Способ определения активности холинацетилтрансферазы в ткани сердца

Номер патента: 1555671

Авторы: Винницкая, Кузнецов, Пономарев, Тришкин

ZIP архив

Текст

(19) (111 51)5 С 01 ИЗЗ 6 ТЕНИ ВУ ВТОРСКОМ И ТЕЛИзоб имениивностХАТ),сывотона о ем и пцение чувфинал 0 мкл бретения - повь ти и упрощениеэкстракции н14.выделение С-АХ, позволяющ ить продукт ре изо посо твительносутем замен хромато- ацетилее более ечени рафическоеолина14 С олно выдел ии ос 2 М у КЦ Рдце крысы держащей-фосфатного 1 0 2 мМ ельное лоннатрии ОмММ и 0,5% ии 1:1 Тритона(м/ч). Го- содержа- трий-фосфатИяс 110 М хоС-АсКоА мкл енно анол 100 г ости т в сре 24 мМ н ), 6 мМ ицилата 0,25 мМ ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗ(71) 1-й Московский медицинский институт им. И,М,Сеченова, Институтмедико-биологических проблем и Научно-исследовательский институт мозгаВсесоюзного научного центра психического здоровья АМН СССР(56) Л.РЬуз 1 о 1., 1982, ст. 322,р.53-69,тение относится к медицинек способам определения акхолинацетилтрансферазы Пример, Цгомогенизируют в200 мМ ИаС 1, 40 м 1буфера (рН 7,4),эзерин-салицилатаХ, в соотношемогенат инкубирующей 280 мМ МаС 1,ный буфер (рН 7,402 мМ ээерин-саллин-хлорида, 0,2(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИХОЛИНАЦЕТИЛТРАНСФЕРАЗЫ В ТКАНИ СЕРДЦА(57) Изобретение относится к медицине, а именно к способам определенияактивности холинацетилтрансферазы.Цель - повышение чувствительности иупрощение способа. Сущность способасостоит в том, что при радиохимическом определении холинацетилтрансферазы образовавшийся ацетилхолин выделяют на микроколонках с Дауэксом 1в ацетатной Форме, алюируют дистиллированной водой непосредственно йсцинтилляционный флакон при соотношении объемов Дауэкс:вода=1; 1,2-1:5.(5 Ки/моль), 0,5 мг/мл бычьег роточного альбумина и 0,3% Тр Х, Контрольные образцы, к того содержат 2 р М Вг-АХ. Объ следуемого гомогената 30 мкл, ный объем инкубируемой смеси Гомогенаты проб инкубируют в 30 мин при 37 С,Остановку ферментной реа ществляют добавлением 50 мксусной кислоты,Далее пробы наносят на микрококи с 500 мкл Дауэкса 1 х 4 100-200в ацетатной форме и элюируют 700дистиллированной воды непосредствв сцинтилляционный флакон с диоксвым сцинтиллятором, содержащем нараствора: 4 г ППО, 0,2 г ПОПОП инафталина, Количество радиоактивнизмеряют на сдинтилляционном счет1555671 формула изобретения Способ определения активности холинацетилтрансферазы в ткани сердца Составитель А.СабуроваТехред М.Дидык Корректор М.Кучерявая Редактор Н,Бобкова Заказ 554 Тираж 510 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раущская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.уагород, ул. Гагарина, 101 Активность обусловленной ХАТ оценивают по разнице радиоактивности .между суммарным синтезом С-АХ1 Ф (5677,6 расп./мин) и Вг-АХ чувствительным синтезом фС-АХ (3665,8 расп /мин) и она равна 2011,8 расп./мин (1,829 х 10 моль; 1,016 х 10 моль/с и 6 х 10 1 кат/г ткани),путем гомогенизации, добавления холина и 1 " С"1-ацетилкоэнзима А, инкубиГ 1 3рования, остановки реакции, выделенияпродукта реакции, подсчета радиоактив,/ ности, о т л и ч а ю щ и й с я тем,что, с целью повышения чувствительности и упрощения способа, радиоактивный продукт реакции выделяют на 10 микроколонке с Дауэксом 1 в ацетатнойформе, элюирование проводят дистиллированной водой непосредственно в сцинтилляционную жидкость при соотношенииобъемов Дауэкс:вода=1:0,6 - 1:5.

Смотреть

Заявка

4334021, 26.11.1987

1-Й МОСКОВСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ ИМ. И. М. СЕЧЕНОВА, ИНСТИТУТ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИХ ПРОБЛЕМ, НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ МОЗГА ВСЕСОЮЗНОГО НАУЧНОГО ЦЕНТРА ПСИХИЧЕСКОГО ЗДОРОВЬЯ АМН СССР

ТРИШКИН СЕРГЕЙ ВЛАДИМИРОВИЧ, ВИННИЦКАЯ КОНСУЭЛА БОРИСОВНА, КУЗНЕЦОВ ВИКТОР АНАТОЛЬЕВИЧ, ПОНОМАРЕВ СЕРГЕЙ ЮРЬЕВИЧ

МПК / Метки

МПК: G01N 33/68

Метки: активности, сердца, ткани, холинацетилтрансферазы

Опубликовано: 07.04.1990

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1555671-sposob-opredeleniya-aktivnosti-kholinacetiltransferazy-v-tkani-serdca.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения активности холинацетилтрансферазы в ткани сердца</a>

Похожие патенты