Способ получения препарата для парентерального белкового питания

.а 4 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Сента Советскик Социалистических Реслттбли к(51) М. Кл. А 61 с 17,0 иненнем заявки Мо ри Государственныи комнте Совета Министров ССС ло делам изобретенийн открытий(32) Приоритет -Опубликовано 15,09,74. Бюллетень ЪеДата опубликования описания 12.05.7 УД К 615.45:615.857.(72) Авторы изобретения Н. Кремер,Нагли, А. К, Прашкевичус и А. А. Шмид 1) Заявите ижский медицинский институ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ДЛЯ РЕНТЕРАЛЬНОГО БЕЛКОВОГО ПИТАНИЯ щий расход НС 1 1,5 - 2,0 л на весь ферментативный гидролиз. Контроль за рН осуществляют с помощью рН-метра.После окончания ферхтентатигного гидроли за для удаления непереварившихся частицраствор фильтруют через четырехслойную марлю в закрытой системе. Профильтрованный пептолпзат снова загружают в реактор и добавляют 5 кг (2720 мл) хивптчески чистой 10 концентрированной серной кислоты (удельныйвес 1,84). Через подготовленный раствор, содержащий 5 ото серной кислоты, перед началом нагревания пропускают в течение 30 мин углекислый газ. Затем включают подогрев, дово дят температуру до 100 С и, постоянно пропуская углекислый газ в течение всего процесса гидролиза, проводят кислотный гидролиз в течение 7 час при 100 С. Затем гидролизат охлаждают и фильтруют через бумажный 20 фильтр. Готовый кислотный гидролизат затемподвергают дальнейшей обработке. Аниошгг ЭДЭ-П, просеянный через сито Ме 4, замачивают на 24 час в 257 о-нозт растворе хлористого натрия, после чего смолу отмывают дис тиллированной водой до полного удалениясоли (проба на АдХОз). Затем смолу заливают одпонормальным раствором НС 1 па 6 час, после чего смолу отмывают от попов хлора дистиллированной водой. Подготовлен пую смол загрчжатот в колонку и пропускают Изобретение относится к медицине и касается способов получения препаратов для парентерального белкового питания. Известен споссб получения белкового гидролизата из белкового субстрата путем кислотного гидро- лиза, нейтрализации и осветления гидролизата обработкой адсорбентами.С целью улучшения качества целевого продукта по предлагаемому способу сырье подвергают ферментативному расщеплению, а последующий кислотный гидр олиз проводят в атмосфере углекислого газа, обрабатывают гидроокисью алюминия и пропускают через колонку с катионитом,П р и м е р. 60 л дистиллированной воды помещают в реактор с мешалкой, покрытый кислотоустойчивой эмалью, добавляют 120 мл концентрированной соляной кислоты и туда растворяют 60 г очищенного (не смешанного с сахаром) пепсина активностью 400000 - 500000 сывороточных единиц. Тем пер ату ру раствора пепсипа в соляной кислоте доводят до 37 - 40 С. В рсактор загружают 50 кг подготовленного отмытого и отпрессованного фибрина. Процесс переваривания длится в течение 24 час при постоянном перемешивании с помощью мешалки. При переваривании непрерывно поддерживают постоянство рН 1,5 - 2,0 путем добавления концентрированной соляной кислоты (по 200 мл одновременно). Об"т 11 44280 О4%-ный раствор едкого натрия до тех пор, пока концентрация щелочи, вытекающей из колонки, станет равной концентрации поступающей в колонку щелочи. Перед пропусканием гидролизата смолу отмывают дистиллпроваьной водой для полного удаления ионов гпдроокисла (проба на фенолфталеин). Затем пропускают гидролизат. Отработанный апиопит промывают дистил,чированной водой, вытесняя оставшийся в колонке гидролизат, и регенерируют его, пропуская 4% -пый раствор едкого натрия до отрицательной реакции на ион сульфата (капельпая реакция с 2%-ным раствором хлористого бария). Перед ионообменом смолу отмывают от щелочи проточной водой, а затем дистиллированной, Поверхность воды должна быть всегда выше поверхности смолы. Отмывку смолы от щелочи ведут до исчезновения окраски по фенолфталеипу.