Способ колориметрического определения ортофосфата в полиакриламидном геле
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТ ИЧЕСНИХ(9) (1) 11 3 2 ГОСУДАРСТВЕННЫ ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕ ИТЕТ С ИИ(54)(57) СП ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛАМИДНОМ ГЕЛ тельную обр либденовой щ и й с я ния точност ведут в при вого зелено го вещества ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(56) А 1 ехапйег Л.К. Рцг 1 г 1 сайдоп апс ярес 151 с 1 гу оЕ се 11 оЬ 1 озе рЬоврЬогу 1 азе Ггощ С 1 овггъй).цш Ьегщосе 11 цщ.- "д. В 1 о 1. СЬеш". 1968, ч. 243, Мф 8, 2899-2904.А 11 еп Л.М., Нупс 11 С. Ьоса 11 гаг 1 оп ой а 1 са 1 дпе рЬоярЬагаяе 1 п яе 1 щаггдсев Го 11 од 1 п 8 е 1 есггорЬогеядв. Л.Н 1 зосЬещ. СугосЬеш, 1963, ч. 11, Ф 2, 169-175.К 1 еЪе К.,7., БсЬ 1 ояя Б., МосЕ Ь., Ь 1 пк С.В Ч 1 яца 11 гайоп о 1 двогушез иЬ 1 сЬ репегайе 1 погяап).с рЬозрЬаге, - "ВзосЬещ 1 са 1 (;епегхсв", 1981, ч. 19, Р 9/10, 921-927.Топо Н., КогпЬегя А, "В 1 осЬеппса 1 яцй 1 ев оЕ Ьассег 1 а 1 зрогц 1 а 1 оп.1 пог 8 ап 1 с ругорЬоярЬайаяе оГ черегаг 1 че се 11 я апд врогея оГ Вас 111 цз яцЬС 111 я.-"Л. В 1 о 1. СЬещ", 1967, ч. 242, 9 10, 2375-2382. ОСОБ КОЛОРИМЕТРИЧЕСКОГО ОРТОФОСФАТА В ПОЛИАКРИЕ, включающий предвариаботку геля раствором мокислоты, о т л и ч а ютем, что, с целью увеличеи определения, обработку сутствии красителя метилого и поверхностно-активно1168853 Таблица 1 Количествоортофосфата,нмоль Площадь .пика,усл.ед. 20 50 34 67 100 Таблица 2 Количество ортофосфата, 30 нмоль Площадь пика,усл.ед. 10 50 16 35 100 25 40 Таблица 3 Количествоортофосфата,нмоль Площадь пика,усл,ед,10 30 50 100 Изобретение относится к биохимиии аналитической химии и может бытьиспользовано для количественногоопределения ортофосфата в полиакриламидном геле. 5Определение ортофосфата в полиакриламидном геле производится впрактике для измерения. активностиферментов, образующих ортофосфат,Целью изобретения является увеличение точности определения,П р и м е р 1. Образование ортофосфата в полиакриламидном геле диаметром 0,6 см и длиной 8 см происходит за счет гидролиза. 1 мм пирофос-,15фата натрия под действием ферментанеорганической пирофосфатазы дрожжей,предварительно введенного в полиакриламипный гель электрофорезом втрис-вероналовой системе .рН 7,5. 20Количество образовавшегося ортофосфата (р) определяютпо формулер = 2 ае, где а - удельная активностьнеорганической пирофосфатазы620 мкмоль/мин на 1 мг белка;25е - количество фермента в мг;- время инкубации с пирофосфатом натрия в мин. Полиакриламидный гель помещают на 1 ч в проявляющий раствор, содержащий следующие компоненты мас.7.: молибдат аммония 0,85; серная кислота 5; краситель метиловый зеленый 0,013; тритон Х 100 О, 125;вода остальное, Затем полиакриламидные гели промывают водой и денситометрируют при 620 нм. На денсито. - граммах измеряют площади пиков, Результаты измерений площади пиков по примеру 1 приведены в табл. 1. Средняя ошибка определения составляет 2 усл,едП р и м е р 2, Пример осуществляют аналогично примеру 1, но в качестве поверхностно"активного вещества берут Бридж.Результаты измерений по примеру 2 приведены в табл. 2,Ф П р и м е р 3. Пример осуществляют аналогично примеру 1, но в качестве поверхностно-активного вещества берут лаурилсульфат лития. Перед денситометрированием гели вымачивают 6 ч в воде для снижения фоновой окраски. Результаты измерений по примеру 3 приведены в табл. 3.Технико-экономическая эффективность способа заключается в повышении точности, высокой чувствительноствю и простотой определения.
СмотретьЗаявка
3631828, 12.08.1983
МГУ ИМ. М. В. ЛОМОНОСОВА
ВОЛК СЕРГЕЙ ЕВГЕНЬЕВИЧ, БАЙКОВ АЛЕКСАНДР АНДРЕЕВИЧ, АВАЕВА СВЕТЛАНА МИХАЙЛОВНА
МПК / Метки
МПК: G01N 31/22
Метки: геле, колориметрического, ортофосфата, полиакриламидном
Опубликовано: 23.07.1985
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-1168853-sposob-kolorimetricheskogo-opredeleniya-ortofosfata-v-poliakrilamidnom-gele.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ колориметрического определения ортофосфата в полиакриламидном геле</a>
Предыдущий патент: Способ определения треххлористого азота
Следующий патент: Способ определения токсикантов в жидких средах
Случайный патент: Устройство для управления воздухозаборником самолетного двигателя