Способ получения -2-(ациламино)-3-монозамещенных пропеонатов

,1264839 07 С 103 ЕНТ К СэС 1 - С,при этом один ил в К и К могут или бром, когда С - С -апкил а 1 Э С -алкилом, о т тем, что соедине К СН,С СООК, где 1, и К. име подвергают взаи общей формулы 1 К СЫН где К имеет ук в среде раствор ре его кипения массовом соотно мулы 11 и 111 ( ной аэеотропной ся воды. гКзССНодород, С Сий К,алкил, на гд ГОСУДАРСТЯЕННЬЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТЮ ЗОБРЕТЕ-алкил,и два атома водорода быть замещены нахлор Кз - прямолинейный К не является Сз личающиися ние общей формулы 11 т указанные значенияодействию с амидом занное значение, теля при температупроцесс ведут при ении соединений фор- -4):1 с одновременотгонкой образующей20 1264839 19 С 1 С 1 С,Н,Ю,С 1 164 З 1 С Н С 1 ЯО 138-141 ь 7 П 2-174,5 С,Н,М С, Н НО15 сн,сн,С,Н,Н 59 С,Н НО 11-172 164-16 Результаты опыта 1 п чь.чо.1 п что опыт на мьппах проводят следующим образом.Мышам весом 20 г, женским особям 2 (СД Чарзл Ривер) подкожно вводят выбранную дозу химического ингибитора. Примерно через 2 мин определенную дозу тиенамнцина вводят внутривежо. Осуществляют также контроль тиенамицина. Уровень тиенамицина в моче, выражаеюй в процентах от введенной дозы, измеряют с помощью биохимической пробы. Результаты представлены в табл.2, Два номера исследуеыюх соединений совпадают с номерами соеди 35 нений из табл,1. Соединение 7 представляет собой, 2-изовалерамино-бутеновую кислоту, соединение 10, пред" ставляет собой Е-циклопроЪилкарбоксамидо-бутеновую кислоту.Соединения 2-иэовалерамидд-бутеиовая кислота, соединение 7, Е- (2,2-диметилциклонропанкарбоксамидо)2-бутеновая кис тально изучены сочетании с тие тах на ьпппах. О дения испытаний описана в приме зультаты предст ота были более деопытах дп что в амицином (ТМ) в опыщая методика прове- аналогична той, что е 2. Полученные ревлены в табл.З и 4, Таблица 2 Содержание тненамицина г моче,й Доза,соедннения,мг/кг оедине оза, иенамицина, г/кг 50 1 О 10 53 5 1 О 1 О 25-3 1 О онтрольное бл нца 3 овой Влияние вводимой совместно 2-иэовалерамидобутенкислоты (соединение 7) на выход тиенамицнна в моче мышей, женские особи, СЛ, Чарзльз Ривер,вес 20 г Выход ТМ в моч етод введения ( Доза, мг/к Соединение 7 Соединение 7 ТМ 0.,3о 0 В йли ПКЖ ЗЗ КЖ(б) Вводимые совместно,Т а б л и ц а 4Влияние вводимой совместно Е-(2,2-диметилциклопропанкарбоксамидо)-бутеновой кислоты (соединение - 2) на выход тиенамицина в моче майей. Мыши, женские особи, СЛ Чарльз Ривер, весом 20 г. Метод введения (б) Доза, мг/кг Соединение 2 ТМ Соединение 2 30+5 10 Н 10 0,1 35 40 10 0,3 Н 46 10 Н 10 10 60 Н 30 10(б) Совместное введение. 1 ЕДО, мг/кг -ТИ0,2 ТИт 100 мг/кг ингибитора 0,0 б В другом опыте на мышах систематическое антибактериальное действие тяенамицина увеличивают приблизительВыход тиенамицина в моче, Х но в три раза путем совместного введения с 2-изовалерамидо-бутеновойкислотой.Т а б л и ц а 5Выход в моче Н-формимидоилтиенамицина (5 мг) кг (1 У) через 3 ч после его введения в организм собаки Исследуемое соединение Выход вмоче,Х Н-формимидоилтиенамицин 7,8 плюс Е -2-изовалерамидо 2-бутеновая кислота 46 плюс Е -2-(2,2-Диметилциклопропанкарбоксамидо)2-бутеновая кислота Таким образом, полученные соедине-З 5 метабблиэм ния общей формулы 1 обладают свойст- гут быть вом изобритательно ингибировать медицине. дипептидазы и "моисполь зев аны в Составитель В.МякушеваТехред Л.