Способ исследования энергообмена сердечной мышцы

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 081 д 1 33/48 ОПИСАНИЕ ИЗОбРЕТЕНИ ЛЬСТВУ ВТОРСНОМУ СВИ(57) Изобретение относится к биохимии. Цель изобретения - повышение степени ингибирования. Препарат вводят животным в дозе 10-100 мг/кг и определяют активность пируватдегидрогеназы, Использование тетрагидроокситиаминтрифосфата позволяет на 873 ингибировать активность пируватдегидрогеназы сердца, не изменяя при .этом активности транскетолазы.1 табл. и АН БССР С,В, Забродск т. 48, вып, 6, НИЯ ЭНЕРГООБМЕ 183 Си М 048 вода 2:1:1), б соль растворяют трализуют 2 н.ра (9 мл). Выпагидроокситиамин ровывают и перегорячей воды, В т, пл. 215-217 нол:этанол:вода ологии, и может для ингибирования егидрогеназы сердотных при изуче энергодающих меающих работу серд нтрифосфат.одержащей 4 гной при 125 Тетрагидроокситиами К однородной массе, с(41 ммоль), обезвожен НРО и 4 г (28 ммоль ляют 2 г (7,5 ммоль) амина. Реакционную сме течение 15 мин при 110 40 С и прибавляют 10 г льда. Полученный раств 200 мл охлажденного до водного ацетона. Через ный осадок отделяют 5 мп воды, нейтрализую створом ЯНАЛОВ до рН) Р 10, прибав- тетрагидрокситись перемешиваютв С,охлаждают до измельченного ор выливают в (-5) в (10) С без сут маслообразрастворяют 257.-ным -6, нанос мм) с Под 50 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И 01 НРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР Изобретение относится к биохимии в частности к экспериментальной витаминологии и кардибыть использованоактивности пируватдца лабораторных живнии роли различныхханизмов, обеспечивцаеЦель изобретения - повышение сте пени ингибирования активности пируватдегидрогеназы сердца животных за счет использования тетрагидроокситиаминтрифосфата,П р и м е р 1. Тетрагидроокситиамин. Раствор 5 г (0,02 моль) тет рагидротиамина в 50 мл 207-ной НС 1 кипятят в течение б ч, По охлаждении раствор упаривают под уменьшенным давлением (10-20 мм рт. ст., 50.60 С), остаток высушивают в вакуумэксикаторе над РО и дважды кристаллизуют из этанола. Выделяют 5,6 г (982) хлоргидрата тетрагидроокситиамина (С, Н,8 И О 8 НС 1) в вид бесцветных кристаллов с т. пл. 182(н-бутанол:этанол: умага РН 5) . Полученнуюв 15 мп воды и нейраствором едкого нат- . (ф вший в осадок тетра-, - основание отфильт- Я кристаллизовывают из иод 4,2 г (852), д С и М 0,74 (н-бута- ф2:1:1, бумага РМ 5),1464081 Активность пируватдегидрогеназы (в мкмоль КГРе(СМЦ/г белка за 20 мин) и транскетолазы (в мкмоль седогептулозо-фосфата/г ткани за 1 ч) в сердце белых мышей после однократного подкожного введения тетрагидроокситиаминтрифосфата и тиохромтрифосфата приведена в табл.Анализ экспериментальных данных (таблица) показывает, что введение тетрагидроокситиаминтрифосфата в предлагаемом способе и тиохромтрифосфата в известном способе в дозе 10 мг/кг вызывает практически одинаковый ингибирующий эффект в отношении пируватдегидрогеназы сердца, снижая ее,активность на 43 и 382 соответственноУвеличение вводимой дозы препарата в известном способе до 200 мг/кг позволяет увеличить ингибирующий эффект лишь до 573, в предлагаемом способе в два раза меньшая доза тетрагидроокситиаминтрифосфата (100 мг/кг) позволяет практически полностью заингибировать активность пируватдегидрогеназы сердца (на 877), не изменяя при этом активности транскетолазы,формула и з о б р е т е н и я Способ исследования энергообмена сердечной мьппцы путем ингибирования пируватдегидрогеназы сердца животных парентеральным введением антагониста тиамина, о т л и ч а ю щ и й с я тем, чтос целью повьппения степени ингибирования, в качестве антагониста тиамина вводят тетрагидроокситиаминтрифосфат в дозе 10-100 мг накг массы Активность пируватдегидрогеназыпри введении дозы, мг/кг Препарат 0 Контроль трагидроокси аминтрифосфа 19 ф 1 1812РС,5 134+34 31 02. с 134+5 С 0,0014ею001 ТиохромтрифофатР 1711(Н -форма) и элюируют водой. Фракциюс КХ 0,25 (н-пропанол:К Ма -фосфатный буфер рН 5;вода 7:21, бумагаРИ 5) упаривают .под уменьшенным давлением (8-10 мм рт. ст.,20-30 С),остаток дважды обрабатывают безводным ацетоном. Получают 0,3 г (8 Х)целевого продукта в виде аморфногобесцветного гигроскопичного порошка, 10нерастворимого в уГлеводородах, эфире и ацетоне УФ-спектр (рН 7,4),Лмвкс в нм (1 КЕ):227 (366), 270(по 6 животных в каждой) белых мышей самок массой 18-20 г. Препарат вводят животным в виде водного раствора объемом 0,2 мл однократно подкожно в дозах 10 мг/кг (1 группа).и.100 мг/кг (2 группьдВ качествеконтроля используют интактных живот-,ных (2 группы) . Забой животных (декапитацией) проводят одновременно вопытной и контрольной группах через3 ч и 3 сут после инъекций, т.е, в 30сроки максимального падения активности соответственно пируватдегидрогенаэы и транскетолазы при примененииразличных. известных антагонистов тиа-.;мина. ЗБАктивность пируватдегидрог енаэы.определяют по методу Гублера транске-.толаэыпо методу Брунса, а содержание белка - по Лоури.Экспериментальные данные обрабатывают статически с применением 1 критерия Стьюдента. Активность транскетолаэы при введении дозы, мг/кг