Способ определения чувствительности к аллергенам

, вого Красного Знамени медицинскийинститут им, акадИ,П.Павлова(56) фрадкин В.А. Показатель повреждения нейтрофилов по фрадкину,Аплергодиагностика 1 и ч 1 йго,М,: Медицина, 1975, с. 27-65,.801210791 А следования лейкоцитов крови, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности способа при выявлении гиперчувствительности, в опытную пробу добавляют исследу еюй аллерген, а в контрольную " . растворитель аллергена, затем пробы инкубируют в течение 10-20 мнн, экстрагируют липиды и в полученном экстракте определяют концентрацию диеновых коньюгатов, и при увеличении этого показателя в опытеболее чем на 303 по сравнению с контролем, определяют гиперчувстви тельность к аллергенам.. ВНИИПИ Гасударственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва Ж 35, Раушская иаб., д, 4/5Филиал ППП "Патент , г.Ужгород, ул. ПРоектная, 4 1Изобретение относится к медицине,в частности к аллергологии, и можетбыть использовано для диагностикиаллер гической гиперчувствительностибольных с лекарственным, пыльцевыми бытовым аллергенам,Цель изобретения - повышениеточности способа при выявлении кги пер чу в ст вительно сти .П р и м е р 1. Больная Ч 49 лет.Диагноз: бронхиальная астма, атопи .ческая форма, легкое течение, фазазатихающего обострения, Анайнестически выявлялась четкая связь возникновения приступов удушья с пребыванием дома, с уборкой квартиры,что наводило на мысль о бытовойаллергии. Однако кожные пробы каксо стандартными сериями пыли, таки с аутопылью оказались сомнительными и гиперчувствительсности невыявилиУ больной производили забор кровии определяли концентрацию дисковыхконъюгатов следующим образом.В химическую пробирку наливали1 мп полиглюкина и добавляли 500800 ЕД (1-2 капли) жидкого гепарина,перемешивали. Эту смесь можно приготовить накануне исследования ихранить в холодильнике.Кровь из вены обследуемого, взялиутром, натощак, в ту же пробиркув количестве 5-6 мл, перемешивалиосторожным покачиванием и оставлялиов термостате при 37 С для спонтанлного осаждения эритроцитов. Времязависит от скорости осаждения ине превышает 1,5 ч. Кровь раздели".лась,на 2 слоя: верхний - мутный,желтого цвета лейковзвесь, и нижний - эритроциты, Верхний слойотобрали пипеткой в отдельную пробирку, перемешали,В 2 пробиркиналилии по 1 мплейковзвеси опыт и контроль. Еслиисследуется большее число аллергенов,то берут больше пробирок - по 1 накаждый аллерген, В опытную пробиркувнесли стануартнйй аллерген в разведении 10 в количестве 0,1 мп,СостаРедактор М,Товтин Техре 210791 2в данном случае аллерген - домашняяпыль серии 103; в контрольную пробирку 0,1 мп стандартной разводящей жидкости. Пробирки поставилив термостат при 37 С на 10 мин.Таким образом общее количество инкубационной среды 1,1 мп,Из опытной и контрольной пробирокотобрали по 0,1 мл, перенесли в от"О дельные пробирки и добавили в нихдо 20,0 мп дистиллированной водыдпя определения белка по методу ЛоуриДалее из оставшейся лейковзвеси(по 1 мп в опыте и в контроле) про 15 извели экстракцию липидов известнымметодом Фолча и определили в нихсодержание диеновых коньюгатов поспектрофотометрической методикеР 1 асег, Спектрофотометрировали при20 3= 232 нм,Содержание диеновых коньюгатоввычисляется по формуле С =Е/р,где С - искомая концентрация диеновых коньюгатов; Е - показание при 25 бора (величина экстинции) Р - мольная экстинция, равная для диеновыхконьюгатов 2,20 к 105В процессе исследования определено Еоаыт, = 118 к 10 М 1 Екоар,30 7 э 27" 10Содержание белка (А) определено;Аопыт,= 3,43 гйф Аконтр.= 5,87 гХ.Содепжание диеновых коньюгатоврассчитывается на 1 мг больше впробе, т.е. в 1 мл: Опыт: 3,43 гй34,3 мг/мп 1 ДКомт; =344 нМ/мг. Контроль: 5,87 гЯ =, 58,7 мг/мял.ДК, тр= 124 нМ/мг.Хаким образом, содержание диеновых коньюгатов в контрольной пробеопределено в 124 нМ/мг; в опытнойв 344 нМ/мг. Прирост диеновых коньюгатов составляет 178 .; Диагностируют выраженную аллергическую гиперчувствительность к домашней пылисерии 103. Правильность постановкидиагноза в данном случае была подтверждена успешным проведением50курса специфической гипосенсибилизации выявленным аплергеном. витель Н.Валеевад,Т.Дубинчак корректор Т Колб