Способ определения противоопухолевой активности лимфоцитов

Номер патента: 420259

Авторы: Кушке, Семенова, Уманский

ZIP архив

Текст

(22) Заявлено 25.07.72 (21) 1813978/31-16с присоединением заявки51) М. Кл. С 121 с 700 32) Приоритетпубликовано 05.07,7 ата опубликования Государственный ноиитет Совета Министров СССР по делам нзооретений н открытий) Заявител Институт проблем онкологии АН Украинской С(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ ЛИМФОЦИТОВИзобретение относится к области медицины и касается способов определения противоопухолевой активности лимфоцитов.Известен способ определения противоопухолевой активности лимфоцитов путем их инкубации с опухолевыми клетками в соответствующих условиях.Однако необходимым условием осуществления данного способа является предварительная адаптация опухолевых клеток к условиям культуры в течение 1 - 2 месяцев, что делает способ практически не применимым в клинике.Цель изобретения в ускорен способа.Для достижения поставленной цели опухолевые клетки и лимфоциты в соотношении не ниже 1: 1 инкубируют в диффузионной камере, которую имплантируют в брюшную полость лабораторного животного.Существует два варианта предлагаемого способа.1. Опухолевые клетки и лимфоциты помещают вместе в диффузионную камеру.11. Опухолевые клетки помещают в один отсек диффузионной камеры, а лимфоциты в другой отсек, отделенный от первого непроницаемым для них фильтром.П р и м е р. Для опыта берут мышь линии ВА 1.В/С с индуцированной метилхолантреном саркомой. Одновременно с удалением опухоли извлекают регионарные и отдаленные от места развития опухоли лимфоузлы, а также селезенку, Лимфоидные органы помещают в культур альную среду, состоящую из 45% среды 199,45% гидролизата лактальбумина и 10% бычьей сыворотки.Лимфоциты получают измельчен нем лимфоидных органов в гомогенизаторе Поттера.10 Из удаленной опухоли путем трипсинизации 0,05% раствором трипсина на среде Хенкса получают жизнеспособные изолированные опухолевые клетки.Полученные клетки - как опухолевые, так 15 и лимфоциты фильтруют через 4 слоя капрона и подсчитывают.Для опыта применяют диффузионные камеры, состоящие из двух отсеков. На каждое кольцо (диаметр - 0,5; 1,0 и 1,5 см) наклеи вают мембранные фильтры (размер пор0,45 м), которые предварительно трижды кипятят в дистиллированной воде для детоксикации. Приготовленные вышеописанным способом диффузионные камеры стерилизуют 25 кипячением.В один отсек камеры помещают взвесь опухолевых клеток, а в другой - взвесь лимфоцитов. Таким образом лимфоциты отделены от опухолевых клеток непроницаемым для 30 клеток мембранным фильтром.420259 Предмет изобретения Составитель С. Шенева Техред Л. Богданова Корректор Л. Орлова Редактор В. Емельянова Заказ 3121/2 Изд Мо 57 Тираж 456 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Типография, пр, Сапунова, 2 Камеры тщательно проклеивают (раствор фильтров в ацетоне) по линии соприкосновения колец и имплантируют в брюшную полость животных.Все стадии опыта проводят в асептических условиях.На третьи сутки животных забивают, извлекают камеры и срезанные с колец камеры фильтры фиксируют в течение 20 мин в спиртформоле и хранят в 70 о/о-ном спирте, после чего их окрашивают гематоксилином Каррацци.В окрашенных, как опытных, так и контрольных препаратах подсчитывают число образовавшихся колоний.Предложенный способ позволяет определить противоопухолевую активность лимфоцитов в короткие сроки (до 3 суток), что очень важно для определения прогноза и выбора тактики лечения. Способ определения противоопухолевой активности лимфоцитов путем инкубации коло ний опухолевых клеток с лимфоцитами и определения эффективности колониеобразования, отличающийся тем, что, с целью ускорения способа, опухолевые клетки и лимфоциты в соотношении не ниже 1; 1 инкуби руют в диффузионной камере, которую имплантируют в брюшную полость лабораторного животного,

Смотреть

Заявка

1813978

Ю. А. Уманский, Р. А. Семенова Кобзарь, Л. Я. Кушке Институт проблем онкологии Украинской ССР

МПК / Метки

МПК: A61D 7/00

Метки: активности, лимфоцитов, противоопухолевой

Опубликовано: 05.07.1974

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-420259-sposob-opredeleniya-protivoopukholevojj-aktivnosti-limfocitov.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения противоопухолевой активности лимфоцитов</a>

Похожие патенты