Сердюкова Корректор Е.Рошко Редактор 1 О.Середа Заказ 5580/60 Тираж 379 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д,4/5 Производственно-полиграфическое предприятие,г.ужгород,ул.Проектная,4 23Влияние совместно вводимой 2-инвалерамидо-бутеновой кислоты на систематическую эффективность тиенамицина при лечении инфекции ЯйарЬУ 1 ососсцз аогецв.Для изучения влияния ингибиторов дипептидаэы на выход Н"формимидоил тиенамицина в моче были использованы мужские особи собак. В контрольном опыте собаке вводили 5 мг/кг 1 У Н- формимидоил тиенамицина беэ ингибитора. Во втором опыте используют то же количество Я-формимидоилтиенами 1264839 24цина, а также вводят Е-изовалерамидо-бутеновую кислоту тремя дозами, каждая па 20 мг/кг исследуемого соединения. Первую дозы вводят сразу же 5 после инъекции Я-формимидоилтиенамицина, вторую - на 40-й минуте и третью - на 60-й минуте. В третьем опыте используют одну дозу 2 мг/мг Е-(2,2-диметилциклопропанкарбокс- О амидо)-2-бутеновой кислоты, вводимуюнепосредственно перед инъекцией 0- формимидоилтиенамицина. Полученные результаты представлены в таблице 5.Изобретение относится к органической химии, а именно к способу получения Е-(ациламино)-3-монозамещенных пропеонатов формулыК СОНН КС=С , (1)К,ООСНгде К - водород, С - С -алкил, нат 1 1,брий;К - С - С -алкил281К - С - С -алкил3 1 апри э"том один или два атома водорода в К и К могуФ быть замещены на2 3хлор или бром, когда К - прямолинейный С - С -алкил а К не является4фС - С -алкилом которые могут быть4Ф:использованы в качестве ингибиторов 1.метаболизмадипептидазы.Целью изобретения является разработка доступного способа получения Е-(ациламино)-3-монозамещенных пропеонатов, обладающих свойством ингибировать метаболизм дипептидазы в организме.П р и м е р 1. ЕИзовалерамидо-бутеновая кислота.Раствор 1,07 г (10,5 ммоль) 2-кетомасляной кислоты и 0,71 г (7,0 ммоль) изовалерамида в 15 мл толуола перемешивают при температуре кипения и собирают воду в маленькой ловушке Дин-Старка. Через 5 ч раствор охлаждают, в результате чего идет сильная криеталлизация, После вызревания осадок собирают и промывают толуолом, а затем СН С 1 . Выход белого кристаллическоговещества составляет 0,47 г, Т 172-174 (незначительное предвапл.рительное размягчение). Продукт перекристаллизовывают из диизопропилкетона. ТСХ (4;1 толуол-АсОН) показывает только незначительные следы другого иэомера.Выход белых кристаллов составляет 0,32 г (25 Х) Т.пл.175 (незначительное предварительное размягчение). По данным ЯМР полученный продукт представляет собой исключительно Е-изомер.Найдено: С 58,89; Н 8,55; Б 7,43,СН ЮОРассчитано: С 58,36; Н 8,16; Б 7,56.П р и м е р 2. Е-(2,2-Диметилциклопропанкарбоксамидо)-2-пентеновая кислота.Раствор 1,74 г (15 ммоль) 2-кето- валериановой кислоты и 1, 13 г (10 ммоль)/ 2,2-диметилциклопропанкарбоксамида в 20 мл толуола кипятят при перемешивании, собирая воду в маленькойловушке Дин-Старка, Через 20 ч раствор охлаждают и обрабатывают слабым 5 током азота. Перед испарением основной части растворителя кристаллизацию индуцируют трением. После вызревания остаток собирают на фильтре ипромывают толуолом и некоторым коли чеством (С,Н) О. Выход белого кристаллического продукта составляет0,63 г (307) . Т, 154,5-155,0 (незначительное предварительное размягчение). ТСХ (4:1 толуол - АсОН) пока эывает только чрезвычайно, незначительные следы другого изомера. ЯМРспектр соответствует 2-конфигурации.