Способ получения белков модифицированных изотопами йода

(51) М. Кле С 07 С 103/52 7 80 324/2 3-4 с присоединением явки осудерственнвй номнтеСовете Министров СССРсв делам изобретенийи отнРстнй. Кулаков, А. М. Можайский, И. И, Заславский и М. Н. Славин И. Станк 2) Ав иаооэетечия Заявитель титут биофизик 4) ОБ ПОЛУЧЕНИЯ БЕЛКОВ, МОДИфИПИРОВАННЫХ ИЗОТОПАМИ ЙОДА ние относится Изобрет сэбу по лучшенномуифицированзттачэ чения белк отнэситель - ктрэда в тая при плэт- а системе фатном буоннэй силой стны.л потец ивают ите;бело об пэзвэляе соким радио эй степенью В мо текччу исхэдньпэлфч чсь хи ггас равнэглер, -белка по 1Предлагаемыи спосазличные белки с вь КИМ ВЫХОДЭ;1 С ВЫСО20 ности включения иэд нативны: максим вэйств нэм сохранелка. ь 00 мг альбумина сыа В растворе фэсфатионнэй силой 0,2 е Приэрэткп к.эго буфе едении иэской ячейЭВИ ЧЕЛОВЕ а с э 1 7 0 ных изотэпами иода, которые находят широкое применение в медицине.Способ получения белков, модифицирован ных изотопами иода путем иодирования белков в эдектрохимической ячейке, известен в литературе. По известному спэсэ. бу процесс проводят в гальваностатическэм режиме при пгтэтнэсти тэка 30 мкА/ст и начальном значении потенциала ."- 50 мв.При проведении процесса наб тюдается повышение анодного пэтенциала до 0,1- - 1,2 в, при котором уже возможно окисле ние функциональных групп белка, например сульфигидридных фенодюных что приводит к структурным изменениям белковой молекулы и, следоватегтьнэ, к изменению биологической специфичности белка. Сохранение иодированными белками биологической специфичности в процессе введения в них радиоизотопов иода является главным требованием при их испэльзэвачии.Эта цель достигается при пров дирэванис. белков в элэктрохимиче ке при контролируемых постоянн ниях потенциала Е=450-850 мв нэ нормального водородногэ эле чение всего процесса иодирэвани ности тэка не более 40 мкА/см Процесс проводят в буферной при рН 6, предпочтительно в фос ферпом растворе с рН 7+0,1 и и 01 - 0,3. Продукты выделяют из 1, спосэбами,Постоянное значение анодног ла и силы тока задают и п эддер пэмэшью потенциэстата. Предпоч количество вносимогэ иодоносите11 соответствовать соотношению йо т, 1.421254 Ферной системе. 2. Способ пс и. 1, О т л и ч и 1 э 1 ц и Йв буферномсА 81 0 теэ про ес вед/,растворе при рН 6 и ионной Составитель В, НазинаРедакор Н. Джарагетти Техред А. Богдан Корректор Н, Ковалева Заказ 732/69 Тираж 575 П 1 дпчгноЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министр.в СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, ЖРаугнская наб,. д, 4/;.=. филиал ППП Патент", г. Ужгород, ул. Проектн я, 4 пэме 1 сеют в э:1 ектрэхих 1 ическую и 18 йку с пгатиновым электродом 1 объем 10 мл). За-йвносят 1,45 мл 10 м/л раствэра иопистого натрия и раствор радиоактивного/иодили иод. Помешают в реакц 1 энную смесь катод, отгороженный от анода непроницаемой для белка перегорэд - кэй. Иэдирэвание проводят в течение 45- 15 мин при аноднэм потенциале 650-".100 мв отнэсительчэ хлорсеребряного электрода В причем плотность анэдногэ тока не более 40 мкА/см . Выход 98+ 1%.П р и м е р 2, Раствор гамма-глобулина (0,59 о%) в фэсфатном буфере с ОН 7,0 и иэнннэй силой 0,2 помец 1 ают в элек- б грэхимич 8 скую ячейку с платинэвъ 1 М элекГ( трэдэм, дэбавляют раствор Мод или й о 1" и 1,45 мл 1 0 М/л рас.гвэра носителя, В реакциэнную смесь пэмепгают катод, этгэрэженный полупроницаемэй перегородкэи ф эт анода, Процесс гроводят при анодном готенциале Е 650+100 мв относительно хлор- серебряного электрода и плотности тока не более 30 МКА/см в течение 40-60 мин. Выход 85+- 3%. 25П р и м е р 3, Навеску лизоцима 100 мг) раствораяют в 5 мл фосфатного буферного раствора с рН 7,0 и ионной силой 0,2, затем прибавляют раствэр радиоактивного иода и требуемэе количество нэ- "ф сителя, доводят обцгий обьем до 10 мл. Реакционн-, О сх 18 сь пэ:ыеп а;э;. в влек 1 ческую ячейку с платиновым электродо и л провод 11 т иодирование при Е;.о С - 150 отнэсительно хлэрсеребряиогэ электрода.Ппэтнэсг тэка не более ,о МКА/см ,.время Оеак нп". 45-75 1,1 ин, ВЭ 1 хэд 903 ь.ПостэчннОР знас 1811 ие ачолного пэтеициача и силы тока задают и иэддержива 1 от с по-.мо/пью потенциостата, ПО окончании коди.рования раствор 1 белков эчипают 11 Т 11 д 1 д- ионов известнь 1 ми приемами, например спэмэ 1 цью аниэнита./1.нод регенериру ют хрэ:,1 пикэ".1 или ме годом катэд 11 э - анэдной пэляризации при и эт 81:пиалах вь 1 дел 8 ния кисл ор э" а в; 1 д: - . р "э л:,формула изобретени 1, Спссэб пэлу 1 ения белков, мэдифицированных изотэпами Йода 11 утем иэдирования 0811 ков в эл 8 ктрэхимическэй ячеЙке, о т л и ч и 1 О п 1 и Й с я тем, что, с целью улучгиения качества целевогэ продукта, прэЦРСС ВЭДУТ ПРИ ПОСТОЯННЫХ КОНТРОЛИРУНМЬ,Хвеличинах поте 1 гциала Е 450-850 мв иаплэтчэси тока не вып 1 Р 40 мк: /см в б