Способ определения содержания белка в винах

Оп ИКАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз СоветскикСоциалистическихРеспублик(23) Приоритет по делам изооретеннй и открытийОпубликовано 05.05.80. Бюллетень17 Дата опубликования описания 08.05.80(72) Авторы изобретения Р. Р. Авлянова, 3. Ш, Ваисова, Р, А, Зиямухамедов,ф. М. Кадыров и М. М. Рахимов Среднеазиатский научно-исследовательский и прозктноконструкторский институт пищевой промышленности(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ БЕЛКА В ВИНАХИзобретение относится к винодедьческой промышленности, и в частности к способам определения содержания белка в винах.Известен способ определения содержания белка в винах, включающий осажде 5 ние из вина белка, растворение его, проведение цветной реакции и колориметрирование 11 .Недостатком известного способа явто ляется низкая точность определения белка из.а совместного осаждения красящих и полифенольных веществ с белками и завышения результата анализа.гЦе ю изобре ния.ЯВ ется повыш - 15 ние точности определения белка.Указанная цель достигается тем, что перед осаждением из вина белка из него удаляют красящие и полифенопьные вещества путем введения порошкообразного подиамидв в весовом соотношении поливмид: вино, как 0,5-2,0; 100 выдерживвния смеси в течение 30-90 мин и фильтрации. 2Способ определения содержания белка в винах осуществляют следующим образом.Порошкообразный полиамид без предварительной обработки добавляют к вину в весовом соотношении полиамидт вино, квк 0,5-2,0. 100 и выдерживают от 30 до 90 мин в зависимости от количества красящих и полифенольных веществ.Красящие и полифенольные вещества обладают повышенным средством к порошкообразному полиамиду и адсорбируются на его поверхности. Белковые же ве ществв в концентрациях, присутствующих в винах и виномвтериалах, практически не связываются с полиамидом при добав- пении tорошкообразного поаиамида к вину или виноматериалу в весовом соотношении от 0,5-100 до 2:100 и продод жительности контакта подиамида с обрабатываемым материалом 30-90 мин.Затем обработанное таким образом вино фильтруют для отделения полиамида, красящих и полифенольных веществ. филь трат отбирают в пробирку и оса кдают15,0480,0 15,0 Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Эбелки добавлением ( КНд ) 504до насыщения или обработкой 30%-нымраствором трихлоруксусной кислоты. Осадку дают отстояться в течение 1-4 ч прио4-7 С и отделяют цептрифугированиемпри 5000 об/мин в течение 10-30 мип.Осадок растворяют в 5 мл воды или0,5 н, Иа ОН, нерастворимую часть удаляют центрифугированием, Из раствораотбирают 0,2-0,5 мл, добавляют 1 мл2%-ного содового раствора. Через .10 мин вносят 0,1 мл реактива, выдероживают 5 мин при 55 С, охлаждают докомнатной температуры и измеряют оптическую плотность на фотоэлектрическомколориметре. По оптической плотностиисследуемого образца определяют содержание белка по калибровочной кривой,построенной с эталонным раствором,Содовой раствор готовят непосредственно перед применением смешиваниемраствора, состоящего из 2 г ИЦС 0 и0,02 г калий-натрий винно-кислого в100 мл воды, с 2 мл 0,5%:-ногоСо 5 О, 5 Я,ОП р и м е р 1. К 100 мл винаАлмазар добавляют 1 г порощообразноГо полиамида без предварительной Обра-.ботки и перемешива;-.г в течение 50;,лин,затем фильтруют через складчатый фильтр ЭОиз стандартной фипьтровальной бумаги скрасной полосой для отделения полиамида.К 50 мл фильтрата добавляют (МН 4.) ЯОдо 100% насьпцения. Осадок отделпотцентрифурированием при 5000 об/мин в зтечение 30 мин, Осадок растворяютв 5 мл воды,. Из этого раствора отбирают 0,2 мл добавляют 1 мл реагентасодового раствора, взбалтывают, через10 мин вносят 0,1 мл 0,1 н,реактива 40Фолина-Чокальтеу, выдерживают 5 минпри 55 С, охлаждают до комнатной тем-.- апературы и измеряют оптическую плот-ность на фотоэлектрическом колоримет.=ре ФЗКМ в кюветах 3 мм с красным 35светофильтром. По оптической плотностиисследуемого образца определяют содержание белка по калибровочной кривойпостроенной с эталонным раствором0,03%-ного сывороточного альбумина. 50П р и м е р 2. Все операции прсьводят, как,в примере 1, но вместо сульфата аммония к 50 мл фильтрата добавляют 25 мл холодного 30%-ного раствора трихлоруксусной кислоты. Через 4 чпри 4 С осадок отделяют центрифугирова-.оШ 1 ИИПИ Заказ 1729/34 34нием при 5000 об/мин в течение 10 минОсадок растворяют в 5 мл 0,5 н,ЙООН,нерастворимую часть удаляют центрифугированием при 5000 об/мин в течение10 мин. Из раствора отбирают 0,2 мли дальнейшие операции производят, как впримере 1,П р и м е р 3. К 100 мл винаУзбекистан добавляют 2 г порошкообразного полиамида без предварительнойобработки и перемешиваютв течение90 мин, затем фильтруют через складчатый фильтр из стандартной фильтровальной бумаги с красной полосой дляотделения полиамида. Остальные операции производят, как в примере 2.В таблице приведены сравнительныерезультаты предлагаемого и известногоспособов. Предлагаемый способ определениясодержания белка в винах обладает повышенной точностью определения белкаи позволяет устранить зависимость получаемых данных, обусловленная присутствием в винах красящих и попифенольных веществ.Формула изобретенияСпособ определения содержаниябелка в винахвключавший осаждениеиз вина белка, растворение его, проведение цветной реакции и колориметрирование, отличающийся тем,что, с целью повышения точности определения белка, перед осаждением из вина белка из него удаляют красящие иполифенольные вещества путем введения порошкообразного полиамида в весовом соотношении полиамид; вино, как0,5 2,0,1 00, выцерживания смеси втечение 30-90 мин и фильтрации.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1, Датунашвили Е. Н. и др. Влияниетехнологических обработок вин на стойкость их к коллоидным помутнениям.фКрымф, 1971, с. 26 (прототип),Тираж 1019 Подписное