Способ получения альбумина

Севэ Соеетскнх Сецнаннстнческнх Респубянк.74 сударственный комитет СССР о делам изобретений н открытий.оа 80,Бю ния опн ата опублнков ня 25.06,80(72) Авторы изобретен Иностранцы альдемар Шнайдер, КристХаральд фидлер и Ханс(71) Заявители 4) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АЛЬБУМИ Изобретение относится к области медицины, а именно гематологии.Известен способ получения альбу- мина путем тепловой обработки плазмы крови человека, из которой уда лены Факторы свертывания, в присут" ствии стабилизирующих альбумин веществ при нейтральных значениях рН, охлаждения, установления рН до 4, последующего осаждения образовавше- Ю гося осадка, содержащего глобулины, и выделения целевого продукта Ь 1Однако при таком способе выход альбумина недостаточно высокий (60- 70). 1Цель изобретения - повьхаение выхода альбумина.Это достигается тем, что тепловую обработку плазмы осуществляют 9-ным спиртом, смесь равномерно фф нагревают до 60 - 75 оС и обрабатывают в течение 3 ч.П р и м е р 1Для отделения плазмы используют плазму, которая лишена свертывающих Факторов. Сверты- нв вающий фактор Ч 1 и Фибриноген устраняют при помощи осаждения криоэтанола. Протромбины устраняют путем адсорбции ДЕАЕ-целлюлозы Первб- начальная плазма является НВАд-отрк ф цательной, имеет нормальную величину трансаминазы и не содержит видимого гемоглобина. В исходную плазму вводят каприлат натрия до тех пор,пока не будет концентрация 0,004 моля. Смесь, содержащую около 9 этилового спирта, нагревают при рН 6,5.Значение рН достигают при помощи 0,5 НИСЕ. Температуру за 3 ч доводят до 68 С. Затем жидкость охлаждают,рН понижают до 4,4 с помощью НС 1,. Подкисленную плазму оставляют на ночь (примерно при 10 С).Отделение фракции осуществляют в центрифугах с непрерывным потоком при помощи силиконовых шлангов. Отделенные белковые вещества собирают в роторы. Альбумин находится в оставшейся жидкости. Отделенные в роторах белковые вещества не со" держат альбумина, который получают дополнительно при помощи повторного смывания и пропускания через центрифугу. Для того, чтобы осадить альбумин, оставшуюся жидкость фильтруют через 55 К-фильтр, при этом удаляются оставшиеся липиды и неизмененные , протеины. Затем добавляют осаждающее средство, например, 18-ную малекновую ккслоту при комнатной тем74,35 б 4,10 протеина и 4-5 спирта, содержание спирта и растворе устанавливаютдо 9. Затем смесь нагревают дое68 С. Осадок пропускают через центрифугу и промывают, чтобы удалитьсодержащийся еще альбумин. Оставшуюсяжидкость Фильтруют и осаждают полиэтиленгликолем, малеиновой кислотойили другими осажцающнми средствами.П р и м е р 4. Аналогично при меру 3 взвешивают 1,0 кг Фракции Ч(пасты) в 3,0 л воды, которая содержит 0,004 моля каприлата натрияв качестве стабилизирующего вещества.Раствор содержит около 7,5 протеина и примерно 7 спирта. Получаютальбумин иэ раствора как в примере 3. Альбумин получают иэ 9-ногоспиртового раствора.Примерно 20 протеина в фракции9-1 представляет собой альбумин.26 Можно дополнительно получить 1-2 гдобавочного альбумина на 1 л выходной плазмы,Также получают добавочный альбумин фракции Ч..Я Затем альбумин получают при помощи осаждения или лиофилизации,можно также применить ультрафильтрациюили выпаривание воды иэ растворапутем ротационного испарения.Предлагаемый способ позволяетувеличить выход альбумина. Составитель С. МалютинаТехред М, ПеткоКорректоР С. Шекмар,Редактор А. Бер Заказ 3495/52 Тираж 673 . Подписное ЦНИИПИ Гос.ударственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППН Патент", г. 3 .с"пеРатуре. В течение несколькихсекунд альбумин осаждается. суспензия альбумнна снова проходит черезцентрифугу. При этом малеиновая кислота и соли остаются в свободнойот протеинов жидкости.Альбумин собирается в роторах ввиде пасты, В сосуде она поглощаетдистиллированную воду и переводитсяв 8-ный раствор. После Фильтрацииальбумин может быть переведен непосредственно в 4-5-ный употребляемыйраствор, причем осмотичность регулируют при помощи глюкозы илидругих подходящих веществ. Затемпродукт стерилизуют Фильтрацией,разливают по бутылям и пастериэуютв течение 10 ч при 60 С,П р и м е р 2. Приготовление20-ного раствора альбумина. Отделение плазмы и отделение Фракцийосуществляют по примеру 1. Затемосаждают альбумин.Оставшуюся жидкость фильтруютпри помощи 55 К-Фильтра, чтобы удалить оставшиеся липиды и иэменыепротеины. Затем в качестве осаждающего средства добавляют полиэтиленгликоль с мол.в. 4000-6000 22"нойконцентрации при комнатной температуре. Альбумин осаждается втечение 30 мин. Суспензию снова пропускают через центрифугу. При этомполиэтиленгликоль и соли остаютсяв свободной от протеинов жидкости.Альбумин собирают в роторы в видепасты. В сосуде она поглощает дистиллированную воду и переводитсяв 8-ный раствор. 8-ный альбуминпосле Фильтрации лиофилиэуют. Высушенный порошок поглощает дистиллированную воду.Пример 3. 1,0 кг Фракции1 Ч в(пасты) взвешивают в 2 лводы, которая содержит 0,004 молякаприлата натрия в качестве стабилизирующего вещества. С помощьюгидроокиси натрия значение РН доводят до 7-7,5. Суспенэию слегкаперемешивают при комнатной температуре. Значение РН проверяют и регулируют. Большая часть пасты растворяется в течЕние 1 ч. Получающийсянеочищенный раствор содержит около Формула изобретенияСпособ получения альбумина путемтепловой обработки плазмы кровичеловека, из которой удалены Факторысвертывания, в присутствии стабилизирующих альбумин веществ прн нейтральных значениях РН, охлаждения,установления РН до 4, последующего осаждения образовавшегося осадка, содержащего глобулииы, и выделения целевогопродукта, о т л и ч а ю щ и й с ятем, что, с целью повышения выхода,тепловую обработку плазмы осуществляют 9-ным спиртом, смесь равномернонагревают до 60-75 фС и обрабатывают,в течение 3 ч.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Патент США 9 2705230,кл. 260-122, опубл. 1955. Ужгород, ул. Проектная,4