Способ выделения комплекса бацитрацина

Союз Саветскик Социалистических РеспубликМ ПАТЕНТУ Зависимый от патента М л. С 120 9,1 С 07 о 11/00 1426995/30-1 явлено 06.1 Ч,197 риорите Комитет по деп 5.779.9 бликовано 15.Ч.1973. Бюллетень М 21 зобретеиии и открытипри Совете МинистровСССР кования описания 20.ЧП.1973 Дата о Авторы изобретения Иностранцы штван Хорва Шандор, Ла Ласло Белла Народная Ре анное предпр еш вегьежет Народная Р асло Жарка Иштван И Габо о Го ва Мадьяр, Ишефи, Иштван Амбрус, Гула Колар , Ференц Варгаспубликаиятнетермекеспублика Заявитель ьяра Хи СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ КОМПЛЕКСА БАЦИТРАЦИН ИЗ ФИЛЪТРАТА КУЛЬТУРАЛЪНОЙ ЖИДКОСТИ БАКТЕРИИ-ПРОДУЦЕНТА2 же нерастворим в водной среде. Вь делять бацнтрацин из водных раст известными средствами осаждения. образуют с кондепсатамн срормальд линсульфокнслоты трудно раство лео осаждаемын осадок с содер) цитрацина значительно большим, вестных осадках. В качестве осади смесь конденсатов форм альдегн сульфокислоты с различным число причем, степень конденсации наход тервале числа звеньев от 2 до 9. Большим преимуществом изобретения является образование осадка без добавления двухвалентного металла в кислой среде в интервале значений рН от 2 до 5,5. Можно также конденсат формальдегиднафталинсульфокислоты и соль двухвалентного металла одновременно вводить в раствор бацитрацнна. В этом случае лучше устанавливать значение рН выше 5,5, предпочтительно между 7 и 8. Выпавший осадок отделяют фильтрованием и высушивают, Содержание бацитрацнна в полученном таким способом продукте почти совпадает с количеством бацитраципа, находившимся в фильтрате.Этот продукт можно непосредственно использовать для кормления животных,зв рм.приеедомее,с 2 ьфо- не- при- такИзобретение относится к способам выделения антибиотика бацитрацина, синтезируемого микроорганизмами Вас. зцЫ 111 з и Вас. 11 с 1 теп 1 огпт 1 з, в особенности к способам, при которых комплекс бацитрацина выделяют путем осаждения.Известен способ выделения комплекса оацитрацина из фильтрата культуральной жидкости бактерии-продуцента, при котором комплекс бацитрацина осаждают алкил- или арилсульфонатом или диизонафтилсульфонатом. При этом получают продукт с содержанием бацитрацина от 14 до 20 ео, Кроме того, для выделения бацитрацина требуется применить вспомогательное фильтрующее вешесгво.Для повышения выхода бацитрацина предлагаемому способу осаждение прои дят воднорастворимой солью конденсата фо альдегиднафтилинсульфокислоты, причем, значении рН от 2 до 9 - предпочтительн щелочной солью, а при значении рН от 5, 9 - в присутствии солей двухвалентных таллов,Бацитрацин, легко растворимый в вод конденсатами формальдегиднафталинсул кислоты образует в кислой водной среде растворимый комплекс, и этот комплекс в сутствии двухвалентных солей металлов годнее выпоров, чем Для этого егиднафтаимый, но аннем бачем в нзтеля берут ч,нафталинм звеньев, ится в инЗаказ 2028/14 Изд. Мо 532 Тираж 467 Подписное ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР Москва, К, Раушская наб., д. 4/5 Типография, пр, Сапунова, 2 3П р имер 1. В 500 мл фильтрата, содержащего 232 ед,/мл бацитрацина со значением рН 3,5, вводят 6 мл 33%-ного водного раствора конденсата формальдегиднафталинсульфокислоты (тамол М.Х.О.) и 1 г сульфата цинка. При помощи 40%-ного раствора едкого патра рН раствора доводят до 7,5 .Смесь, содержащую осадок, перемешивают 30 мин и фильтруют. Осадок сушат в вакуумсушильном шкафу при 45"С, Получают 5,3 г продукта, содержащего 41,8% бацитрацина, что составляет 95,7% содеркания бацитрацина в исход ом фильтрате.П р и м е р 2. В 500 мл фильтрата, содержащего 321 ед/мл бацитрацина со значением рН 3,5, добавляют 6 мл 33%-ного водного ра. створа конденсата формальдегиднафталинсульфокислоты (кортамол Х,Х,О.) и 1 г сульфата цинка. При помощи 40/о-ного раствора едкого натра устанавливают значение рН раствора на уровне 7,6. После 30 мин переме шивания осадок отфильтровывают и сушат в вакуумсушильном шкафу при 45 С, В результате получают 7 г продукта, содержащего 4735 бацитрацина. Этот продукт сохраняет 100% активность исходного фильтрата.П р и мер 3. В 500 мл фильтрата, содержащего 321 ед./мл бацитрацина, полученного ферментацией (рН 6), добавляют 6 мл 33%- ного водного раствора конденсата формальдегиднафталинсульфокислоты (кутамол Х,М,О.) и 1 г сульфата цинка, Затем при помощи 40%- ного раствора едкого натра рН раствора доводят до 7,7 и после 30 мин перемешивания отфильтровывают осадок. Осадок сушат в вакуумсушилке при 45 С. Получают 7,75 г продукта, содеркащего 41% бацитрацина, что со 4ставляет 98,7% бацитрацина, содержащегося в исходном фильтрате.П р и м е р 4. В 500 мл фильтрата, содержащего 321 ед./мл бацитрацина, имеющего ферментационное происхокдение, добавляют 6 мл 33%-ного водного раствора конденсата формальдегидчафталинсульфокислоты (кута.мол М,М.О,), Затем при помощи 25 о/о-ного раствора серной кислоты рН доводят до 3. Вы павший осадок фильтруют и затем сушат в вакуумсушилке при 45 С. Получают 7,55 г продукта, содержащего 42% бацитрацина, В этом продукте содержится 98,7% бацитрацина исходс ного раствора.15 П р и м е р 5. В 2500 мл раствора, содержащего 157 ед./мл бацитрацина, имеющего ферментационное происхождение, добавляют 43 мл ЗЗо/о-ного водного раствора конденсата формальдегиднафталинсульфокислоты (тамол 20 ХМО,), Затем при помощи 10%-ной солянойкислоты рН доводят до 3,5 н отфильтровывают осадок. Получают 22,2 г продукта, содеркащего 35,3% бацитрацина. В этом продукте содержится 100% бацитрацина, содержавше гося в исходном растворе. Предмет изобретенияСпособ выделения комплекса бацитрацинаиз фильтрата культуральной жидкости бакге.30 рии-продуцента путем осаждения, отличиои 1 ийся тем, что, с целью получения более высокого выхода оацитрацина, осаждение осуществляют солью конденсата формальдегиднафталинсульфокислоты, причем в интервале 35 рН от 2 до 9 - предпочтительно ее щелочнойсолью, а в интервале рН от 5,5 до 9 - в присутствии солей двухвалентных металлов,