Способ окрашивания перехватов ранвье

)5 6 01 й 1/3 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТ ОУУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 2.Павлова 5 еггосуа п 1 бе с уос е(т(с а о 1 РаМег. -55-570.Я ЕРЕХВАмедицине, а ль изобрете- окрашенных Изобретение относится к м частности к нейрогистоло(ии.Цель изобретения - повыше ва окраски эа счет увеличения окрашенных перехватов Ранв волокон,едици и г е качестолпчестванервных Окрашивание по предла бу включает фиксацкю в 5 дегиде на дистиллиров инкубацию в течение 1 ч в ра го железа и затем в растворе калия с последующей залив скопического исследования,после двух ч," а с ч ь х ку Г л инкуб, р,от в .-".",о о(л серебра в течение 10-20 1,5 + 0,5;,-ном растворе фе лия, используют глутаральдриц анида гид на дист ГОСУДАРСТВЕННЬ(Й КОМИТЕТ110 ИЗОЕРЕТЕИЯМ И 01 КРЬ(ТПРИ ГК 11 Т СССР гаемому спосо-ном глутаральанной вуде,створе хлорноферроцианида кой для микро- дополнительно зц, ( преала - , и 27 - 30 мин в перехватов Ранвье нервных волокон. Цель достигается многоступенчатой обработкой нервных волокон. Вначале их фиксируют 2 ч в 5%-ном глютаровом альдегиде на дистиллированной воде, затем инкубируют 1 ч в 0,01 М растворе хлористого железа (р 1 1,5) и 20 мин 817,-ном рас воре желтой крг вя ной соли (рН 2,0), Затем нервные волскна инкубируют 10-20 глин ь 3-4;-ном растворе нитрата серебра и после этого 27 - 30 миг( в 1,5 +.0,5; растворе красной кровяной со ли (рН 2), Затем препараты заключают э глицерин-желатин и иэу(а(от под ве 1 осы(л микроскопом. лированнои воде, а заливку осуществляю гл цзрин-желатин,П р и м е р 1. Кролика после предварительного эфирного наркоза умерщвляли декапитацисй. После этого в районе подколенной ямки обнажали седалищнь(и нерв и вырезали его часть и вырезали его часть длиной 1 см, Нерв фиксировали 2 ч в 50-ном глутаральдегиде на дистиллированной воде. Объем фиксирующей жидкости 40 мл. Затем нерв промывали в 5 порциях дистиллированной воды 4 раза, Потом под микроскопом МССО тонкими иглами удаляли с нерва эпиневрий, После удалеля з; иг(е- рия о" ново г(Рф)ян(с (-л р .; -, -;.т-,на ряд боле тонких нервных пу.(ков (.,иной 0,5-1 мм, которыс выделяли к далее проводили по растворам отдельно.1707499 Формула изобретения Способ скрашивания перехватов Ранвье, включающий фиксацию в глутаровом альдегиде, инкубацию в течение 1 ч в растворе хлористого железа и затем в растворе ферроцианида калия, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что с целю повышения качества окраски за счет увеличения в препарате количества окрашенных перехватов Ранвье, дополнительно проводят инкубацию в 3- 4-ном растворе нитрата серебра в течение 10-20 и 27-30 мин в 1,5 й 0,5;(,-ном растворе феррицианида калия. Составитель А.ДревальРедактор О.Юрковецкая Техред М.Моргентал Корректор Т.Палий Заказ 262 Тираж ПодписноеВНИИРИ Госуд;р;,т-он гс;.;.",т;г изобр 1 ениям и открь тиям при ( КНТ ГССР113035, (А,скьа, Ж-Зэ, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент, г. Ужгород, ул.Га)арина. 101/ Выделенные нервные пучки после этого инкубировали 1 ч в 0.01 М растворе хлорного железа (рН 1,5), рН раствора доводили 0,1 н соляной кислотой, а затем проверяли по рН- метру. Далее нервы промывали 5 раэ по 5 5 мин в дистиллированной воде, Затем нервные пучки инкубировали 20 мин в 17 ь-ном растворе желтой кровяной соли (рН 2), рН . раствора доводили как указано. Промывали нервы в 5 порциях дистиллированной воды 10 по 5 мин. После этого инкубировали нервы 20 мин в 3-ном растворе нитрата серебра. Промывали в 5 порциях по 5 мин дистиллированной воды, Затем инкубировали нервы 30 мин в 1-ном растворе красной кровя ной соли (рН 2). Промывали нервы в 5 порциях дистиллированной воды по 5 мин. После этого заключали нервные пучки на предметные стекла в глицерин-желатин, . Сразу после этого препараты можно изу- чать под световым микроскопом, 20Результаты. У 50 произвольно выбранных волокон на протяжении 880 мкм было обнаружено 29 окрасившихся перехватов. У 50 волокон, обработанных по способу-прототипу, на протяжении 880 мкм удалось вы яви 1 ь лишь 2 окрашенных перехвата.П р и м е р 2. Лягушку умерщвляли декапитацией. После этого вырезали участок седалищного нерва в области бедра длиной 0,5 см. Фиксировали, как и в приме ре 1. После промывки в дистиллированной воде снимали эпиневральную соединительнотканую оболочку. Затем нерв проводили по растворам тем же способом, как и в примере 1. Нервы заливали в глицерин-жела тин. Результаты, В перехватах Ранвье выпал темно-кор(.",невый осадок, У 50 произвольно выбранных волокон на протяжении 889 мкм было обнаружено 48 окрашенных перехватов, а у обработанных по способу-прототипу б.П р и м е р 3. Лягушку умерщвляли декапитацией. После этого вскрывали спиномоэговой канал и выделяли левый дорсальный корешок Х пары спиномозговых нервов. Затем осуществляли с нервом те же операции, что и в примерах 1 и 2,Результаты. В толстых нервных пучках мякотных афферентных волокон выявились перехваты Ранвье и насечки Шмидта-Лантермана. У 50 произвольно выбранных волокон на расстоянии 880 мкм было обнаружено 36 перехватов Ранвье, У такого же количества волокон на расстоянии 880 мкм из нервных пучков, обработанных по способу-прототипу, выявлено 19 окрашенных перехватов, насечки Шмидта-Лантермана не выявились.