Найдено: С 62,86; Н 8,27; И 6,75.(15 ммоль) 2-кетомасляной кислотыперемешивают при кипячении над маленькой ловушкой Дин-Старка. Через8 ч раствор охлаждают, в результатечего идет обильная кристаллизация.Остаток собирают на фильтре и промывают толуолом и СН С 1 , Выход кристаллического продукта составляет1,44 г Т 180,5-182 С (предваритель ное размягчение). Продукт перекристаллизовывают из металэтилкетона. Выход белых игольчатых кристаллов 0,63 г(С Н МО )45 Рассчитано; С 63,97; Н 8,50;И 6,22.П р и м е р 4, Е-(2-Этилгексанамидо)-2-бутеновая кислота. 10 г 2 этилгексаноил хлорида по каплям при 50 перемешивании добавляют к 25 мл охлажденного концентрированного раствора НН ОН в результате чего сразже выпадает осадок, Смесь перемешивают в течение 2 ч, затем отфильтровы вают и высушивают на воздухе, в результате чего получают 6,5 г амида.1,4 г (10 ммоль) полученного соединения и 1,5 г кетомасляной кислоты(15 ммоль) кипятят в 25 мл толуола в течение 15 ч с отгонкой воды. Реакционную смесь охлаждают и частично упаривают в токе азота. Кристаллизация продукта происходит после вызре вания в течение 3 ч. Кристаллы собирают, трижды промывают толуолом и высушивают на воздухе. Выделяют 1,13 г (503) продукта, Т 160-162 , ЯИР- спектры соответствуют заданной струк- О туре и показывают присутствие 5 Й-ного Е-изомера, ТСХ показывают (4:1 Толуол-АсОН) одно пятно.Найдено: С 63,63; Н 9,43; Ю 5,88,Рассчйтано: С 63,40; Н 9,30; Я 6,16.П р и м е р 5. Е-(2,2-Диметилциклопропанкарбоксамидо)-2-бутеновая кислота. 201.53 г (15 ммоль) 2-кетомасляной кислоты 1,13 г (О ммоль) 2,2-диметилциклопропанкарбоксамида и 20 мп толуола перемешивают при температуре кипения в течение 1 О ч. После охлаж деиия кристаллический продукт отфиль,тровывают, промывают толуолом (3 х х 10 мп) и высушивают, в результате чего получают 1,06 г продукта, Т 140-14 С. ТСХ (4:1 толуол - АсОН) 30 показывает практически одно пятно, ЯМР"спектр соответствует требуемой структуре.После перекристаллизации из Ей ОАс и высушивания получают 0,533 г продукта, Т 142-143,5 , гомогенного по данным ТСХ. Найдено: С 60,92; Н 7,71; Н 7,38.(С Н ЮО )Рассчитано: С 60,90; Н 7,67; Я 7,10,П р и м е р 6. 2-2-(2,2-Диметил- . циклопропанкарбоксамидо)-2-гександикислота.Смесь 1,0 г 2,2-диметилциклопро панкарбоксамида, 2,4 г 2-кетоаддипиновой кислоты и 25 мл метилиэовале рата кипятят в течение 4 ч, удаляютФводу с помощью модифицированной ловушки Дин-Старка, содержащей молеку лярные сита (4 а), После вызревания при комнатной температуре в течение ночи кристаллический остаток отфильтровывают, промавают серным эфиром и3 перекристаллизовывают из этилацетата,55 в результате чего получают 0,23 гопродукта Т 163-165 , ЯМР-спектр соответствует требуемой структуре. 4Найдено: С 56,20; Н 6,83; Н 5,32,. Рассчитано: С 56,46; Н 6,71; Й 5,49.П р и м е р 7. Е-(2,2-Диэтилдициклопропанкарбоксамидо)-2-бутеновая кислота. Смесь 2,3 г 2-кетомасляной кислоты, 2,0 г 2,2-диэтилциклопропанкарбоксамида и 25 мл толуола кипятят в течение 16 ч с удалением воды с помощью модифицированной ловушки ДинСтарка, содержащей молекулярные сита (4 а). При охлаждении продукт не выпадает в осадок. Затем добавляют серный эфир (25 мл) и смесь экстрагируют насыщейным раствором ЮаОНСО (трижды). Объединенные фракции подкисляют концентрированной НС. Смолоподобный осадок закристаллизовываечся при смешении с водой. После перекристаллизации из этилацетата получают 0,31 г продукта. Т 129-130 С. ЯМР-спектр соответствует продукту с требуемой структурой.