Способ определения липопротеида печени в циркулирующих иммунных комплексах в крови

) С 01 И 33/ МИТЕТтнРытия ОСУДАРСТВЕННИИГ 1 о изобретениям ипи гкнт сса НИЕ ИЗО Изобретени гии, а именно специфическог лирующих имму крови больных относи метод иммунололедованияциркух (ЦИК) в роническ папроте оптиче ду печеьи кой платп тек мплекдиагнос- мембраны к трыми з еваниями зобретенфичности ечени ю я является павып пределения лико го при разрушен ние специ отеида,еток печ Способ ь еляе ществляется с щим разом. В свя нньх С 1, е липопр ата щепа улином б 1 ИК про водятсвязываределенинию конъюиммуногло скии лип еида ой Ь иммуи зи актом Фр атазы сыворотки ьей(71) Тартуский государственный университет(56) Авторское свидетельство СССРф 1327005 ь кл, С 01 И 33/53, 1985.(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛИПОПРОТЕИДАПЕЧЕНИ В ЦИРКУЛИРУЮЩИХ ИММУННЫХ КОМПЛЕКСАХ В КРОВИ(57) Изобретение относится к иммунологии и может быть использовано приисследовании специфического липопротеида в циркулирующих иммунных комплексах (ЦИК) в крови больных с острыми и хроническими заболеваниямипечени. Целью изобретения является 801651214 повышение специфичности опрелеьениялипопратеида, выделяемого при нарулени:, клеточной мембраны печею.Согласно способу, циркулирующие иммунные комплексы в крови связываютсубкомпонентом комплемента С 1 и опЧределяют оптическую плотность субстрактнога реактива. Определениелипопротеида в ЦИК производят по связыванию конъюгата щелочной фосфатаэыс иммунаглобулином 180 сыворотки бараньей крови к специфическому липо-протеиду ечени, Начиная с 0,3 ед,оптической плотности субстракнагореактива, диагностируют поражениеклеточной и мембраны гечени. Ог.редс- аление клеточного липопратеида позволя вет диагностировать нарушение клеточ-"ных мембран при патологических процессах,Г" к специфическому лии начиная с 0,3 ед.ности субстратного реактивтируют поражение клеточнойпечени .Приммаге ниэируюрозы с рН 8выделяют сматографиче6 В, раствор(рН 8,5),тограммы,е р. Печень от донора гот в 0,25 М растворе саха,О. С помощью центрифуги упернатант, помещают в хроскую колонку с сефарозойенной в барном буфереВыделяют первый пик хрома при этом получают специфипротеид печени, которым уют баранов с полным адъюда и добавлением коклюш1651214 Способ позволяет при остром и хроническом гепатите выявить в крови больного ЦИК, содержащие специфический липопротеид печени - антиген мембраны печеночной клетки, имеющий большое патогенетическое значение для развития аутоиммунных и вирусных гепатитов. Формула изобретения Составитель И. БашкаавТехред И.Моргентал Корректор Н.Ревская Редактор Н.Бобкова Заказ 1604 Тираж 419 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Ргушская наб., и. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г,ужгород, ул. Гагарина,101 ной вакцины. Из этой иммунной сыворотки к специфическому липопротеиду печени выделяют гамма-глобулин и иэнего 1 аС с помощью ионообменной хроматографии в ДЕАЕ-целлюлозы с сросатным буФером (рН 8,0),Выделенный иммуноглобулин 1 яС коньюгируют с помощью 4, 2 -ного раствораглютаральдегида со щелочной Аосфатазой.Субкомпонент комплемента С 1выделяют из свежей сыворотки свиньи двухзтапным преципитированием с 0,03 и0,069 И ЭДТА. Выделенный С 1, разбавля ют в карбонатно-бикарбонатном бункере1 рН 9,6) и связывают на, полистирольном планшете.С С 1 связывают ЦИК кэ сыврроток%обследуемых лиц, Содержание специ 4 щческого липопротеида в ЦИК определяютс помощью конъюгата щелочной фосатазы к специфическому липопротеидупечещ. Освобождение щелочной фосфатазы определяют по оптической плотности субстратного реактива паранитроФенилфос 4 ета. Оптическую плотностьопределяют при длине волны 405 нмсчетчиком ЭуааеесЬ,При 0,3 ед. оптической плотности 30реакционного продукта определяютпоражение клеточной мембраны печени,Способ определения липопротеида печени в циркулирующих иммунных комплексах з крови, включающий связывание дркулирующих иммунных комплексов субкомцлементом комплемента С 1 и определение оптической плотности . убстратного реактива., о " л и ч а ющ и й с я тем, что., с целью повышения специфичности определения липопротеида, выделяемого при нарушении клеточных мембран, после связывания имгунных комплексов, добавляют раствор конъюгата иммуноглобулина 1 дС к специфическому липопротеиду печени с щелочной осатазой и при наличии 0,3 и более единиц оптической плотности определяют липопротеид, выделяеьщй при нарушении клеточных мембран.