Профильтрованный кислый гидролизат с целью освобождения от серной кислоты пропускают через колонки, наполненные ионообменной смолой ЭДЭ-П. Перед началом деминерализации кислого гидролизата слой дистиллированной воды над смолой пе должен быть более 1 см. На подготовленные к ионообмену колонки подают кислый гидролизат пз расчета 5 - 6 л па 1 кг смолы. Гидролизат должен покрывать поверхность смолы. Первые порции щелочной фракции отбрасывают (16 - 18 л). При появлении в щелочной порции азота (появление его определяется в пробирках реактивом Несслера) шланги переносятся в бутыль, куда производят дальнейший сбор гидролизата. При рН 7 - 7,4 прекращают подачу кислого гидролизата на колонки и вытесняют его дистиллированной водой, При появлении следов ионов сульфата (обычно при рН 5,5 - 6,5) в вытекающем из колонки гидролизата сбор гидролизата прекращают, Полученный гидролизат тщательно перемешивают, а если нужно, то с помощью едкого натрия доводят до рН 8,5 - 9,0. К собранному с анионитной колонки гидролизату, имеющему рН 8,5 - 9,0, присыпают маленькими порциями при постоянном тщательном перемешивании мелко измельченный порошок треххлористого алюминия до достижения рН 7,0. Образовавшийся осадок геля гидроокиси алюминия с адсорбированными мел аноидина ми удаляют центрифугированием на суперцентрифуге СГОпри 16000 - 18000 об/мин. Центрифу. гат фильтруют на фарфоровом нутч-фильтре через фильтровальную ткань и 8 - 10 слоев фильтровальной бумаги.Продажный катионит КУзаливают 5%-ной соляной кислотой на 2 час,затем кислоту декантируют, трижды промывают дистиллированной водой, декаптируя, и заливают 10% -пой соляной кислотой, Затем подготовленную смо. лу помещают в колонку и пропускают через нее 5%-ный раствор хлористого натрия до тех пор, пока рН вытекающей из колонки жид 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 кости не станет одинаковым с рН пропускае. мого через колонку раствора (рН = 5 по универсальному бумажному индикатору). Затем колонку промывают дистиллированной водой до отрицательной реакции на ион хлора (капельная реакция с раствором азотнокислого серебра), Промывку колонки водой ведут непосредственно перед пропусканием гидролизата. После пропускания гидролизата через колонку ее промывают дистичлированной водой, вытесняя оставшийся в колонке гидролизат. Затем через катионит пропускают 5%-ю соляную кислоту до отрицательной реакции на аммиак (реакция с реактивом Несслера). Колонку с соляной кислотой оставляют до следующего употребления, Перед пропусканием гидролизата через колонку с катионитом пропускают 5%-ный раствор хлористого натрия, избыток которого удаляется промыванием дистиллированной водой до отрицательной реакции на ион хлора.Осветленный, профильтрованный гидролизат пропускают через колонку с заряженным катионитом КУ(в натрий форме) . Первую порцию вытекающей пз колонки жидкости (примерно 2/3 объема смолы в колонке) отбрасывают. Следующую порцию гидролизата собирают, следя за появлением в вытекающей из колонки жидкости следов аммиака (реактив Несслера). При появлении аммиака сбор гпдролизата прекращают. Остаточный гидролизат вытесняют дистиллированной водой, катионит немедленно регенерируется.Нейтральный гидролизат подают в автоклав-реактор и подвергают стерилизации при давлении в реакторе 1,2 атм в течение 30 мин. По окончании стерилизации гидролизат охлаждают до 20 - 25 С подачей вначале теплой воды в паровую рубашку реактора, посте. пенно переходя па холодную воду при непрерывно работающей мешалке, После охлаждения гидролизат подают под давлением 0,3 - 0,5 атм на стерильный фильтр Сальникова, установленный в стерильном боксе, Гидролизат разливают вручную в боксе в 250 - 500 мл стерильные флаконы, при этом производят посев гидролизата вначале, середине и в конце разлива. Готовый вибриносол подвергают контролю па стерильность, пирогенность, токсичность и биохимический анализ согласно требованиям МРТУ. П редмет изобретенияСпособ получения препарата для парентерального белкового питания путем кислотного гидролиза исходного белка с последующей очисткой, отличающийся тем, что, с целью улучшения качества целевого продукта, сырье подвергают предварительному ферментативному расщеплению, а последующий кислотный гидролиз проводят в атмосфере углекислого газа, обрабатывают гидроокисью алюминия и пропускают через колонку с катионитом,