Способ определения жизнеспособных протосколексов эхинококка в пробе in viтrо

, 1+11 ицин ои паразитологии и им.Е.И.Марциновицин ый научный центр киру Шатверян, П.С,Хакв, Т,Е.Буланова, мов Аб а Асадетае Ясеп 1 агогпо.20, Мг 3, р. 339 - 351. ЕДЕЛЕНИЯ ЖИЗНЕСПСКОЛЕКСОВ ЭХИНОКОТБО(54) СПОСОБ О СОБНЫХ ПРО КА В ПРОБЕ 11 ускорение и повысти способа,ется следующим обЦель изобретенияшение воспроизводи Способ осуществл азом. ве екло помещают д мых протосколексов воре. Первая капля- тестируемая, С пой бумаги из второй огический раствор и На предметное ст капли взвеси исследуе в физиологическом раст контрольная, вторая - мощью фильтровально капли удаляют физиол наносят на протосколек сы 1 каплю гл ОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ СКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(71) Институт медтропической медского и Всесоюэнгии АМН СССР(56) Асса ЧетегпагНопцапсае, 1970,Изобретение относится к медицине и ветеринарии и может быть использовано в исследованиях по экспериментальной терапии эхинококкозов,.,Ж, 1635961(57) Изобретение относится к медицине и ветеринарии и может быть использовано в исследованиях по экспериментальной терапии эхинококкозов, Цель - ускорение и повышение воспроизводимости способа. Для этого на каплю исследуемого материала наносят каплю глицерина, покрывают покровным стеклом и микроскопируют при малом увеличении. У живых протосколексов под влиянием глицерина наблюдается контрактурз тела, При этом протосколексы уменьшаются н размере в 1,5 - 2 раза по сравнению с контролем, утрачивают округлую форму, известковые тельца становятся невидимыми, Укаэанные изменения наступают через 1 - 2 с и наблюдаются в течение 30 - 40 мин после добавления глицерина. Способ прост, быстро выполним, хорошо воспроизводим. на, Обе капли покрывают покровными стеклами и тотчас подвергают микроскопии при малом увеличении микроскопа. У живых протосколексов под влиянием глицерина наблюдается контрактура тела, При этом протосколексы уменьшаются в размере в 1,5 - 2 раза по сравнению с контролем, утрачивают округлую форму, приобретают неправильные очертания, паренхимы тела протосколексов просветляются, известковые тельца становятся невидимыми. По внешнему виду протосколексы напоминают кристаллы, Указанные изменения наступают через 1 - 2 с и наблюдаются в течение 30- 40 мин после добавления глицерина. У погибших протосколексов при добавлении1635961 Формула изобретения Способ определения жизнеспособных протосколексов эхинококка в пробе п чтго. включающий обработку пробы химическим агентом, микроскопию, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью ускорения и повышения воспроизводимости способа, пробу обрэбэтывают глицерином и при наличии контрактуры тела протосколекса определяют его жизнес пособн ы м. 50 Составитель И. ЛитвиненкоТехред Э Цаплюк Корректор Л,Алексеенко Редактор И,Горная Заказ 831/91 Тираж 445 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва. Ж, Раушская наб, 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г Ужгород, ул.Гагарина, 101 глицерина указанные изменения при сравнении с контролем не наблюдаются,П р и м е р, У больной Г., 57 лет, с диагнозом эхинококкоз печени, подтвержденный компьютерной томографией и серо- логическими исследованиями, проведена оценка эффективности интраоперационного обезвреживания зародышевых элементов эхинококка, Во время операции в 8-ом сегменте печени выявлена эхинококковая киста диаметром 8 см, Киста вскрыта, содержимое ее удалено, Остаточная полость обработана 2 о,-ным раствором формалина по Спасокукоцкому, Перед вскрытием эхинококковой кисты последнюю пунктировали и определяли наличие и жизнеспособность протосколексов эхинококка, В 20 мл пунктата после 5 мин отстаивания удаляли насадочную жидкость и заменяли ее физиологическим раствором, затем после 5 мин отстаивания соби- рэли шприцем осадок, из которого наносили 2 капли на предметное стекло; 1 каплю контрольную, вторую - тестируемую, В тестируемую каплюдобавляли глицерин и подвергали микроскопии,В контрольной и тестируемой каплях при микроскопии выявлены протосколексы эхинококка. В тестируемой капле после добавления глицерина у всех 36 протосколексов отмечена выраженная контрэктура тела и другие морфологические изменения, что свидетельствовало о жизнеспособности протосколексов в эхинококковой кисте перед удалением ее содержимого, Эффективность обезвреживания протосколексов раствором формалина в остаточной полости Фибброзной капсулы определяли путем воздействия на протосколексы, выделенные в смыве физиологическим раствором из остаточной полости после удаления из последнеи раствора формалина, 100 мл смыва помещали в стеклянный стакан и после 10 мин отстаивания удаляли надосадочную жидкость, Заменяли ее свежим Физиологическим раствором. Через 5 мин отстаивания забирали шприцем осадок, из которого 2 капли наносили на предметное стекло; одну каплю контрольную, вторую - тестируемую, В тестируемую каплю добавляли глицерин и подвергали обе капли микроскопии,В контрольной и тестируемой каплях 5 выявлено соответственно 8 и 14 протосколексов эхинококка. В тестируемой капле после добавления глицерина у протосколексов не обнаружены контрактура тела и другие морфологические изменения по сравнению с контролем, что свидетельствовало о их гибели и эффективности интраоперационного обезвреживания раствором формалина,Таким образом, предлагаемый способобеспечивает повышение скорости, точности, упрощение и удобство метода определения жизнеспособности протосколексов эхинококка, Повышение скорости достигается быстрым появлением дифференцирующего признака - контрактуры тела паразита, наступающей через 1 - 2 с после добавления глицерина к живым протосколексам. Повышение точности достигается тем, что на результэ 1 ы тестирования не влияют наличие и степень окрашивания инкубационной среды и исходное состояние морфологической структуры протосколексов, а дифференциальный признак жизне способности паразита в течение 30 - 40 миннаблюдения, Упрощение метода достигается тем, что он основан на хорошо различимом критерии - контрактуре тела живого паразита с уменьшением его размера в 1,2 - 2 раза 35 по сравнению с исходным, что не требуетспециальной подготовки оператора.