Способ количественного определения аминофлуоресцеина в изотиоцианате флуоресцеина

Номер патента: 911254

Авторы: Абросимова, Степанова, Факеева

ZIP архив

Текст

.Г.Степанова, Н аявитель Й), СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯАИИНОфЛУОРЕСЦЕИНА В.ИЗОТИОЦИАНАТЕ фЛУОРЕСЦЕИНА можо я тем,оль"енореьтра"ичный сисо Опредеавок.ВОЗ Гворяюона.аминоф флуоресцеини в мерной ко дновременно луоресцеина,отиоцианаталбе в 100 млтовят раст"ля цего Изобретение относится к аналитической химии, .а именно к способам количественного определения амино флуоресцеина в изотиоцианате флуоресцеина (ФИТЦ) который является люмиФ% несцентным микробиологическим краси- телем для метки белков.Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому результату является способ количественного определения айинофлуорес"1 в цеина в иэотиоцианате флуоресцеина путем растворения анализируемой пробы в гидроокиси натрия с последующим спектрофотометрированием попученного при этом раствора 13,Недостатком способа является низкая точность - определение дает сум" марное содержание аминофлуоресцеина как образовавщегося из изотиоцианата флуоресцеинатак и находящегося в виде примесей в изотиоцианате флуоресцеина. Раздельное же определение сивова и Н.В.фаивВва;ги 2их по спектрам поглощения невоно, так как они совпадают.Цель изобретения - повышениности определения.Поставленная цель достигаетчто в качестве растворителя исзуют ацетон и измеряют флюоресцию полученного раствора.Определение проводят на приКфЛ-1 со скрещенными светофилми: СЗС(3) + СС(2) - первтъричный - ОС 12 (3) + ОС(3Либо на установке на основе ИСПс фотоэлектрической приставкойиспользованием в качестве источка возбуждения осветителя ОИ светофильтром УФС. ение проводят методо911 Формула изобретения Составитель Л.СоломенцеваТехред Е.Харитончик Корректор Г.Огар Редактор А,Шандор еетЗаказ 1106/27 Тираж 883 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д.4/5еееееее еФилиал ППП "Патент", г.Ужгород, ул.Проектная,4 0,025 г его растворяют в 100 млацетона в мерной колбе.В три мерные колбы емкостью 50 млпомещают 25 мл раствора ФИТЦ, затемво вторую и третью добавляют соответственно 0,5 и 1,0 мл раствора аминофлуоресцеина и доводят объем раствора аминофлуоресцеина и доводятобъеы раствора во всех трех колбахацетоном до метки.Измеряют интенсивность люминес"ценции в трех растворах и холостомопыте при работе на ИСП 51 при 403 ммСодержание аминофлусресцеина впроцентах (Х) вычисляют по формуле(143-26) 0,05Интенсивность люминесценции раствора в первой колбе (1)-26, во второй колбе (1)-81, в третьей колбе(0,0045 г/мл ), надежности определения (р) Р=0,95, коэфФициент Стьюдента равен 3,18 (сР).Стандартное отклонение 5; -=пе 11410: . :0,048Ъ х 4,15-10 254 4Относительная погрешность среднегорезультатася и ьч 100 3 18 О 48100Я"=" "=7,6,7 й гй Предел обнаружения, вычисленныйпо35-критерию на основании калиб-,ровочной кривой составляет 4 10 г/млили 410-Время проведения анализа 15 мин, 10 Ошибка определения ф 0,64.Выбранный растворитель (ацетон)и условия возбуждения и люминесценции гарантируют определение аминофлуоресцеина, находящегося в раство% ре только в виде примеси, так какФИТЦ легко гидролизуется с образованием аминофлуоресцеина, от выбора.растворителя зависит правильность определения, Из всех опробованных 26 растворителей только в ацетоне практически не происходит гидролиза ФИТЦ,о чем судили по постоянству интен"сивности свечения ФИТЦ во времени. Способ количественного определения аминофлуоресцеина в иэотиоциана- .те флуоресцеина путем растворенияанализируемой пробы в растворителе,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что,с целью повышения точности определения, в качестве растворителя используют ацетон и,изменяют флуоресценциюполученного раствора.Источники информации,:принятые во внимание при экспертизеИзотиоцианатфлуоресцеин. ТУ 09582369 (прототип).

Смотреть

Заявка

2723864, 02.02.1979

ПРЕДПРИЯТИЕ ПЯ А-7815

СТЕПАНОВА АННА ГРИГОРЬЕВНА, АБРОСИМОВА НАТАЛИЯ ВЛАДИМИРОВНА, ФАКЕЕВА НАТАЛИЯ ВЛАДИМИРОВНА

МПК / Метки

МПК: G01N 21/64

Метки: аминофлуоресцеина, изотиоцианате, количественного, флуоресцеина

Опубликовано: 07.03.1982

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-911254-sposob-kolichestvennogo-opredeleniya-aminofluoresceina-v-izotiocianate-fluoresceina.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ количественного определения аминофлуоресцеина в изотиоцианате флуоресцеина</a>

Похожие патенты