Питательная среда для выделения

о 1708998ИЗОБРЕТЕНИЯ Союз Советских Социалистических Республик(51) М. К 3) Приорит 2) О 3,05,76 С 12 К 1/ сударстаеиный комите СССР о делам изобретений и открытий(8) 682659 Опубликовано ДК 576,8,093.1(088. 0180 Бюллетень К та опубликования описания 0501.80 72) Авторы изобретения Иностранцындра Фэйе Джибсон и Грегори Дуглас Родже (США) Иностранная фирмакдоннелл Дуглас Корпорейшн (США) 1) Заявите(54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫДЕЛЕН КХЕВБ 1 Е 11 А/ ЕИТЕВОВАСТЕН Изобретение отнмикробиологии и можзовано для микробиза в медицине,Известна питатвыделения КХеЬ 81 ейсодержащая воду, иточник углерода, ибитор постороннейОднако известначивает селективног11 а/Еп 1 егоЬасгег.Целью иэобретенитивное в еленке 4,5-5,0 9,0-11,0 9,0-11,0 0,24-0,269,0"11,0 0,24-0,26 тся к области быть испольгического аналиельн ая Ха Еп сточниндикатмикрофл еда дляоЬасег,азота, ии ингирыне ония 1),беспеК 1 еЬз 3.ереда ыдел я является селекроорганиэмов. ыд ми к1Эта цель достигается тем, что среда дополнительно содержит бриллиантовый зеленый и дрожжевой экстракт, в качестве источника азота она содержит гидролиэат желатины, в качест-ве источника углерода - целлобиозу, иноэитол и Д-биотин, в качестве индикатора - дезоксихолат натрия и натриевую соль рицинолевой кислоты, в качестве ингибитора посторонней микро-Флоры-З-(сХ.-ацетонилбенэил) -4-оксикумарин и 2,4-динитрофенилгидразон сК-кетоглутаровой кислоты при следующем количественном соотношении компонентов, г/л воды: Гидрслиэат желатиныЦеллобиозаИнозитолДрожжевой экстрактДеэоксихолат натрияД-биотинНатриевая сольрицинолевой кислоты 9,0-11,03-(о( -Ацетонилбенэил)-4-оксикумарин 1,96-2,04 2,4-Динитрофенилгидразон с -кетоглутаровой кислоты 0,49-0,51 Бриллиантовый зеленый 0,013-0,0135Положительные результаты индицируются с помощью солей желчных кислот(дезоксихолата натрия) и рицинолевой кислоты, что вызывает изменение светопропускания среды, регистрируемое устройством. Полный анализ может быть закончен в течение 12-18 ч.Среда предпочтительно содержит ингибиторы роста ЕзсЬег 1 сМа со 1 з. и ингибиторы грам-отрицательных организмов. Подавление роста ЕзсЬег 1 сй 1 а с улучшением роста К 1 аЬз 1 е 11 а обеспечивает применение 3-( с(,-ацетонилбенэил) - -4-оксикумарина и 2,4-,динитрофенилгидраэона с(.-кетоглутаровой кислоты. От708998 0,052 0005 Формула изобретения Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1, Справочник по микробиологичес О ким и вирусологическим методам исследования под ред. О. Биргера, М. Медицина, 1973, с. 58, с. 248-249.Тираж 522 Подписное носительно высокое значение рН средытакже способствует подавлению ростадругих нежелательных микроорганизмов.Среда может быть высушена вымораживанием и может функционировать вусловиях дефицита кислорода, 5Питательная среда предпочтительнссодержит 2,3-2,8 питательных ве 1 цеств, 0,196-0,204 3-( д.-ацетонилбенэил) -4-оксикумарина и 0,049-0,0512,4-динитрофенилгидраэона А-кетоглутаОровой кислоты которые действуют какбиологический ингибитор для подавления роста Е,со 11, дающий положительные результаты при проведении анализовна присутствие КВеЬэде 5 Еа или Еп 1 егоЬас 1 ег, и для стимуляции роста микроорганизмов КБеЬэ 1 еХГа. Присутствие2,4-динитрофенилгидразона с(.-кетоглутаровой кислоты также обеспечиваетположительный рост К 1 еЬз 1 е 11 а,Питательная часть среды предпочтительно содержит 4,5-5,5 г/л гидролиэата желатины, 9-11 г/л целлобиозы, 9-11 г/л иноэитола, 0,24-0,26 г/лдрожжевого экстракта и 0,24-0,26 г/лД-биотина, 15Подходящим источником питания является любой свободный от сахаров источник азота, Можно использовать также источники азота неорганическогопроисхождения, например хлорид аммония, Можно также использовать пептоны, содержащие небольшие количествасахаров,Индикатором является дезоксихолатнатрия и рицинолевая кислота, Индикаторная смесь обеспечивает подавлениероста грам - отрицательных микроорганизмов.Химическими ингибитооами предпочтительно являются 3-( сС-ацетонилбенэил) -4-оксикумарин и 2,4-динитро;фенилгидразон сС-кетоглутаровой кислоты. Эти ингибиторы обеспечиваютподавление роста организмов, отличных от К 1 еЬэ 3.е 11 а.Пои слишком малой концентрации любого ингибитора выход нежелательныхфоновых положительных показателейувеличивается, при слишком высокойконцентрации выход уменьшается.П р и м е р, Для получения среды в количестве 100 мл подготавливаютсреду для выделения К 1 еЬэз.е 11 а и.Еп 1 егоЬас 1 ег путем растворения 0,4 г3-( сС -ацетонилбензил) -4-оксикумарина в 98 мл дистиллированной воды при 55смешивании с 2 мл 1 И раствора гидроокиси натрия. Затем растворяют 3-(ив-ацетонилбенэил) -4-оксикумарин и краствору добавляют в (;г):Гидролиэат желатины 1 0Целлобиоза 2,0Инозитол 2,0ЦНИИПИ Заказ 8529/56 Дрожжевой экстрактДезоксихолат натрияД-биотинНатриевая соль рицинолевойкислоты 2 0Р2-4-динитрофенилгидраэонс, -кетоглутаровой кислотыРаствор перемешивают.в течение 1 ч, к нему добавляют 0,027 г брил.- лиантового зеленого. С помощью капельного добавления гидроокиси натрия рН среды доводят до 8. Затем раствор стерилизуют с помощью Фильтрации.Предлагаемая среда обеспечивает селективное выделение КМеЬэ 1 е 12 а Еп 1 егоЬас 1 ег. Питательная среда для выделения К 1 еЬэ 1 е 11 а/Еп 1 егоЬас 1 ег, содержащая воду, источник азота, источник углерода, индикатор и ингибитор постороннеймикрофлоры, о т л и ч а ю щ а я с я тем, что, с целью селективного выделения, она дополнительно содержит бриллиантовый зеленый и дрожжевой экстракт, в качестве источника азота она содержит гидролиэат желатины, в качестве источника углерода-целлобиозу, инозитол и Д-биотин, в качестве индикатора - деэоксихолат натрия и натриевую соль рицинолевой кислоты, в качестве ингибитора посторонней микрофлоры 3-( с(.-ацетонилбензил) -4-оксикумарин и 2,4-динитрофенил гидраэон с -кетоглутаровой кислоты при следующем количественном соотношении компонентов, г/л воды:Гидролиэат желатины 4,5-5,0Целлобиоэа 9,0-11,0Инозитол 9,0-11,0Дрожжевой экстракт 0,24-0,26Деэоксихолат натрия 9,0-11,0Д-биотин 0,24-0,26Натриевая соль рицинолевой кислоты 9,0-11,03-( с(.-Ацетонилбенэил) -4-оксикумарин 1,96-2,042,4-Динитрофенилгидразон с;кетоглутаровой кислоты 0,49-0,51Бриллиантовыйзеленый 0,013-0,0135