1сесоюзная wtekthq-texhhechar
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
О П И С А Н И Е 372263ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Советских Соннапнстическнх РеспубликЗависимое от авт. свидетельства ЛЪ 33619/31-16) Заявлено 12.11,1971 ( 1с присоединением заявкиПриоритетОпубликовано 01. .1973.Дата опубликования опис Кл. С 121 с 7/0 Комитет по дел зобретеиий и открмтийпри Совете МинистровСССР 16-022.6: 616.988.2088,8) юллетень Ме 1ия 14.Ъ 1.1973 1 союанЯ щдКП,-;".т",51:"- илС ГЯ, фокина, 3. ф. 3 Заявител ОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИГЕНА ВИРУСА ПОЛИОМИЕЛИТА ДЛЯ РЕАКЦИИ СВЯЗЫВАНИЯ КОМПЛЕМЕНТА Изобретение относится к производству вирусных препаратов.Известны способы получения антигена вируса полиомиелита для реакции связывания комплемента путем выращивания вируса на культуре ткани обезьян с последующей его инактивацией гидроксиламином и лиофилизацией. Однако указанные способы не обеспечивают получения вируссодержащих суспензий с высокими титрами в производственных условиях.Целью изобретения является получение вируссодержащих суспензий с высокими титрами, Эта цель достигается тем, что в качестве субстрата для выращивания вируса, например, штамма Бруненд тип 1, штамма МЕР типа 2, штамма Сокетт тип 3, используют культуру клеток миндалины обезьяны.Вирус полиомиелита вносят в культуру клеток в дозе 0,1 - 1,0 БОЕ на клетку и инкубируют в течение 24 - 48 час при 36 - 37 С.Для,получения антигена вируса полиомиелита для реакции связывания комплемента в соответствии с изобретением клетки МИО (перевиваемая линия клеток миндалины обезьян) выращивают при 37 С с использованием питательной среды 199 с 10% сыворотки крупного рогатого скота и 0,02 ед. инсулина до образования полного монослоя. Перед заражением вирусом культуральную среду удаляют и инфицируют клетки вирусом полиомиелита (например, тип 1 штамм Бруненд, тип 2 штамм МЕР, тип 3 штамм Сокетт) из расчета 0,1 - 1,0 БОЕ на клетку. После 1 часа адсорбции при 5 комнатной температуре в матрицы добавляютподдерживающую среду (среда Игла, содержащая 2% нормальной крысиной сыворотки н 0,3% глюкозы, по 100 лтл в 1 л матрац). Инфицированные культуры инкубируют при 36 - 10 37 С в течение 24 - 48 час до дегенерации неменее 90% клеток. Затем клетки отделяют от стекла и центрифугируют вируссодержащую жидкость в течение 20 лтин при 2000 об/миль Осадок клеток ресуспендируют в О,1 объема 15 надосадочной жидкости и подвергают трехкратному замораживанию при минус 20 С и оттаиванию в холодной воде, Полученный препарат осветляют центрнфугированпем (25 мин, 3000 об/л 1 ин) и добавляют к надоса дочной жидкости антибиотики (по 200 ед/млпенициллина и стрептомицина). Для инактивации к 5,5 частям антигена добавляют 1 часть 6,5 М раствора солянокнслого гидроксиламина рН 9,0 при инактивации вирусов типа 1 и 3 и 25 рН 7,5 при инактивации вируса типа 2. Послеинкубирования в течение 48 час при комнатной температуре инактивированный антиген диализуют против фосфатного буферного раствора (на 100 лтл антигена 10 л буферного рас твора), осветляют центрпфугированнемКорректоры; В. Петрова и Л. Луковцева Редактор Т, Каранова Заказ 1608/12 Изд. Ио 334 Тираж 467 ПодписноеЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Типография, пр. Сапунова, 2(20 мин при 3000 обмин) и разливают в ампулы типа БЦЖ по 2 мл, после чего подвергаютлиофильному высушиванию. Предмет изобретения1. Способ получения антигена вируса полиомиелита для реакции связывания комплемента путем выращивания вируса на культуре ткани обезьян с последующей его инактивацией и лиофилизацией, отличающийся тем, что,с целью получения вируссодержащих суспен.зий с высокими титрами, в качестве субстрата для выращивания вируса, например штамм Бруненд типа 1, штамм МЕР тип 2, Сокетт 5 тип 3 используют культуру клеток миндалины обезьяны.2. Способ по п. 1, отличающийся тем, чтовирус полиомиелита вносят в культуру клеток в дозе 0,1 - 1,0 БОЕ на клетку и инкубируют 10 в течение 24 - 48 час при 36 - 37 С.
СмотретьЗаявка
1633619
Г. И. Фокина, Ф. Зубова, Ю. Гендон
МПК / Метки
МПК: A61K 39/13
Метки: 1сесоюзная, wtekthq-texhhechar
Опубликовано: 01.01.1973
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-372263-1sesoyuznaya-wtekthq-texhhechar.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">1сесоюзная wtekthq-texhhechar</a>
Предыдущий патент: Способ экстракции компонентов питательнойb_hayigt; amp; (otka
Следующий патент: Установка для правки 1и сушки шкур
Случайный патент: Переносное заземление