Способ определения фибриногена в крови

к пределяютадации ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТПО ИЗОБРНЕНИЯМ И ОтНРЫГПРИ ГКНТ СССР(71) Всесоюзный гематологиучньш центр(56) Балуда В.П. и др. Лабметоды исследования системьза, Томск, 1980 с. 13.ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФИ Изобретение относится к медицине,а имейно к диагностике и контролю лечения больных с патологическими изменениями функции гемостаза как в стационаре, так и в амбулаторных условиях,Цель изобретения - повышение, точности способа за счет одновременного .определения фибрйногена и продуктовего деградации без пункции вены.Способ осуществляют следующим образом.Из пальца берут О, 1-0,3 мл капил-лярной крови, разводят в 0,5 мл ста-билизирующего раствора, приготавляе-.мого из расчета: 5 мл физиологического раствора, 1 мл 2 О,47-ного раствора .цитрата натрия, 87 мг Е-аминокапроно вой кислоты, определяют содержание 1 2лечения больных с нарушениями гомеостаза. Целью является повышение точности способа за счет определения дополнительно всех продуктов деградациифибриногена, Цель достигается тем,то кровь из пальца перед инкубациейв фосфатно-солевом буфере обрабатывают стабилизирующим раствором, содержащим .цитрат натрия, Е-аминокапроновую кислоту и физиологический раствор. Затем после олределения фабриногена иммуноферментным способом пробукрови дополнительно инкубируют стромбином и далее в фосфатно-солевомбуфере, Продукты деградации фибриногена определяют тем .же иммуноферментным методом,фибрийогена в указанной пробе, а затем, обработав тромбином, оконцентрацию продуктов дегрфибриногена.По полученным данным нормальное содержание фибриногена составляет 2,55+0,12 мг/мл (2,5510,12 г/л), ПДФ 49,9 ф 0,24 мкг/мл.П р и м е р 1. Материалом для исследования явилась капиллярная кровьдонора. Прокол кожи на пальце производят по общепринятой методике. Глубина прокола 4 мм. Первые две капли не учитывают, последующие 0,3 мл набирают в пластиковую посуду, содержащую 0,5 мл стабилизатора (приготовленного в соотношении 5 мл физиологического раствора, 1 мл 20,47-ного ра.Стебаева чух створа цитрата натрия и 78 г Е-аминокапроновой кислоты). Для определения фибриногена пробустабилизированной крови разводят в10000 раэ. Сначала в 100 раз. 0,857. -ным раствором хлористого натрия путемдобавления к 10 мкл 0,99 мл ФосФатносолевого буФера с твином (содержащего03 моль/дм натрия хлористого,0,2 моль/дм ФосФорно-кислого натрия,твиндобавляют из расчета 50 мклна 100 мл раствора). Затеи определяютсодержание Фибриногена иммуноФерментным методом, которое составило у донора 2,б мг/мл. Для определения продуктов деградации Фибриногена 100 мклобразца стабилизированной капиллярнойкрови обрабатывают раствором тромбина(1 мг тромбина в 3,5 мл 0857,-ногораствора хлористого натрия), выдерживают при комнатной температуре10 мин. Затем 10 мкл супернатантаразводят 900 мкл ФСБР-Т. Определяютсодержание продуктов деградации Фибриногена иммуноФерментным методом,что составило 18 мкг/мл,П р и и е р 2, Материалом для исследования явилась капиллярная кровьсольного 63 года находящегося настационарном лечении с диагнозом,:острое наруиение мозгового кровообращения в правой среднеймозговой артерии, Прокол кожи на пальце производят по общепринятой методике, Первыедве капли не учитывают последующие0,3 мл набирают в пластиковую пробир-.ку, содержащую 03 мл стабилизатора,приготовленного из расчета 5 мл Физиологического раствора плюс 1 мл204%-ного раствора цитрата натрия сдобавлением 78 мг Е-аминокапроновойкислоты).Для определения Фибриногена пробус.абилизированной капиллярной кровиразводят в 10 000 .раз, Сначала 10 мклобразца этой крови-разводят Физиологическим раствором, а затеи к 10 мклразведенного образца прибавляют.990 мкл ФосФатно-соленого буФера сСоставитель ЛРедактор И,Келемещ Техред А.Края твином. Затемопределяют содержаниефибриногена иммуноферментным методом.Оно составило у больного,С, 4 мг/мл,Для определения продуктов деградации фибриногена образец капиллярной крови в объеме 100 мкл смешивают с .10 мкл раствора тромбина (1 мгтромбина в 3,5 мл Физиологическогораствора), выдерживают при комнатнойтемпературе 10 мин, Затем к 10 мклобработанного тромбином образца прибавляют 990 мкл фосФатно-солевого буФера с твином, затем определяют содержание продуктов деградации Фибриногена иммуноферментным способом, оносоставило 112 мкг/мл,Прецложенный способ позволяет достоверно оценить состояние больного,не прибегая к взятию крови иэ вены,а также выявлять полное содержаниеФибриногена и продуктов его деградации в крови,Формула изобретения Способ определения фибринагена вкрови, путем ее инкубации в, фосФатносолевом буФере с последующим иммуноФерментным определением Фибриногена,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, сцелью повышения точности способа путем определения продуктов его, деградации исследуют капиллярную кровь,которую до инкубации обрабатываютстабилизируаци раствором, содержащемцитрат натрия, Е-аминокапроновую кислоту и Физиологический раствор приследующих соотнощениях компонентов,мас,ч"Цитрат натрия 200-210Е-аминокапроноваякислотаФизиологическийраствор . Остальноепосле определения Фибриногена кровьдополнительно инкубируют в течение 910 мнн с тромбином, а затем обрабатывают ФосФатно-солевым буФером и определяют продукты деградации Фибриногеня,Корректор И,СамборскаяТираж Подписное ВНИИВ;1 Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, %-35 Ра 1 лаская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101