Способ получения кристаллического террамицина солянокислого

10830: Класс 301), 6 СССР ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУслер, Г. Э. Елькин,И. Элькина Г, В. Самсонов, С. Е А.М, Кани ПОСОБ ПОЛУЧЕН И ТЕРРАМИ ЦИНАСКОГОО КР И СТАЛЛ И ЛЯ НОКИСЛ лено 23 ноября 1956.г. за56174 в 1 сомит зобретени и открытий при Совете Мииистро по телахСССР Предметом изобретения является способ получения террамициня соЛ 5 НОКИСОГО, ОСНОВЯННЫЙ НЯ ТОЫ, что дг 151 сороции янтиоиотикя из культуряльной жидкости и последуюгцей его очистки используются инц ообменные смолы.1 риисс выделения и очистки .ляг 1 тс 5 Нз 1 рсдвярительной обряооткн ю, ) уряльной жидкости,иронии Гс ррямцгНд на смоле с,БС, вытесеИ его 1-нормальным раствором соляной кислоты в метаноле 11 получении кристалл;чсскс)го соля;иклого террами. шнд.,ПС)с 00 0 уцсс ГВЛяЕтся СЛЕдуЮ- И И ,1О Р 1 3 О ).1, Предварительная обработка культуральной жидкостиПо окспчани фермеггяцнонного 1 Рс)1 СС 1 КУГ 1 ЬТУРЯЛЬНУ 0 ЖИДКОСТЬ загружают в сосуд, снабженный мешалкой, и подкисля 10 т 25% расгвором иявлевой кислоты до рН :5,0 2,5. 1 Осге доведения рН до 2,0 - 2,5 жидкость перемешивают в е 11 с 30 )1 ин и зятем Отфильтроывякн от мицслия. Приготовленый таким Образ;м ндтивный ра- СТВОР ТСРРЯМИЦИНЯ С КТИВНОСТЪЮ 1 И)к 000 ед,1,г ( единица активиоли тсррдмицшд соответствует 1;,икг химически ч 1 Ого террдмиииня- -основания), поступает и слдукнцуо стадию очистки - . со 1)с)цНод смоле СБС-З.1. Сорбция террамицина на смоле СБСи вытеснение антибиотика 1-нормальным раствором соляной кислоты в метанолеЧсрз кс)аоню, згрлксц "о смолой СБСв Нформе пропускаот птнвный Ояствор терра)1 И 11 н 1 со с коростью 100 1 л,сзе чсгс. Выходяпий рясгвор сосиряют фракциями, ОГР,1,Я 51 В каждой с)Ркцги к 011- цснтрдцию террямицпна. Сорбцик) продо ждс) до тх пор, пока активнол ь выхоцяцих фракций е окажется рявюй 00 - 95% активности исходного ятивного раствора. По окончании сорбции определяют срсдшою концентрацию террамицнна в пропуцес:м через колошсу растворе и количество сорбироваи- НО 0 смо;,ой яптибиотк 1. Сорбциопная емкость смолы зависге от качества культуральпой жидкости. При активности культуральной жидкости 500 ед 7 м.г - ДОЕ (дин ямпческая обменная емкость смолы) = ==250 О ес 7 г, при активности 1000 - 1400 ед,5,г - ЛОЕ =- 500 10 -- 600 10 едм.г н при актгвности08305 Предмет изобретения Стандартгиз. Поди. к печ. 30/Хг. Объем 0,125 п, л. Тираж 200, 11 ена 25 коп. гп д.пат 1 м, типогиайии2 Мииистеоства кчльтчоы Ччвангской АССР. Зак.5443 1800 - 2000 ед/лгл - ДОЕ=700 10 -- 800 10 ед/г.Выходящий из первой колонки обедненный раствор поступает на следующие колонки, где террамицин сорбируется полностью, Элюция террамицица производится только с насыщением колонок террамицином.По окончании процесса сорбции террамицина смолу промывают водой и обезвоживают метиловым спиртом.Для вытеснения террамицина колонку с промытой и обезвоженной смолой промывают 1-нормальным раствором НС 1 В ыетиловом спирте. Последний пропускают через смолу со скоростью 15 мл/см- час. Элюат собирают фракциями, Вытеснение ведут до тех пор, пока концентрация антибиотика в элюате цс снизится до 1000 - 2000 ед/цл. Фракции с активностью це ниже 2000 сд/лгл объединяют, и и объединенном элюате определяют концецтрацию террамицина, Концентрация террамицина в общем элюате достигает 10000 - 12000 ед/лгл. Выход ца этой стадии составляет 90 - 95% от количества террамицина, сорбированного на смоле.По окончании процесса вытеснения смолу регенерируют и вновь используют для сорбции террамицина из культуральной жидкости.И 1, Получение кристаллического солянокислого террамицинаКислый метанольный элюат, полученный на предыдущей стадии процесса, нейтрализуют с помощью анионообменной смолы ЭДЭ. Нейтрализация проводится в статических условиях. Для этого в сосуд с элюатом добавляют рассчитанное количество смолы ЭДЭв ОН-форме. Элюат встряхивают с анионитом в течение 2 - 3 час., периодически проверяя рН по индикатору.Нейтрализацию заканчивают, когда кислотность раствора достигнет 0,001 (рН=3).По достижении нужного рН смолу отделяют и промывают метилоОтв, редактор Л. Г. Голандский вым спиртом ца фильтре. Спирт от промывки присоединяют к нейтрализованному элюату. В объединенном растворе определяют концентрацио тсррамицина. Лциопит после нейтрализации регенерируют и вновь используют для нейтрализации элюата,Нейтрализованный элюат упаривают под вакуумом при 1=20 - 25 и остаточном давлении 20 - -ЗОям Нд. Элюат кспцецтрируют до /а - /и, первоначального объема. В полу- цепном концентрате определяют актг ццость террамицина; обычно она лежит в пределах 80 - 100 10 ед/мл.Для получения кристаллического соляцокислого террамицина к концентрату прибавляют соляную кислоту (с 1 = 1,17) из расчета 1 - 1,5 ял на 1 г террамицина. При этом раствор периодически перемешивают. Кристаллизационную массу выдерживают при комнатной температуре 3 - 4 часа, после чего террамицин отфильтровывают на стеклянный фильтр4, промывают 1-нормальныи раствором НС 1 в метаноле, чистьгм метанолом и сушат в вакуум- сушильном шкафу при 50 - 60 и остаточном давлении 10 - 20 лглг Нр, Высушенный террамицин взвешивагот, растирают в ступке и отбирают пробы для определения активности, зольности и влажности,Способ получения кристаллического террамицина солянокислого, отли чающийся тем, что, с целью упрощения выделения и очистки, терр амицин сор бируется из культуральной жидкости катионообменной смолой СБС-З, вытесняется с последней раствором соляной кислоты в метиловом спирте и нейтрализуется на анионооб- менной смоле ЭДЭ; метанольный элюат упаривается и из концентрата при добавлении избытка соляной кислоты выделяется кристаллический солянокислый террамицин.