белкам и неспецифически окрашивает также эритроциты крови.30.Цель изобретения - повышение специфичности окраски.Поставленная цель достигается тем,что средство дополнительно содержитэозин и формальдегид, а в качествеспирта - этиловыи спирт и в качествею35буфера 0,12-0,15 И боратный буферпри следующем соотношении компонентов, вес.Ф:Пигмент зеленыйпрочный 0,1-0,2Этиловый спирт 40,0-70,0Эозин 0,1-0, 15Формальдегид 1,0-2,0О, 12-0,15 ИБоратный буфер ОстальноеДополнительное введение в краситель эозина позволяет провести болечеткую окраску гранул в клетках, содержащих катионные белки за счетпрокрашивания их в темного оттенка,цвета, что усиливает их контрастносот окружающих структур, В то же время введение в краситель формальдегида позволяет исключить неспецифическую окраску эритроцитов за счетодновременной фиксации препарата вмомент проведения скрашивания. Свойства компонентов в красителе наиболее 69 ъмаксимально выражены в растворе 0,12- 0)15 И боратного буфера при рН = = 8,1-8;2.Средство для окраски катионных белков приготавливают следующим образом.К боратному буферу добавляют этиловый спирт и формальдегид затем в полученной смеси растворяют пигмент зеленый прочный и эозин, Смесь тщательно перемешивают и через 2 ч определяют рН красителя, которое тестируется до нужного знацения рН соляной кислотой или гидратом окиси натП р и м е р 1 , Состав красителя,Пигмент зеленыйпрочный 0,1Этанол 41,5Эозин 0,1Формальдегид 4;00,12 И боратный буФер 54 3В 43,5 мл дистиллированной воды растворяют 750 мл боратной кислоты, затем добавляют 6,25 мл 1 М МаОН, Приливают 5 мл 1 МНСт добавляют 41,5 мл 96 О этилового спирта имл 40 формальдегида, В полученной смеси сначала растворяют 100 мг пигмента зеленого процного затем 100 мг эозина.Смесь тщательно перемешивают,;цвет, остальные - в розовый. Зритро- розовая, ядра всех клеток крови нециты розовые 1 тромбоциты красного . окрашены, но четко дифференцируютсяцвета. Цитоплазма лимфоцитое бледно" на фоне цитоплазмы.Заказ 4726/46 Тираж 873 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035. Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная,