Способ получения ингибитора трипсина

Номер патента: 698623

Автор: Вайсблай

ZIP архив

Текст

( Союз СоветскихСо 4 иалистннбсиихРеспублик ОП И ИЗОБ и 698623 АВТОРЧИК 1) Дополнительно 2)Заявлено 22,05 Я)М, Кл, А 61 К 376 с прис вени ощдорстввииый иомите СССР оо делам изобрвтвиий и открытий(71) Заивител иневский ордена Трудового Красного Знамени государственный университет им. В. И. Ленина(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНГИБИТОРА ТРИПСИН Изобретение относится к химико-фармацев.тической промышленности и касается получения ингибитора трипсина.Известен способ получения ингибитора трипсина из семян гороха путем экстракции раст.вором серной кислоты, подшелачивания дорН 7, 6, высаливания сульфатом аммония от20 до 80% насышения, хооматографии на трипсшювой смоле диализом и высушивания 111.Однако этот способ не обеспечивает высокого выхода ингибитора трипсина (иэ 150 гмуки - 1,2 мг),Целью изобретения является увеличение выхода целевого продукта.Эта цель достигается тем, что экстрагирование проводят из семян гороха абиссинскогодистиллированной водойэкстракт подкисляютдо рН 4,0 - 4,3 и хроматографируют на диэтиламиноэтил целлюлозе при рН 8,15 - 8,28.На чертеже приведена хроматограмма, поясняюшая предлагаемый способ,П р и м е р. 150 г гороха абиссинскогоэкстрагируют 1,5 л дистиллированной воды втечение 1 ч при перемешивании. Полученную суспензию цснтрифугируют 30 мин при 5500 ц.Экстракт подкисляют 0,5 Н НС 1 до рН 4,0и снова таким же образом центрифугируют.Из полученной надосацочной жидкости высаливают сульфатом аммония фракцию 0-75,Осадоксуспендируют в 29 - 53 мл 0,1 н КаС 1, рН 8,20вносят в целлофановые мешки диаметром2,0 - 2,5 см и диализуют, против дистиллированной воды рН 8,2 до отрицательной реакщпна сульфат-ион. Ретентат (содержимое целлофановых мешков) центрнфугируют, осадок отбрасывают, а надосэдочную жидкость наносят наколонку с диэтиламиноэтил.целлюлозой (32 хх 40 см), уравновешенной предварительнотрис-НС 1 буфером 0,025 М, рН 8,20 с ионнойсилой 0,0135.Белки элюируют этим же буфером на кол.лекторе. На полученной хроматограмме видно,что ингибирует трипсин только белок второгопика. Этот белок высаливают, диализуют и ретентат лиофилизуют. Все операции с белкамипроводят на холоде (4 - С), а хроматографиюпри комнатной температуре (17 - 20 С), Иэ указанного выше количества муки при рН буфера3 6986238,20 и ионной силе (,б) соответственно 0,135 выход иигнбптора (из. 150 г муки - 35,5 мгполучают 35 мг препарата ингибитора с удель- препарата ингибитора трипсина).ной активностью 1050 мИЕ/мг белка. Электро Формула изобретения нем одного ингибитора, экстрагироваиия измельченных семян гороха,В несколько иных условиях - прн рН 8,15 высаливапня сульфатом аммония, хроматогра(,6=0,0130) получают всего 20 мг препарата фии и диализа, о т л и ч а ю щ и й с я с такой же удельной активностью, а при рН тем, что, с целью увеличения выхода целевого 8,28 ( Ф= 0,0141)-20,5 мг препарата, но его продукта, экстрагирование проводят из семян удельная активность 502 мИЕ/мг белка, При рН 0 гороха абиссинского дистиллированной водой,меньше 8,00 ингибитор не элюируется, а при экстракт подкисляют до рН 4,0 - 4,3 и хромато 8,30 и более он элюируется вместе с основной графируют на диэтиламиноэтил целлюлозе примассой белков экстракта. В прототипе из тако- рН 8,15 - 8,28.го же количества муки получают всего 1,2 мг Источники информациисырого препарата. 15 принятые во внимание при экспертизеПредлагаемый способ получения ингибитора 1, Ч/едег Л. Ногу Н еЬепз-Юзз Тесйпотрилсина из семян гороха обеспечивает высокий 1972, 5, 2, рр, 54 - 63,Ъ К Ю ъ Составитель С. Малютина актор Т. Иванова Техреп Н,Бабурка Корректор М. СелехманТираж 672 Подписи ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5аз 7121/7 гнал ППП Патент, г. Ужго д, ул. Проектна форез и локализация показывают наличие в Способ получения ингибитора трипсина путем

Смотреть

Заявка

2620955, 22.05.1978

КИШИНЕВСКИЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМ. В. И. ЛЕНИНА

ВАЙСБЛАЙ ИЦЫК МЕНДЕЛЕЕВИЧ

МПК / Метки

МПК: A61K 38/55

Метки: ингибитора, трипсина

Опубликовано: 25.11.1979

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-698623-sposob-polucheniya-ingibitora-tripsina.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения ингибитора трипсина</a>

Похожие патенты