281478

О П И С А Н И Е 281478ИЗОБРЕТЕНИЯ И АВТОРСИОМУ СВИДЕТЕЯЬСТВУ богоа Соеетскиа 6 оциалистическиа РеспубликЗависимое от авт. свидетельстваЗаявлено 19 Х 1969 ( 1331094/23-4)с присоединением заявкиКл. 12 ц, 601 1 ПК С 07 с 103/52УДК 547.964.4.07(088 нор итет Комитет по делам аобретеиий и еткрыти при Совете ббинистрое СССРОпубликовано 14.1 Х.1970. Бюллетень2 Дата опубликования описания 23.Х 11.1970"; т й,к"1 т 1 СВАвторыизобретения Е. А. Морозова и М. А. Зеваильовский ордена Ленина и Трудового Красно государственный университет им. Ломонос Знаме га аявитель СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГЕПТАПЕПТ антибиотика полимиксина аменимой аминокислотойаминомасляной кислоты) ой интерес, так как извемена в низших пептидах 5 нию биологической актив- и уменьшению токсичнокислоты: 1 Ф -лнзин; Б 01 изин; К" -п О -1.-т еони ический метод получения полифункциональных амитреонин), многостадиен, ак как требует выделения тки всех промежуточных -, тетра-, пента-, гексапепчен:по времени и дает низсинтеза аналогичных пепдней, выход, считая на ту, не оолее 5%. Способтвердофазным методом орметилированном полиме 5 способ получения гептапептида КБЗ.-лизил. - треонил - М" - пезил-Х -КБЗ.-лизил.-треонилл-Р-лейцина, заключающийся в 2 -бутоксикарбонил (БОК) -Р-лейреакцию с хлорметилированным к полученному после снятия заы Р-лейцилполимеру присоедиутствии дициклогексилкарбоди Предложен Х"-БОК-К- ларгонил.-ли 1 ч -КБЗ-лизи том, что трет цин вводят в полимером и щитной групп няюг в прис Синтез аналоговМ с,природной незлизином (вместо дипредставляет большстно, что такая заприводит к повышености, а возможно,сти.Известный класспептидов, особенно,нокислот (лизин,очень трудоемок, ти тщательной очиссоединений ди-, тритидов, более длите,кие выходы. Времятидов,примерно 30первую аминокислополучения пептидовМеррифилда на хлре. имида последовательно аминоБОК, М- -карбобензокси (КБЗ) -1.1.-треонин; М"- -БОК, М -КБЗ.-л еларгонил, г 1 -БОК.-лизин; Б К р н; Ы- -БОК, 1 Ф -КБЗ-лизин,Для получения высокого выхода в каждом цикле оерут 1,5 люль последующей аминокислоты. Все побочные продукты реакции и избыток исходных аминокислот отделяют от нерастворимого пептидполимера промыванием растворителями (например, спиртохг, диоксаном, тетрагидрофураном и др,), Гептапептид отделяют от смолы обработкой водноспиртовым раствором щелочи, например воднометанольным раствором КаОН, После подкисления лимонной кислотой и соответствующей обработки получают гептапептид с выходом 77%, считая па Р-лейцин, присоединенный к полимеру. П р и м е р, 5 г хлорметнлированного полимера и 3 г БОК-лейцина кипятят 48 час в абсолютном этилацетате с 1,8 игл абсолютного триэтиламина. БОК-Р-лейцил-полимер переносят в реакционный сосуд, в котором проводят все операции, связанные с наращиванием пептндной цепи. БК-защитную группу удаляют 100 гг 0-ным раствором НС 1 в абсолютном диоксане. Смолу промывают абсолютным диоксаном и спиртом, нейтрализуют полученный хлоргидрат 10%-ным раствором триэтиламинаЗаказ 3514 у 2 Тираж 480 ПодписноеЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, Ж, Раушская набд. 4/5 Типография, пр. Сапунова, 2 в диоксане и снова промывают смолу диоксаном и метаном. По весу полученного хлоргидрата триэтиламина определяют, что к 5 г смолы присоединилось 43% БОК-Р-лейцина (0,006 моль),Гептапептид получают последовательным присоединением к лейцилполимеру аминокислот: БОК, КБЗ.-лизина; БОК-треонина; БОК, КБ 3-1.-лизина; 1 Ф -пеларгонил, БОК-лизина; БОК.-треонина; Хф -БОК, 1 Ч -КБ 3-1.-лизина,Раствор 0,01 ноль 1 Ф -БОК, Х- -КБ 3-1.-лизина в 20 лл тетрагидрофурана (ТГФ) и 0,01 моль дициклогексилкароодиимида в 10 лл ТГФ смешивают при - 20 С и быстро добавляют к Р-лейцилполимеру. Реакционную смесь перемешивают до полного набухания полимера и оставляют на ночь при 20, после чего, раствор фильтруют (с насосом) и пептидполимер промыва я-бутанолом, нагретым до 50 С, для извлечения дпциклогексилмочевины.Гептапептид отделяют от смолы обработкой метанольным раствором МаОН. После подкисления лимонной кислотой и соответствующей обработки получают и-гептапептид Кф -БОКИ - КБЗ-.-лизил-.-треонил-У - пеларгонил.-лизил-У -КБ 3-1.-лизил.-треонил-У -КБЗ.-лизил-Р-лейцин с 77%-ным выходом, считая на Р-лейцин, присоединенный к полимеру; т. пл, 108 С (метанол - эфир); гчво - 17,0 С; хроматографически однородное соединение,Найдено, %: С 59,46; Н 7,89; И 10,07.Вычислено %: С,59,88; Н 7,94; Х 10,11,Предмет и з о бр етени я1. Способ получения гептапептида М" -БОК,10 К- -КБ 3-1.-лизил.-треонил-У -пеларгонил.- лизил-Х- -КБЗ.-лизил.-треонил-У -КБ 3-1.- лизил-Р-лейцина, отличающийся тем, что Изащищенный Р-лейцин подвергают взаимодействию с хлорметилированным полимером и15 далее присоединяют последовательно соответствующие аминокислоты известным методом,например карбодиимидным, с последующимотделением целевого продукта от полимераобработкой щелочью.20 2, Способ по п. 1, отличающийся тем, чтоприсоединяемые к Р-лейцилполимеру аминокислоты берут в количестве 1,5 моль,3. Способ по,пп, 1 и 2, отличающийся тем,что Х-защитные БОК-группы удаляют обра 25 боткой 10%-ным раствором НС 1 в абсолютномдиоксане.4. Способ по пп. 1 - 3, отличающийся тем,что целевой продукт отделяют от полимераобработкой метанольным раствором щелочи.