Найдено: С 64,01; Н 8,62; Б 6,21,Рассчитано: С 63,98; Н 8,50; Я 6,22.П р и м е р 8. 2-(2,2-Диметилдициклопропанкарбоксамидо)-2-гексеновая кислота.Третбутиловый сложный, эфир 01- норлейцина.К суспензии 9,82 г (75 ммоль) П 1. - норлейцина в 80 мп диоксана, помещенной в 500 мл автоклав, охлажденной на ледяной бане, медленно (с перемешиванием) добавляют концентрированной Н 804 . Охлаждая полученную смесь на ледяной бане, добавляют 80 мл жидкого иэобутилена. Смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают под аутогенным давлением примерно в течение 23 ч, После того, как основную часть нзобутилена выпускают иэ автоклава, слегка мутный раствор охлаждают на ледяной бане, а затем добавляют к охлажденной смеси 400 мп 1 н,НаОН и 500 мл ЕС ОПосле встряхи" вания в отдельной воронке происходит разделение слоев, водную фракцию промывают дополнительными 1 Омп ЕС, О. Ес 0 раствор встряхивают с 150 мл 0,5 н,НС 1. Кислую водную фракцию обрабажвают 2,5 н. ВаОН до достижения сильно щелочной реакции, а затем встряхивают с 250 мл Ее О. Ес О раствор сушат (М 8804), отфильтровывают и3 1264концентрируют на ротационном испарителе. После продолжительного вакуумирования под высоким вакуумом над паровой баней получают прозрачный бес.цветный маслянистый продукт в коли 5честве 9,04 г (657) . ЯМР-спектр показывает Наличие следов диоксана, ТСХ(9:1 СНС 1 - МеОН) показала одно3пятно .Третбутиловый сложный эфир - Н-(2, 1 о2-диметилциклопропанкарбонил)-РЬ-норлейцина,К раствору 8,98 г (48 ммоль) третбутилового сложного эфира РЬ-норлейцина и 5,05 г (50 ммоль) триэтиламина в 100 мл СН С 1, перемешиваемомуна ледяной бане под осушающей трубкой, по каплям (в течение 75 мин) добавляют раствор 6,39 г (48 ммоль2,2-диметилциклопропанкарбонилхлорида) в 50 мл СН С 1 . Осаждение ЕС 311.НС 1 происходит в процессе добавленияреактанта, особенно ближе к концу,По мере плавления льда смесь нагревается до комнатной температуры. Через 16 ч смесь встряхивают с 200 мл0,5 н,НС 1. СНдС 1 Фракцию промываютдополнительно 200 мл 0,5 н,НС 1, затем 2 х 200 мл 0,5 н, БаОН и окончательно - 200 мл Н 0 СН С 1 Фракциюсушат МАМБО, обрабатывают активированным углем и отфильтровывают черезпелит, фильтрат концентрируют на ротационном испарителе (под высоким вакуумом), Выход конечного продукта,представляющего собой светло-оранжевое вещество, составляет 11,93 г(88 );ТСХ (2:1 гексан - ЕС ОА с) показывает одно пятно. ЯМР- и ИК-спектры соответствуют соединению заданной структуры. После вызревания втечение нескольких дней неиспользованная часть этого продукта закристаллизовыватся. Т 52 - )65 С,Третбутил 2-(2,2-диметилциклопро-панкарбоксамидо)-2-метоксигексаноат,К раствору 6,37 г (22,5 ммоль)третбутилового сложного эфира Н-(2,2 иметилциклопропанкарбонил)-РЬ-норлейцина в 35 мл ЕС О, перемешиваемо- ому при комнатной температуре под атмосферой азота в отсутствие света,добавляют 2,69 мн (2,45 г, 22,5 ммольтретбутил гипохлорита. Через 15 миндобавляют раствор метоксида натрия,полученный растворением 0,52 г,Перемешивание продолжают при комнат 839 Ьной температуре под атмосферой азота в отсутствии света. Через 16,5 ч выпавший в осадок хнористый натрий отфильтровывают, Фильтрат разбавляют (С Н ) и последовательно промывают Зх 50 мл 0,5 н.