Способ моделирования паркинсонического синдрома

СОЮЗ СО 8 ЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИРЕСПУБЛИК 0 51)5 С 09 В 23/28 САН ИЗОБРЕТЕНИДГП:-ЛЬСТВ У цин в из кг. и их ердозе с т-ание ения патоогии,Способ ногоогич-глобу.уществляют следующ ГОСУДАРСТ 8 ЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР К АВТОРСКОМУ СВИ(71) Научно-исследовательский институт общей патологии и патологическойфизиологии АМН СССР(57) Изобретение относится к медиИзобретение относится к м а именно к неврологии,Цель изобретения - повыш ности способа за счет прибл модели к течению естественн образом,Конъюгат дофамин-белок синтезируют с использованием диазотированного белка. В качестве белкового носителя используют бычий сывороточный.альбумин. Синтезированный конъюгатвыделяют гель-хроматографией на се-,фадексе, Количественное содержаниедофамина в конъюгате определяютспектрофотометрически по приростуоптической плотности в конъюгате посравнению с белком-носителем с учетом поглощения дофамина. Полученныйконъюгат содержит 30 молекул дофамина на 1 молекулу белка. Для иммунизацине, а именно к неврологии. Цельизобретения - повышение точностиспособа за счет приближения моделик течению естественной патологии.С этой целью в хвостатые ядра мозгаживотного вводят 200 мкг гамма-глобулина, содержащего антитела к дифамину. Применение способа позволяетповысить точность моделирования паркинсонического синдрома по сравнениюс прототипом за счет приближениямодели к течению естественной патологии за счет воздействия на дофаминергические структуры хвостатыхядер. ции используют кроликов-самцо породы Шиншила массой 2,5-2,7Уровень антител к дофамину специфичность определяют в тв фазном Иммуноферментном анали использованием в качестве тес тигена конъюгата, синтезирова по той же схеме, но на гетерол ном белковом носителе - гамма лине лошади. Гамма-глобулин из имунных сывороток выделяют методом переосаждения сульфатом аммония. Гамма-глобулин0 лиофилизируют и хранят при +4 С.Для внутримозгового введения используют гамма-глобулины, очищенные от антител к белку-носителю методом аффинной хроматографии с.использованием в качестве иммуносорбента сефарозы 4-В с иммобилизованным на ней бычьим сывороточным альбуми 1561084ном, а также сывороточные гамма-глобулины неиммунизированных кроликов.За 7 сут. до введения гамма-глобулинов животному проводят стерео 5 таксическую операцию вживления электродов и канюль в правое и левое хвостатые ядра. Перед операцией крысе вводят гексанал из расчета 150 мг/кг массы тела.10В хвостатые ядра крыс линии Вис,тар массой 270-350 г по координатам стереотаксического атласа мозга при ,помощи микрошприца вводят по 200 мкг в 5 мкл гамма-глобулины, содержащие антитела к дофамину, полученные из сывороток кроликов, иммунизированных конъюгатом дофамин-белок, Используют гамма-глобулины, очищенные от антител к белку-носителю методом аффинной хроматоГрафии. Регистрируют электрическую активность хвостатых ядер и актограмму, Оценивают основную триаду симптомов паркинсонического синдрома: олигокинезию,25 ригидность, тремор.П р и м е р. Подопытной крысе за , 7 сут, до моделирования паркинсонического синдрома проводили стереотаксическую операцию вживления электродов и канюль в правое и левое хвостатые ядра. Перед операцией крысе вводили гексенал .из расчета 150 мг/кг массы тела. Вживление электродов и ка" июль проводили в стереотаксическом аппарате по координатам атласа мозга крысы. Униполярные нихромовые электроды вживляли по следующим координатам: А = -2, с = 2,5, Н = 4,5. Канюли вводились по координатам:40 А = -2, о = 2,5, Н = 5.Через 7 сут. после проведения стереотаксической операции проводили запись электрической активности хвостатых ядер и исследовали поведение крысы в открытом поле и в камере-актографе, Эти показатели состояния центральной нервной системы не обнаруживали каких-либо отклонений от нормы.50В этих условиях под легким эфирным наркозом в стереотаксическом аппарате через вживленные канюли вводили гамма-глобулины, содержащие антитела к дофамину, из расчета 200 мкг в объеме 5 мкл в каждое хвостатое ядро.После выхода из наркоза крысу помещали в камеру-актограф. Электрокаудатограмму и поведенческую активность регистрировали непрерывно1в течение 8 ч. в первые сутки и втечение 3 ч. на вторые сутки.Через 5 мин. после внутрикаудатного введения антител к дофамину на электрокаудатограмме возникали одиночные и групповые высокоамплитудные (до 700 мкВ) колебания Начиная с 10-й минуты регистрировали периоды высокоамплитудной активности продолжительностью 27 - 66 мин. с преобладанием колебаний тетаподобного;". диапазона с амплитудой до 600-700 мкВ. Мощность разряда достигала 1440 мкВ/с.Начиная с 12-й минуты после введения антител к дофамину наблюдали олигокинезию с периодами "застывания". Через 17 мин развивалась устойчивая акинезия, отдельные периоды которой достигали 2 ч 40 мин.Через 21 мин после введения антителвозникал среднеамплитудный тремор головы и развивалась ригидность.Периоды высокоамплитудной активности и приступообразный тремор головы регистрировали на протяжении22 ч,30 мин.Применение предлагаемого способа позволяет повысить точность модели-рования паркинсонического синдрома по сравнению с известным за счет приближения модели.,к течению естес- венной патологии за счет воздействия на дофаминергические структуры хвостатых ядер.Формула изобретенияСпособ моделирования паркинсонического синдрома путем создания уживотного недостаточности дофаминергической системы хвостатых ядер,о т л и ч а ю щ и й с я тем, чтос целью повышения точности способаза счет приближения модели к течению естественной патологии, в хвостатые ядра мозга вводят 200 мкггамма-глобулина, содержащего антитела к дофамину,