Способ разрушения бацилл для получения элементов клеток
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 1140462
Авторы: Ильяшенко, Сабельников
Текст
40462 Техред О.Гортвай Корректор Л.Патай Редактор О. Кузнецова Тираж 490 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений.и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5Заказ 2715(1 Подписное Производственно-полиграфическое предприятие, г,ужгород, ул.Проектная, 4 1 11Изобретение относится к микробиологии,Целью изобретения является упрощение способа и максимальное сокращение структуры клеточной оболочки.Способ осуществляется следующимобразом Ночную (18 ч роста) культуру бациллярного штамма засевают всвежий мясопептонный бульон (МПБ) ивыращивают при 37 С до конца логариф"мической фазы роста (3-3,5 ч), Клетки осаждают центрифугированием, отмываютоднократно 0,85 -ным раствором ЯаС 1 и ресуспендируют в растворе,по составу соответствующем среде а,сконцентрированной в 4 раза. Инкубируют 3 ч при 37 С или ночь (18 ч)при комнатной температуре. О степениразрушения клеток судят по нескольким критериям: по визуально наблюдаемому лизису; исследованию клеточной массы под микроскопом; определению количества жизнеспособных. клеток.в лизатах путем высева на мясопептонный агар (выражают в 7 по .отношению к исходному количеству); спектрометрическому анализу супернатантовпосле осаждения клеток.П р и м е р 1. 2 мл 17-часовойкультуры Васд 11 оз сегепз штамма СР 7,переносят в 40 мл свежего МПБ. Выра"щивают со встряхиванием (150 об/мин)3 ч при 37 С. Клетки осаждают центрифугированием при 5000 я, однократноотмывают 0,853-ным раствором МаС 1 иресуспендируют в 1 мл среды а, имеющей состав на 1 л, г: К НРО 10,5КН РО 4,5(ИН) БО 1Цитрат натрия 2 Н 0 0,5Смесь инкубируют 1 ч при 37 С. Повсем исследованным параметрам лизисклеток не наблюдается.П р и м е р 2. 2 мл 20-часовойкультуры штамм СР 7 переносят в 40 мл 1 О свежего МПБ, затем выращивают и отмывают, как в примере 1, Клеточную массу ресуспендируют в 1 мл среды а (см.пример 1), сконцентрированной в 4раза (обозначение а х 4) я инкубиру ют 1 ч при 37 С. После инкубации визуально наблюдают появление значительной вязкости, что свидетельствует о лизисе клеток. Исследование ли"затов под микроскопом показывает на личие пустых клеточных оболочек, чтоговорит о выходе в среду клеточногосодержимогоОпределение количества жизнеспособных клеток в лизатах показывает, 25 что после инкубации в среде а х 4степень выживаемости бацилл значительно снижена по сравнению с исходной, Количество разрушенных клетоксоставляет 83 Х.30 Дополнительным свидетельствомлизиса клеток являются данные спектрофотометрического анализа супернатантов после, осаждения: клеток. Анализ спектров поглощения указываетна наличие в лизатах материала нуклеотидного и белкового происхождения и,возможно, полисахаридов.
СмотретьЗаявка
3581612, 12.01.1983
ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭПИДЕМИОЛОГИИ И МИКРОБИОЛОГИИ ИМ. ПОЧЕТ. АКАД. Н. Ф. ГАМАЛЕИ
САБЕЛЬНИКОВ А. Г, ИЛЬЯШЕНКО Б. Н
МПК / Метки
МПК: C12N 1/06
Метки: бацилл, клеток, разрушения, элементов
Опубликовано: 07.05.1986
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-1140462-sposob-razrusheniya-bacill-dlya-polucheniya-ehlementov-kletok.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ разрушения бацилл для получения элементов клеток</a>
Предыдущий патент: Модуляционный измерительный приемник
Следующий патент: Ингибитор самопроизвольной полимеризации изопрена
Случайный патент: Способ создания оппозиции 1-го пальца при деформации кисти