НС 1, 50 мл насыщенного Ма СО и 2 х 50 мл воды (С Н ) фазУ осушают над МАЗО иотфильтровывают. Фильтрат выпаривают на ротационном испарителе. Бледное, золотисто-желтое масло (6,45 г) подвергают препаративной жидкостной хроматографии высокого давления, в результате чего отделяют и выделяют 273 и 496 мг двух диастереомеров - третбутил 2- (2,2-диметилциклопропанкарбоксамидд-метоксигексаноата)(соответствующие Т 114-118 и 124-125,5 ), а также 1,97 г самостоятельного изомера (очевидно Е) третбутил-(2,2-диметилциклопропанкарбоксамидо)-2-гексаноата (бесцветное масло).2-(2,2-Диметилциклопропанкарбоксамидо)-2-гексеновая кислота.Раствор 0,84 г (3,0 ммоль 7 третбутил-(2,2-диметилциклопропанкарбоксамидо)-2 гексеноата в 10 мл (С Н ) , насыщенный безводным НС 1, выдерживают при комнатной температуре под осушительной трубкой. Через 17 ч раствор выпаривают и оставшуюся массу растворяют в 1 О мп насьпщенного ИаНСО . Этот раствор промывают дополнительными 15 мп 0,5 н.НС 1, затем высушивают (МАЗО), отфильтровывают и выпаривают, в результате чего получают вязкое масло. Масло перекрнсталлизовывают из толуола. Выход белых кристаллов составляет 0,32 г (473), Т 119-122 . ТСХ (4:1 толуол АсОН) показывает одно пятно. ЯМР- спектр подтверждает образование практически чистого Е-иэомера, Примечание: при обработке аддукта метанола, третбутил 2-(2,2-диметилциклопропанкарбоксамидо)-2-метоксигексеноата, безводным НС 1 в среде (С Н )О в аналогичных условиях образуется тот же продукт.П р и м е р 9. (+) -2-2- (2, 2-Диметилциклопропанкарбониламино)-2-октеновая кислота, натриевая соль,Реагенты в (+)-2,2-Диметилциклопропанкарбоксамид, 7,0 г сложный этиловый эфир 2-кетооктановой кислоты,14,7 г; 50 мг пара - толуолсульфоновой кислоты", и 100 мл толуола загружают в 250 мл трехгорлую колбу под71264 ловушкой Дин-Старка, содержащей таблетки молекулярного сита. В течение 27 ч смесь интенсивно кипятят. Образовавшийся светло-желтый раствор охлаждают и выпаривают под вакуумом на водяной бане при 45 С в присутствии воды для облегчения удаления толуола. Оставшуюся массу суспендируют в 230 мл 2 н,МаОН и перемешивают при 30 С в течение 3 ч, затем температу- О ру повышают до 35.С и греют при ней еще в течение 2-1/2 ч до образования прозрачного раствора. Затем раствор охлаждают, добавляют 85 мл хлористого метилена и доводят рН 8,5 15 среды до с помощью 4 н.НС 1 при перемешивании. Органический слой отделяют и отбрасывают. Водный слой(366 мл) анализируют методом жидкостной хроматографии и определяют, что он содер жит 37,2 мг/мл, 873 Е-изомера. Затем добавляют другую порцию 85 мл СН С 1 и доводят рН до 4,5 при перемешивании. Органический слой отделяют, а водный слой вновь экстрагируют 50 мл 25 СНС и доводят рН до 4,5. Объединенные органические экстракты сушат На 804, отфильтровывают и выпаривают, полученный остаток растворяют в 150 мл иэопронанола н 5 мл воды и доводят Зо рН до 8,2 с помощью 2 н.БаОН. Образовавшийся раствор концентрируют до маслянистого остатка, который проьывают изопропанолом до тех пор, пока он не превратится в кристаллическое вещество, что свидетельствует о том, что основная часть воды удалена. Его перекристаллиэовывают из 120 мп изопропанола (охлажденного на льду в течение 1 ч), отфильтровывают, промыввают 50 мп холодного изопропанола, после чего - большим количеством ацетона, высушивают при 60 фС (0,1 мм) 2 ч, в результате чего получают 10,74 г (63,2 Х) кристаллического ма териала, характеризующегося одним пи. ком на жидкостной хроматограмме, Твл 241-243 С.