Фотометрический способ количественного определения фенола

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИН 00 С 1 й 33 04 01 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ свиДтл:ТУ АВТОРС чатрян СОВФЕНОЛА,ельнуюазца,Фенола .0,050 а с ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЬГГИЙ(56) 1. Ерэинкян Л.А., Мурадян Е.А. Применение солянокислого раствора хлористого йода для определения количества фенола в молоке и молочнокислых продуктах. - Известия АН Армянской ССР, 1958, т. 11, 9 8 с. 13.2. Унифицированные методы исследования качества вод. Методы химического анализа вод. Иэд, З-е, М., 1977, СЭВ, с. 677 (прототип).(54)(57) ФОТОМЕТРИЧЕСКИЙ СП КОЛИЧЕСТВЕННОЩ ОПРЕДЕЛЕНИЯ предусматривающий предварит обработку анализируемого об разбавление его свободной о зодой до концентрации фенол -0,250 мкМ/мп, реакцию Фейо,801067437 А 4-нитрофеннлдиазонием в щелочнойсреде при интенсивном перемешиваниис последукщим добавлением спиртаи,определением оптической плотности, о т л и ч а ю щ и й с я тем,что, с целью упрощения способа,сокращения времениопределенияи обеспечения воэможности определения фенола в молоке и кисломолочныхпродуктах-, предварительную обработку образца осуществляют путем добавления к 2-3 объемам образца одногообъема 20-ного раствора .уксуснокислого свинца и последукзцего отделения и отбрасывания осадка, в качестве щелочного реагента используют40-ный раствор гидрата окиси натриявносимый в количестве 3-5 капель на2-4 мл испытуемого образца, 4-нитроФенилдиазоний добавляют в виде0,04 М раствора в количестве 0,5--1,5 мл, в качестве спирта используют этанол, вносимый в количестве1,4-3 мл, а оптическую плотность определяют при длине волны 490 ммк.1067437 2 ВНИИПИ Заказ 11203/49 Тираж 828 Подписное филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способу количественно;о определения фенола в молоке и кисломолочных продуктах, и может быть использовано при выделении, получении и Отборе высоко фенолустойчивых разновидностей молочнокислых бактерий для практического применения в пищевой промышпенности, медицине, животноводстве, кормопроиэводстве. 10Известен способ количественного определения фенола в молоке и кисломолочных продуктах йодометрическим методом 13Однако этот способ трудоемок, 15 длителен, ниэкочувствителен.Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому является Фотометрический способ количественного определения Фенола, предусматри.20 вающий предварительную обработку анализируемого образца (отгонку разбавленного образца в присутствий фосфорной кислоты и сернокис- . лого кобальта, причем разбавление 25 осуществляется свободной от фенола водой до концентрации, фенола 0,050- . -0,250 мкМ/мп), реакцию фенола с 4-нитрофенилдиаэонием в щелочной среде при интенсивном перемешивании с последующим добавлением спирта и определением оптической плотности, Известный способ осуществляется следующим образом. К 100 мл дистиллята (полученного после перегонки образца) содержащего 0,003-0,1 мг фенола до 35 бавляЮт 2 мл 5-ного раствора На С2 при перемешивании. К 100 мп щелочного раствора дистиллята добавляют 4 мл раствора 4-нитрофенилдиаэония. дпя повыаения чувствительности мето-,40 да продукт реакции экстрагируют бутанолом (30 мп), взбалтывают 1 мин, через 1 ч сливают в делительную воронку и отделяют водный слой. Измеряют оптическую плотность продукта 45 при Л 460 ммк 2 .Недостатками известного способа являются сложность и длительность.Кроме того, способ непригоден для определения фенола в молоке и кисло молочных продуктах.Цель изобретения - упрощение способа, сокращение времени определения и обеспечение возможности определения фенола в молоке и кисломо лочных продуктах.Поставленная цель достигается тем, что согласно фотометрическому спосо" бу количественного определения фенола, предусматривающему предварительную обработку анализируемого обр;." ца, разбавление его свободной от Фенола.водой до концентрации фенола 0,050-0,250 мкМ/мп, реакцию фенола с 4-нитрофенилдиаэонием в щелочной среде при интенсивном перемешивании с последующим добавлением спирта и определением оптической плотности, предварительную обработку образца осуществляют путем добавления к 2-3 объемам образца одного объема 2 О - ного раствора уксуснокислого свинца и последунщего отделения и отбрасывания осадка, в качестве щелочного реагента используют 40-ный раствор гидрата окиси натрия, вносимый в количестве 3-5 капель на 2-4 мл испытуемого образца, 4-нитрофенилдиазоний добавляют в виде 0,04 М раствора в количестве 0,5-1,5 мп, в качестве спирта используют этанол, вносимый в количестве 1;4-3 мп, а оптическую плотность определяют при длине волны 490 ммк.П р и м е р. К 7,5 мл молока, содержащего 750 мкМ Фенола, и к 7,5 мл молока, не содержащего Фенола (контроль), добавляют по 2,5 мл 20-ного раствора уксуснокислого свинца, тщательно перемешивают и центрифугируют 5 мин при 4 х 10 Я.(5,5 х х 10 об/мин). Отделяют надосадочную жидкость, разбавляют ее водой, нео содержащей фенола, в соотношении 1;1000 и по 2 мл переносят в пробирки. Встряхивая их, прибавляют по 3 капли 40-ного раствора МаОН и 1 мл 0,04 М раствора 4-нитрофенилдиаэония, содержимое пробирок тщательно перемешивают и затем в каждую пробирку вносят по 1,5 мп этанола. Содержимое снова тщательно перемешивают и фотометрируют при490 ммк. Оптическая плотность равняется 0,230, что ( в соответствии с калибровочной кривой) эквивалентно содержанию фенола 0,1 М/л, т.е.750 мкМ в 7,5 мп молока.Предварительное экстрагирование окрашенного продукта реакции диэтиловым эФиром перед фотометрированием позволяет еще повысить чувствительность метода.Таким образом, предлагаемое изобретение позволяет упростить способ количественного определения Фенола, сократить время определения и обеспечить возможность определения фенола в молоке и кисломолочных продуктах.