Способ выделения ацетилхолинэстеразы из эритроцитов теплокровных животных
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
О П И С А Н И Е 181980ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Соеетскик Социалистические Республикависимое от авт. свидетельствал. 531, 1/03 ЗОЬ, 2,Ю 4 1001434/31-16 Заявлено 10.1 Ъ.19с присоединением Приоритет аявкиКомитет оо делатт иаобретеииЯ и открыти ори Совете Миыиетрое СССР7,1966. Бюлл пь1 ублпковапо 21 ата опубликования описания 15.ЧП.1966 4.Ьр. Певзне аявитель Институт эволюционной физиологии и биохимии ОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ АЦЕТИЛХОЛИНЭСТЕРАЗЪ ЭРИТРОЦИТОВ ТЕПЛОКРОВНЫХ ЖИВОТНЫХ Известен способ выделения препарата ацетилхолинэстеразы из эритроцитов теплокровных животных, заключающийся в том, что эритроциты отмывают от плазмы, гемолизируют, осакдают и лиофилизируют строму, обрабатывают ее бутанолом с последующей экстракцией, очисткой и сушкой, Однако активность препарата, изготовленного указанным способом, очень низка.По предлагаемому способу в качестве детергента используют первичный октиловый спирт нормального строения,П р и м е р. Свежую дефибринированную кровь центрифугируют 30 вин, сыворотку отсасывают и удаляют. Затем эритроциты отмывают шесть-семь раз 0,9%-ным раствором поваренной соли. К 1 л отмытых эритроцитов для гемолиза их добавляют 6 л воды и 68 лл 1 М раствора уксусной кислоты. Получающаяся при этом строма оседает в течение 10 - 24 час. Гемолизат над осадком стромы декантируют с помощью сифона, а осевшую внизу строму взмучивают в 10 л 0,01 М раствора ХаНРО, После оседания стромы через 10 - 24 час жидкость удаляют. Для удаления ХаН,РО к осадку добавляют 2 л дистиллированной воды и центрифугируют. Плотный осадок стромы смешивают с 500 лл фосфатного буфера, и полученную смесь подвергают лиофильной сушке. К сухой строме добавляют октиловый спирт и через 10 лиц центрифугируют, Из осадка стромы фермент экстрагируют 0,01 М фосфатным буфером и, спустя60 лгия, смесь центрифугнруют, Раствор фер 5 мента добавляют к влажному гидроксплапатитуиз расчета 1,0 - 1,5 г сухого адсорбентана 100 лгл раствора, - а смесь центрифугируют 10,пан при 5000 оборотов. Для удаленияоктплового спирта раствор фермента фильт 10 руют через колонку, заполненную сефадексомд=-50. Полученный препарат в 300 раз превышает удельную активность исходного материала. Молекулярная активность составляет350 000 единиц,15 Препараты могут быть использованы дляопределения антихолинэстеразных свойствфосфороорганическпх и других соединений,применяемых в качестве инсектицидов и лекарственных веществ.20Предмет изобретенияСпособ выделения ацетилхолинэстеразы изэритроцитов теплокровных животных путем экстрагирования фермента из стромы эритроци 25 тов после разрушения липопротеинового комплекса с помощью детергента, отличающийсятем, что, с целью сохранения активности ацетилхолинэстер азы в процессе выделения иочистки, в качестве детергента используютЗ 0 первичный октиловый спирт нормальногостроения.
СмотретьЗаявка
1001434
Институт эволюционной физиологии, биохимии имени И. СечёттоЙй
МПК / Метки
МПК: C12N 9/18
Метки: ацетилхолинэстеразы, выделения, животных, теплокровных, эритроцитов
Опубликовано: 01.01.1966
Код ссылки
<a href="https://patents.su/1-181980-sposob-vydeleniya-acetilkholinehsterazy-iz-ehritrocitov-teplokrovnykh-zhivotnykh.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ выделения ацетилхолинэстеразы из эритроцитов теплокровных животных</a>
Предыдущий патент: Устройство для изготовления творога
Следующий патент: 181981
Случайный патент: Способ получения непрерывно-литого слитка и установка для его осуществления