Эти растворы сливают все вместе при перемешивании. Образовавшуюся кристаллическую массу нагревают и по. лучают два прозрачных слоя, вновь интенсивно перемешивают при охлаждении и получают кристаллический продукт. Этот продукт оставляют вызре вать при комнатной температуре на1 два дня, Затем его отфильтровывают, промывают 2 х 10 мл воды и 2 х 10 мл 839 8507,-ного метанола и высушивают подвакуумом. Выход сырой соли хининасоставляет 44,8 г (48,77) выход мо-.ногидрата, Т, 13-116 С,= 94,4 , С "- 1,0; СНС 1 . Этот материал перекристалгизовывают из ацетона и получают 24,35 г продукта,Т127-130 С. Очищенную хиноновуюсоль превращают в кислоту обработкойводным основанием и хлороформом, ипоследующей обработкой кислотой, врезультатечего получают (963) 3,9 г20апродукта, имеющего к 146,0Кислоту превращают в амид следующим образом. 30,5 г (+) кислоты втечение 5-10 мин добавляют через капельную воронку к охлажденному 10 Схлористому оксалилу 54 мл, содержащему 1 каплю диметилформамида. Смесьперемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Образовываетсялроэрачньй раствор, который добавляют к 100 мл хлористого метилена дляразбавления. Избыток хлористого оксалила удаляют концентрированием исмесь дважды лрокювают хлористым метиленом.ЮОбразовавшийся раствор разбавляютравным объемом хлористого метилена инепрерывно добавляют через капельнуюворонку примерно к 100 мл безводногожидкого аммиака, который разбавляют100 мл хлористого метилена.П р и м е р 10,. 2-2-(2,2-Дихлорциклопропанкарбоксамндо-бутеноваякислота. 2,2-Дихлорциклопропанкарбоксамид.7,1 г образца 2,2-дихлорциклопропенкарбонил хлорида по каплям добавляют к 75 мл концентрированного гидроксида аммония при интенсивном леремешивании. Температуру реакционной смеси поддерживают ниже 10 С на ледяной бане, Смесь перемешивают на ледяной бане в течение 30 мин, затем в течение 1 ч - при комнатной температуре. Водный аммиак выпаривают при пониженном давлении (баня при 50, С). Твердый остаток экстрагируют горячим зтилацетатом (Зх 30 мл). Экстракты упаривают до объема 40 мл и добавляют к ним 20 мл гексанаПосле охлажденияна льду твердый остаток отфильтровывают, промывают смесь этилацетат:гексан (1:1) н высушивают, в результате чего получают 2,7 г 2,2-дихлорциклопропанкарбоксамида, Т, 144 9 1264146" . ЯМР-спектр соотнетствует соединению заданной структуры.Найдено: С 31,26; Н 3,31; И 9,11;С 45,79,(С Н С 1 ИО) 5Рассчйтано: С 31,20; Н 3,27;И 9,10 С 1 46,04.Другие 1,3 г амида, Т 43-145можно извлечь из маточного раствора.Е -2-(2,2-ДихлорциклопропанкарбокОсамидо -2-бутеновая кислота.Смесь 1,53 г (15 ммоль) 2-кетомасляной кислоты, 1,54 г (10 ммоль) 2,2 дихлорциклопропанкарбоксамида и 10 млтолуола кйпятят в течение 2 ч с уда лением воды с помощью модифицированной ловушки Дин-Старка, содержащеймолекулярные сита (4 а). Добавляютдополнительные 0,7 г 2-кетомаслянойкислоты и реакционную смесь кипятятеще в течение 12 ч. Смесь охлаждают,разбавляют 20 мл толуола и экстрагируют ненасыщенным раствором бикарбоната натрия (Зх 10 мп). Экстракты объединяют, промывают серным эфиром и25подкисляют до рН 3 (по рН метру) концентрированной соляной кислотой. Восадок выпадает смолоподобное вещество, которое вскоре твердеет. Егоотфильтровывают, промывают водой ны-Зосушивают и перекристаллизовынают изнитрометана, н результате чего получают 423 мг Е-(2,2-дихлорциклопропанкарбоксамидо)-,2-бутеновой кислоты,Т 188-189,5 С. ЯМР-спектр соответст плнует соединению с заданной структурой.