C12N 15/32 — кристаллические белки бацилл
Рекомбинантная плазмидная днк раусi 35а, кодирующая энтомоцидный токсин, штамм бактерий methylobacillus flagellatum продуцент энтомоцидного токсина
Номер патента: 1628527
Опубликовано: 30.10.1993
Авторы: Азизбекян, Баранов, Загнитко, Залунин, Карасин, Остерман, Степанов, Стеркин, Тюрин, Фрунджян, Хачатурян, Цыганков, Честухина, Чистосердов
МПК: A01N 63/00, C12N 15/32
Метки: 35а, flagellatum, methylobacillus, бактерий, днк, кодирующая, плазмидная, продуцент, раусi, рекомбинантная, токсин, токсина, штамм, энтомоцидного, энтомоцидный
...проводят следующим образом: выращивают Е,со 11 С 600 на средеВ до плотности ОДуо=1,0 едпри 1=37"С, 1,5мкл клеточной суспензии. охлаждают иосаждают центрифугированием, супернатант выбрасывают. Все дальнейшие процедуры проводят при 1=0 - 2 С. Клеткисуспендируют в 1 мл охлажденного 50 мМСаС 1 и инкубируют 20 мин, Затем клеткиосаждают центрифугираванием, супернатант отбрасывают. Осадок клеток суспендируют в 100 м кл 50 м М Са С 12, доба вля ют 5 м кл лигазнай смсси и выдерживают 40 мин, Затем клетки переносят на 42 С на 2 мин и добавляют 1 млВ среды, Клетки в среде инкубируют 1 ч без аэрации при 370 С, а затем высеваются на чашки, содержащие 0,4,/О глюкозы, 80 мкг/мл треонина и лейцина, 1 мкг/мл тиамина, 100 мкг/мл Ар и Яп. Из...
Рекомбинантная плазмидная днк рва1418, кодирующая альфа амилазу bacillus amyloliquefaciens и штамм-бактерий bacillus amyloliquefaciens продуцент альфа-амилазы bacillus amyloliquefaciens
Номер патента: 2003689
Опубликовано: 30.11.1993
Авторы: Азизбекян, Дебабов, Йомантас, Козлов, Попов, Стеркин
МПК: C12N 15/32, C12N 15/56, C12N 15/75 ...
Метки: amyloliquefaciens, bacillus, альфа, альфа-амилазы, амилазу, днк, кодирующая, плазмидная, продуцент, рва1418, рекомбинантная, штамм-бактерий
...содержит 10 мл 1%- ного растворимого. крахмала, растворенного в 15 мМ йа-К-фосфатном буфере, рН 6,0, и 5 мл исследуемого образца (разведенного в 2 мМ ацетатном буфере, рН 6,0, 03, мМ СаС 2, 100 мМ МаС), Контроль вместо исследуемого образца содержит 5 мл буфера для разведения фермента, Пробы инкубируют при 30 С 10 мин. Реакцию останавливают добавлением к 1 мл реакционной смеси 10 мл 0,1 М раствора НС. Из полученной смеси отбирают 1 мл и переносят в 10 мл раствора йода, содержащего 0,0025% Л и 0,025% КЛ, Реакционную смесь выдерживают при 20 С.20 мин и измеряют оптическую плотность раствора при длине волны 656 нм, Контрольный раствор имеет синюю окраску, а опытные образцы приобретают фиолетовый цвет, Контрольный раствором при...