Способ идентификации субпопуляций и -лимфоцитов крови

Номер патента: 1113742

Авторы: Байжомартов, Укбаева, Царевская, Царевский

ZIP архив

Текст

(51 0 01 Б 33/48 ННЫЙ КОМИТЕТ ССОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТ ГОСУД АРСТ ПО ДЕЛАМ ЕНИЯ ОПИСАНИЕ ИЗОБР Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ детельство СССР33/16, 1979(46) 15.09.84. Бюл. (72) Л,П,Царевский,Л.А.Царевская и Т,Д. (71) Казахский научиский институт эпидембиологии и инфекционАлма-Атинский госудатут усовершенствован (53) 616,07(088.8) (56) 1. Авторское свР 682229, кл. 0 01 Б(прототип). Р 34М.С.Байжомартов,Укбаевао-исследовательиблогии, микроных болезней ирственный инсти-.ия врачей.(54)(57) СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ СУБПОПУЛЯЦИЙ Т- И В-ЛИИФОЦИТОВ КРОВИпутем обработки мазков крови химическими веществами с последующимФлюоресцентным исследованием, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью упрощения и ускорения способа,обработку неФиксированных мазковкрови ведут инкубацией в парах Формальдегида в течение 25-30 мин1113742 Составитель С.КотелевцевРедактор Н.11 выдкая ТехредМ.Надь Корректор А.Обручар Заказ 6612/37 Тираж 822 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5 Филиал ППП"Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной и клинической иммунологии и аллергологии.Известен способ изучения Т- и В-лимфоцитов с помощью окрашивания 5 изучаемых клеток флюоресцентным зон. дом З-метоксибенэантроном,маркирующим конформационные изменения мембранных макромолекул активированных клеток. Измерение интенсивности 10 флюоресценции позволяет выделять "яркие" условно относимые к В-лимФоцитам, и "неяркие", условно относимые к Т-лимфоцитам клетки 113 .Этот метод достаточно длителен и трудоемок, так как для точной идентификации требуется длительная подготовка образЦов и использование микУоцитофлуориметра.Целью изобретения является упрощение и ускорение способа.Поставленная цель, достигается тем, что согласно способу идентификации субпопуляций Т- и В-лимфоцитов крови путем обработки мазков крови химическими веществами с последующим Флю. оресцентным исследованием, обработку нефиксированных мазков крови ведут инкубацией в парах формальдегида в течение 25-30 мин.30 Способ осуществляют следующим образом.Нефиксированные мазки крови помещают в сосуд с притертой пробкой емкостью 0,5-1 л, на дно которого на 35 сыпают 15-20 г порошка Формальдегида 1 или орто-фтальальдегида 1. Сосуд плотно закрывают и помещают в термостат (80 ОС 1 на 25-30 мин. Извлечен. ные препараты просматривают в сине фиолетовом спектре люминесцентного микроскопа МЛ1 фильтры СС 1,5, 1 ФС), что позволяет определить Флюоресценцию мембран клеток различногоцвета (желтого, желто-зеленого, эелеНОГО 1.Меньшая часть лимфоцитов (20-25/имеет четко очерченное округлое несветящееся ядро, а цитоплаэматическая мембрана флюоресцирует зеленымсветом. Определяется свечение только цитоплазматической мембраны, слабое, мелкое, гнеэдно-гранулярное.Это Т-лимфоциты,Большую часть популяции лимфоцитов (40-60) составляют клетки с желтой по цвету, расплывчатой, пятнистой Флюоресценцией, охватывающейсвечением ядернуюи цитоплаэматические мембраны. Свечение яркое и однородное - В-лимфоциты,П р и м е р . Из крови больныхинфекционно-аллергической формойбронхиальной астмы приготовляют мазки Инкубируют в парах Формальдегида в течение 28 мин. Мазки анализируют под люминесцентным микроскопом.Количество Т-клеток составляет 25,количество В-лимфоцитов - 60. Контрольное сопоставление с изолированной популяцией Т- и В-клеток этойкрови с помощью реакций роэеткообразования подтверждает полученный результат.Использование предлагаемого способа идентификации субпопуляции лимфоцитов по сравнению с известнымидает возможность заменить дорогостоящий Флюоресцентный 3-метоксибензантрон на формальдегид, упростить обработку исследуемой популяции лимфоцитов 1 не окрашивание клеток, а инкубация в парах Формальдегида,), чемдостигается значительная экономия расрасхода реактива, идентифицироватьсубпопуляции в мазках крови без трудоемкого выделения лимфоцитов иэ клеток периферической крови.

Смотреть

Заявка

3377116, 07.01.1982

КАЗАХСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭПИДЕМИОЛОГИИ, МИКРОБИОЛОГИИ И ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ, АЛМА-АТИНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ИНСТИТУТ УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЯ ВРАЧЕЙ

ЦАРЕВСКИЙ ЛЕОНИД ПАВЛОВИЧ, БАЙЖОМАРТОВ МЕЛС СЕРИКБАЕВИЧ, ЦАРЕВСКАЯ ЛЮБОВЬ АРКАДЬЕВНА, УКБАЕВА ТАМАРА ДАНАГУЛОВНА

МПК / Метки

МПК: G01N 33/48

Метки: идентификации, крови, лимфоцитов, субпопуляций

Опубликовано: 15.09.1984

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1113742-sposob-identifikacii-subpopulyacijj-i-limfocitov-krovi.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ идентификации субпопуляций и -лимфоцитов крови</a>

Похожие патенты