Найдено: С 40,48; Н 3,80; И 5,91;С 1 29,53.(С Н С 1 ИО )Рассчитано: С 40,36; Н 3,81;И 5,88; С 1 29,78.П р и м е р 1. Е-(2,2-Дихлорциклопропанкарбоксамидо)-2-октеновая кислота.Смесь 1,19 г (7,5 ммоль) 2-кетоно 45вой кислоты, 0,77 г (5,0 ммоль) 2,2 дихлорциклопропанкарбоксамида и 5 млтолуола обрабатывают и проводят реакцию аналогично примеру 10. Сыройпродукт (537 мг) очищают путем прев Оращения его в сложный метиловый эфир(ВР /СН ОН), препаративной ТСХ (селикагель а, 4, 1 гексан: ЕЮАс) и опылением до чистого Е-метилового сложного эфира,(0,3 М 1,1 ОН/СН ОН), врезультате чего получают 88 мг Е(2,2-дихлорциклопропанкарбоксамидо)2-октеновой кислоты и ниде частично 839 10кристаллической смолы. ЯМР-спектр(ДМБО-д); 9,68 (8, 1 Н, ИН)," 6,5081 е, 1 н н); 2,83 Б 1, 18, Нс1Сл Я1,97 Ь (й, 2 Н мл Н), 0,87 Я (,ХЗН, СН ).П р и м е р 12. Е -8-Бром-(2,2- диметилциклопропанкарбоксамидо)-2-ок теновая кислота.К суспензии 14,4 г (0,3 моль) , 507-ной дисперсии ИаОН н 360 мл толу- ола, охлажденной на ледяной бане, в атмосфере азота в течение 45 мин, добавляют раствор 146 г (0,6 моль) 1,6-дибромгексана и 57,6 г (0,3 моль) этил 1,3-дитиан-карбоксилата в 120 мл ДМФ. Охлаждающую баню удаляют и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь промывают водой (Зх 210 мл) осушают над МАЗО и выпаривают при пониженном давлении, в результате чего получают 79,5 г желтого маслянистого продукта, содержащего требуеьвпЗ безводный дитиан, 1,6-дибромгексан и минеральное масло. Этот сырой продукт используют для проведения следующей реакции беэ очисткиК суспензии 426 г (2,4 моль) Ибромсукцинамида в 800 мл ацетонитрила и 200 ип воды в течение 45 миндобавляют раствор сырого дитиана в100 мп ацетонитрила, Температуру реакционной смеси поддерживают ниже25 С с помощью ледяной бани. Послеперемешинания при 20 С н течение10 мин темно-красную реакционнуюсмесь выливают н 2 л смеси гексанСН С 1 (1:1). Раствор встряхивают снасьпценным раствором Иа НБО э (2 хх 400 мл) и водой (1 х 500 мл) . Затеи400 мл насьпценного раствора Юа СОЗ2небольшими порциями добавляют к раствору (интенсивное выделение СО ).После окончания пенообразования воронку трясут и водный слой отделяют.Органический слой экстрагируют насыщенным раствором Иа СО (400 мл) иводой (500 мл) и сушат над М 8804,После удаления растворителя при пбниженном давлении получают 133,8 гсырого сложного бромкетоэфира, содержащего 1,6-дибромгексан и минеральное масло. Этот сырой продукт используют без очистки для проведенияследующей реакции, 126483911Смесь 133,8 г сырого сложного бромкетоэфира, 133 мл 507-ной бромисто-водородной .кислоты и 267 мл уксусной кислоты нагревают при 90 С (внутренняя температура) в течение 75 мин. Темный раствор выпаривают при пониженном давлении до тех пор, лока не удалена основная часть уксусной кислоты, Остаток растворяют в.500 мл серного эфира, промывают водой (2 х О 100 мл) и экстрагируют насыщенным раствором МаНСО ,(Зх 200 мл). Объединенные НаНСО экстракты экстрагизруют серным эфиром (2 х 100 мл) и подкисляют концентрированной НС 1. Обра зовавшееся масло экстрагируют эфиром (Зх 200 мл). Эфирные экстракты промывают водой (1 х 100 мл) и насыщенные щелоком (1 х 100 мл) сушат над МАМБО После удаления серного эфира при по ниженном давлении получают 46,2 г чистой бромкето кислоты, гомогенной по данным ТСХ (силикагель, 4:1 толуол - уксусная кислота). ЯМР-спектр соответствует соединению требуемой 25 структуры.