Способ концентрирования эндонуклеазы из яда кобры
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 1721087
Автор: Ямковой
Текст
(51)5 С 12 й 9/22 ИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ОПИС иГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТПРИ ГКНТ СССР АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬ(56) Скоупс Р. Методы очистки белков, - М.: Мир, 1985, с.255.Василенко С.К., Райт В,К. Метод получения высокоочищенной рибонуклеазы из яда кобры. - Биохимия, 1975, т.40, М 3, с,578-583.54) СПОСОБ КОНЦЕНТРИРОВАНИЯ ЭН- ДОНУКЛЕАЗЫ ИЗ ЯДА КОБРЫ Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для концентрирования выделенной из яда кобры эндонуклеазы,Известен способ концентрирования выделенной из яда кобры эндонуклеаэы, осуществляемый путем упаривания растворителя из.целлофанового диализного мешка с раствором фермента в токе холодного (4-6 С) воздуха, последующего диализа эндонуклеаэы против буфера 0,02 М трис -НО (рН 7,8) и последующего заморажйвания фермента при -20 С.Недостатками известного способа являются значительные потери активности эндонуклеазы при концентрировании и сложности с условиями хранения эндонуклеазы, предусматривающие наличие надежного кальвинатора. Цель изобретения - снижение потерь эндонуклеазы при концентрировании. и упрощение условий хранений целевого продукта,(57) Изобретгии и можеттрированияэндонуклеазМОЩЬЮ ЭТОГОдов. Целью ипотерь андонии и упрощго продукта,в раствор фтоке воздуханой концентцентрировзндонуклеаз ение относится к биотехнолобыть использовано для конценвыделенной из яда кобры ы с целью производства с по- фермента олигорибонуклеотизобретения является снижение нуклеазы при концентрироваении условий хранения целевоСпособ заключается в том. что ермента перед упариванием в добавляют альбумин до конечрации 0,05 - .0,5 мг/мл, а сконанную и отдиализованную у лиофилизуют,В раствор фермента перед упариванием в токе воздуха добавляют альбумин до конечной концентрации 0,05-0,5 мг/мл, а сконцентрированную и отдиализованную эндонуклеазу лиофилиэуют.П р и м е р, Концентрирование эндонуклеазы проводят при 4 - 6 С. Фермент, выделенный из 1,5 г сухого яда кобры путем последовательного фракционирования раствора яда гель-фильтрацией на сефадексе 6-75 (сверхмелком) и катионообмен ной хроматографией на ЯР-сефадексе С(объем 121 мл), помещают в целлофановый диализный мешок, вносят в него 20 мг(0,165 мг/мл) альбумина из сыворотки крови человека (99 ва, США) и упаривают до 8 мл в течение 3 сут в токе воздуха, периодически ополаскивая внешние стенки мешка дистиллированной водой, Сконцентрированный раствор эндонуклеазы диализуют против двух порций по 1 л 0,02 М трис-НС 1-буфера (рН 7,8) в течение суток, Конечный объем 17,8 мл, потери фермента 18%. Затем препарат лиофилизуют, Потерь фермента нет.1721087 Составитель б. ЯмкоеойРедактор И.Дербак Техред М.Моргентал Корректор Н,Ревская Заказ 928 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул, Гагарина. 101 Лиофилиэованный препарат эндонуклеазы хранят в герметично закрытых флаконах при 4-6 фС без потери активности, покрайней мере, в течение 5 лет,Способ обеспе извет снижение потерь 5зндонуклеаэы при концентрировании в 4,8раза (с 86 до 18), а также возможноеть,хранения фермента в обычном холодильнике при 4-бфС и даже при комнатной твмпв.ратуре в течение нескольких недель. 16Формула изобретенияСпособ концентрирования эндонуклеазы из яда кобры, включающий упаривание растворителя иэ целлофанового диализного мешка сраствором фермента в токе воздуха при 4-6 С и последующий диалиэ эндонуклеэзы против 0,01-0,02 М трис-Н С-буфера, рН 7,8, о тл и ч э ю щ и й с я тем, что, с целью снижения потерь эндонуклеаэы при концентрировании и упрощения условий хранения целевого продукта, в раствор фермента перед упариванием добавляют эльбумин до конечной концентрации 0,05-0,5 мг/мл, а сконцентрированную и отдиализованную эндонуклеаэу лиофилиэуют.
СмотретьЗаявка
4779880, 09.01.1990
НОВОСИБИРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМ. ЛЕНИНСКОГО КОМСОМОЛА
ЯМКОВОЙ ВИТАЛИЙ ИВАНОВИЧ
МПК / Метки
МПК: C12N 9/22
Метки: кобры, концентрирования, эндонуклеазы, яда
Опубликовано: 23.03.1992
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-1721087-sposob-koncentrirovaniya-ehndonukleazy-iz-yada-kobry.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ концентрирования эндонуклеазы из яда кобры</a>
Предыдущий патент: Способ культивирования молочнокислых бактерий sтrертососсus lастis
Следующий патент: Способ культивирования клеток животных в полимерных гранулах
Случайный патент: Прутковый элеватор корнеклубнеуборочных машин