Способ разделения полиэлектролитов

Союз Советских Социалистических РеспубликОЛИСАНИ ИЗОВРЕТЕНия ПАТЕНТ Зависимый от патентаЗаявлецо 21,Х 11.1970 (Лт. 1600636/23-4 М.Кл, С 07 7/ В 01 15риоритет 22.Х 11.1969,17721/69, Швеция публпковапо 27.М 11.1973, Боллетспь3 асударствгнныи коит Совета Министров ССС по делам изобретенийи открытии ДК 543.544.4(0/)лтя оублпковгппя оппсяпя 1 горы .5 об)етсИпоетря и цы Линда Фриклуцд и Джеркер Олоф Пора(Швеция) Иностранная фирма ксплоатерицгс Актиеболагет)а 51 вител ь Б. ОЛ ИЭЛ ЕКТРОЛ И ОСОБ РАЗДЕЛЕ к матрице прпсоедиц ми аминокислоты илП р и м е р 1. Кол дексом Ст, к котор мощью бромциаца р р-алацица па 1 г сух ют 0,12 М раствором (рН раствора дово, уксусной кислоты). В раствора, содержац (Ка)а идгсо 11 з 1 ох (ромывают аммопий твором. Лпалпз элюа яд кобры разделен и цент. П р и ме р 2. Колопку (44,5 Х 1 сл) с целлолозой, к которой с помощью эппхлоргпдрцн прпсоедицец глицин (около 0,2 .экв глиципа па 1 г сухого веса), уравповешивают 0,02 М пиридипацетатцым буфером с рН 5,0. В колонку помещают 1 гсмесиолиголизипов (1. - 1.,О) и колонку промывают пиридицацетатпым бу фером с рН 5,0 так, что конечная концентрация уксусной кислоты 0,15 М. Элюат ацализи Б ровали с помощью цицгидрицового реактива.На кривой элюции видно десять четко разделеццых компонент, соответствующих лизину, дилизицу, трилизицу и т. д.П р и м е р 3. Колонку (37,1 Х 1,4 с,ц) с агазо розой (6% агарозы и 94% воды), к которой с обретению амрицей служат, чи целлюлоза, хорошо пабуеляемые полиать в полимер.в амфотерцых гявшихся для олярпых ионов Изобретение относится к способу разделения полиэлектролитов, таких как белки, пуклеиповые кислоты, пептиды или нуклеотиды, ца амфотерцых иопообмеццых смолах, Использовацие последних для разделения цекоторых классов соединений, например ионов металлов, хорошо известцо. Однако известные до сих пор амфотерпые иопообмецники неэффективны для разделения цазвяшпих выше классов поли- электролитов.В соответствии с изобретепием предлокеп способ разделения пол иэзектролоь, вяпрпмср белков, нуклеиновых кислот, пептидов. или пуклеотидов, заключающийся в том, что для разделения используют амфотерые, гидрофильпыс иопообмепппки, включающие одновременно основные азотсодержащие и карбоксильпые или сульфогруппы, в которых соотношение основных и кислотных групп является стехиометрически м. В используемых согласно из фотерных иоцообменниках мат папример, агар, сефадекс и. вследствие чего иопообмеццики хают в водных растворах, и разд электролиты могут легко проник пый гель. Этого пе происходит попообмеппиках, ранее приме хроматографии. В качестве бип; "рьФч1) яют различными споеобяпх производцые,оцку (58,5 Х 1 сл) с сефаому присоединен с по-алациц (около 0,75,экя ого веса), уравцовешиваацетата аммония с рН 6,0 боится до 6,0 добавлениемколонку помещают 1,и. тего 100 г яда кобры п), после чего колонку ацетатцым буферным раста с колонки показал, чтшесть отдельпых компо392627 Составитель В. Пастухова Техрсд Л, Богданова Редактор Л, Герасимова Корректор Е, Хмелева Изд. Мо 187 Тираж 523 ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж, Раушская наГ., д. 415Заказ 600 Подписное Загорская типография 3помощью бромциаца присоединен аргинин (0,248 макв аргицина на 1 г сухого веса), уравновешивают 0,01 М трис-НС 1 буферным раствором с рН 7,5. В колонку помешают 25 иг продукта неполного ферментативного гидролиза ДНК из вилочковой железы теленка, растворенного в 5,ил буферного раствора. Адсорбироваццые нуклеиновые кислоты элюируют н линейном градиенте буферных растворов: 250 лл исходного и 250 .цл раствора, 1 М относительно уксусной кислоты и 1 М относительно хлористого натрия. Получены четыре фракции при соответствующих объемах, равных 66,3;76,5; 98,1 и 107,1 ил.Предмет изобретения1. Способ разделения полиэлектролитов,4таких как белки, нуклеиновые кислоты, пептиды или нуклеотиды, путем хроматографии на амфотерных, гидрофильных ионообменниках, отличающийся тем, что, с целью увеличения 5 эффективности разделения, используют ионообменники, включающие одновременно основные азотсодерткащие и карбоксильные нли сульфогруппы, в которых соотношение основных и кислотных групп является стехиометрическим.10 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, чтоиспользуют ионообменники, матрицей которых являются полиакриловая кислота, полиакриламид, декстран с поперечными связями, агар 15 или целлюлоза,