Смесь 46,1 г (0,194 моль) бромкето кислоты, 17,6 г (0,156 моль) 2,2- диметилциклопропанкарбоксамида и 450 мл толуола греют при температуре 30 кипения в течение 13 ч, собирая воду в маленькой ловушке Дин-Старка. После охлаждения прозрачную реакционную смесь экстрагируют насыщенным раствором НаНСО (4 х 100 мл), объединенные экстракты промывают серным эфиром (2 х 100 мл), а затем доводят до 3,5 (по рН -метру) добавлением концентрированной НС 1. Образовавшееся масло вскоре закристаллизовывается. Оста ток отфильтровывают, хорошо промывают водой и высушивают. После пере- кристаллизации из ацетонитрила получают 22,5 г Е-бром-(2,2-.диметилциклопропанкарбоксамидо)-2-октено вой кислоты. Т 151-153 С гомоген. ной по данным ТСХ (4:1 толуол-уксусная кислота). ЯМР-спектр соответствует соединению требуемого строения.Найдено: С 50,66; Н 6,96; Н 4,45; Вг 23,95.(С Н ВгНО )Рассчйтано: С 50,61; Н 6,67; Ю 4,22; Вт 24,05.На основе этой методики были получены следующие-бромсоединения:Е-б-бром-(2,2-диметилциклопро,панкарбоксамидо)-,гексеновая кислота Е-бром-(2,2-дпметилциклопропанкарбоксамидо)-гектеновая кислота;Е-бром-(2,2-диметилциклопропанкарбоксамидо)-2-ноненовая кислота;Е-)О-бром-(2,2-диметилциклопропанкарбоксамицо)-еценовая кислота;Е-бром-(2,2-диметилциклопропанкарбоксамидо)-октеновая кислота.Изучение расположения тиенамицина, его природных аналогов и полусинтетических производных позволило выявить основное метаболическое расщепление путем элюминации в различных изученных видах живых организмов (мьппи, крысы, собаки, шимпанзе, резус-обезъяны). О степени метаболизма можно судить по низким мочевым выделениям и коротким периодам полураспада плазмы. Этот распад протекает по механизму лактамного расщепления под действием почечной дипептидазы (Е.С.3.4.13.11).Для того, чтобы продемонстрировать способность соединений формулы 1 подавлять действие почечного фермента дипептидазы, была: применена методика исследования 1 п ч.го. Она позволяет измерять способность соединений ингибировать гидролиз глицилдегидрофенилаланина (ГДФ) с помощью солюбизированной дипептидазы, выделенной из свиной почки. Методика заключается в следующем: к 1. мл системы, содержащей 50 мм МОПС (3-Н- морфолино пропансульфоновой, кислоты) буфера, рН 7,1 добавляют 6 мг лиофилизированного фермента и испытуемое соединение при конечной концентрации 0,1 мм. После 5 мин выдержио вания в термостате при 37 С добавляют ГДФ при конечной концентрации его 0,05 мм. Термостатирование продолжают еще в течение )О мин при 37 С и гидролиз ГДФ измеряют поизменению оптической плотности во времени при 275 нм. Ингибирование действия фермента определяют при сравнении с результатами контрольного опыта, проводимого беэ ингибитора Кд. Это концентрация ингибитора, при которой достигается 507-ное ингибирование фермента.В качестве субстрата в этом методе используется ГДФ по сравнению с тиенамицином, так как она характеризуется значительно более высокой максимальной скоростью гидролиза почечной дипептидаэы, что позволяет сни(СН ) СН(СН )СН СН(СН )СН СНзз сн(сн )сн(сн ) сн(сн,сн,сн,),ЭО Сз а ЯОз11 С Н 1 ЬЯОЗз ъз 13. С Н ЯОз 47 Сщ, Н,ЯО, 34 С Н Ю 53 С, Н ЯО 43 С Н,ЯО 7 С,Н ЯОз 8 С Н Вгмоз51 С Н ЯОзз3 СН ЯО 2 С, Нд ЯО 28 С, Нз ЯОз Продолжение табл. 1 С,Н,Я С,Н,Я С,Я,Н С,Н,Я С,Н,Я С,Н,Я С,Н,Я С,Н,Я С,Н,Я С,Н,Я СНеЯ С,Н,Я С,Н,Я С,Н,Я С,Я,Н С,Н Я С,Н,Я С,Н,Я (56)